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文档简介
1、选修3现代生物科技专题中的流程图1基因工程的基本操作流程图生物材料蛋白质mRNA碱基排列顺序DNAmRNADNA氨基酸排列顺序PCR一定大小范围DNAcDNA基因组文库cDNA文库获取目的基因酶:限制酶、DNA连接酶运载体:质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒构建表达载体方法:植物细胞:农杆菌转化法、花粉管通道法、基因枪法动物细胞:显微注射技术微生物细胞:Ca2+处理,增大细胞壁的通透性,得到感受态细胞。导入受体细胞得到转基因生物目的基因检测与鉴定目的基因是否整合到受体的染色体上观察/检测抗原-抗体杂交DNA分子杂交mRNA个体蛋白质分子杂交是否出现杂交带目标性状2 PCR技术的原理示意图模板DN
2、A变性:加热至9095 原理:DNA双链复制解旋成单链DNA复性:冷却至5560变性:加热至9095Taq酶从引物起始进行互补链的合成双链DNA引物结合到互补DNA链延伸:加热至7075需要热稳定DNA聚合酶和4种游离的脱氧核苷酸3蛋白质工程流程图分子设计DAN合成预期功能蛋白质三维结构氨基酸序列多肽链基因DNA生物功能mRNA折叠转录翻译外植体(离体的植物组织、器官、细胞)消毒4植物组织培养技术的操作流程接种培养基准备培养基脱分化(避光:有利于脱分化)培养基包括:琼脂、无机营养物、有机营养物、激素(生长素和细胞分裂素)薄壁细胞特点:排列疏松,高度液泡化。愈伤组织再分化(光照:有利于叶片内叶绿
3、素的合成)胚状体或丛芽试管苗原理:植物细胞的全能性正常植株5植物体细胞杂交技术操作流程图 原理:细胞膜的流动性;植物细胞的全能性甲原生质体乙植物体细胞甲植物体细胞酶解法去细胞壁所需的酶:纤维素酶、果胶酶乙原生质体诱导融合诱导方法:物理法(离心、振动、电激)化学法(聚乙二醇)融合的原生质体再生出细胞壁高尔基体活跃(杂种细胞产生标志)杂种细胞筛选脱分化愈伤组织再分化胚状体多倍体,同时具有甲、乙的性状。植物体细胞杂交技术完成标志杂种植株6动物细胞培养过程示意图 原理:细胞增殖动物组织块剪碎组织胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理单个细胞加入细胞培养液细胞悬液培养条件:无菌无毒环境 一定的营养(特别加入血清) 适
4、宜的温度和pH 含95%空气加5%CO2的气体环境(CO2主要作用是维持培养液的pH)原代培养细胞贴壁,接触抑制胰蛋白酶处理,分瓶传代培养9单克隆抗体制备过程示意图特定抗原反复注射小鼠提取(效应)B淋巴细胞小鼠骨髓瘤细胞体外培养诱导融合诱导方法:电激、聚乙二醇、灭活的病毒多种融合细胞筛选(选出杂交瘤细胞)特点:既能迅速大量繁殖,又能产生专一的抗体多种杂交细胞克隆化培养,多次检验,筛选得到专一抗体检验阳性的杂交瘤细胞能产生特定抗体的杂交瘤细胞体外培养杂交瘤细胞小鼠体内培养杂交瘤细胞提纯、制备提纯、制备单克隆抗体特点:灵敏度高,特异性强,可大量制备7动物体细胞核移植过程流程图(一):生殖性克隆牛卵
5、巢高产奶牛采集采集卵母细胞体细胞体外培养M期卵母细胞体外培养去核供体细胞去核卵母细胞将供体细胞注入去核卵母细胞,电刺激使其两两融合重构细胞体外培养早期胚胎移入受体(代孕母牛)体内,发育,分娩犊牛8动物体细胞核移植过程流程图(二):治疗性克隆去核卵母细胞体细胞病人融合重构细胞体外培养胚胎干细胞体外培养,诱导分化免疫匹配的组织器官免疫匹配的移植10哺乳动物受精卵的发育受精卵卵裂(有丝分裂)2细胞卵裂16细胞早期胚胎(发育在透明带内进行)全能细胞有丝分裂桑椹胚有丝分裂内细胞团 (发育成胎儿的各种组织)滋养层 ( 发育成胎儿的胎膜和胎盘)囊胚有丝分裂、分化形成内、中、外3个胚层原肠胚有丝分裂、分化组织器官形成有丝分裂、分化成熟胚胎11胚胎移植示意图受体母牛优良母牛移植胚胎同期发情处理(孕激素等)超数排卵(促性腺激素)配种优良公牛冲卵、收集胚胎质量检查、培养妊娠、分娩优良犊牛12试管动物工厂化生产流程图卵巢新采集的或者冷冻的精液离心
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