无菌检查法-ppt课件

1、2019版药典无菌检查法的版药典无菌检查法的主要增修订情况主要增修订情况增、修订涉及范围增、修订涉及范围 前言部分前言部分 培育基部分培育基部分 灵敏度检查灵敏度检查 稀释液、冲洗液稀释液、冲洗液 方法验证方法验证 薄膜过滤法薄膜过滤法 培育及察看培育及察看 结果判别结果判别 表表1、表、表2和表和表3n 前言部分前言部分n1、新增规定：、新增规定：“ 防止污染的措施防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。不得影响供试品中微生物的检出。n2、新增规定：、新增规定：“ 日常检验还需求日常检验还需求对环境进展监控。对环境进展监控。n3、新增规定：、新增规定：“ 无菌检查人员必无菌检查人员必需具

2、备微生物专业知识，并经过无需具备微生物专业知识，并经过无菌技术的培训。菌技术的培训。 n 培育基部分培育基部分n1、删除：、删除：1. 硫乙醇酸盐流体硫乙醇酸盐流体培育基培育基 后括号用于培育好氧后括号用于培育好氧菌、厌氧菌的阐明菌、厌氧菌的阐明n2、删除：、删除：2. 改良马丁培育基改良马丁培育基 后括号用于培育真菌的阐后括号用于培育真菌的阐明明n n3、删除：、删除：3. 选择性培育基选择性培育基 项下项下 “ 如对氨基苯甲酸用于如对氨基苯甲酸用于磺胺类供试品、聚山梨酯磺胺类供试品、聚山梨酯80用于非水溶性供试品或用于非水溶性供试品或-内酰胺酶用于内酰胺酶用于-内酰胺类供试品等阐明。内酰胺

3、类供试品等阐明。 n修订为：修订为：n 在培育基灭菌或运用前参与适宜的中和剂、灭活剂或在培育基灭菌或运用前参与适宜的中和剂、灭活剂或外表活性剂，其用量同验证实验。外表活性剂，其用量同验证实验。n n 添加添加 表表1 常见干扰物的中和剂或灭活方法常见干扰物的中和剂或灭活方法干扰物干扰物可选用的中和剂或灭活方法可选用的中和剂或灭活方法 戊二醛戊二醛酚类、乙醇、吸附物酚类、乙醇、吸附物醛类醛类季铵类化合物（季铵类化合物（QACs）、）、对羟基苯甲酸酯对羟基苯甲酸酯汞类制剂汞类制剂双胍类化合物双胍类化合物碘酒、洗必泰类碘酒、洗必泰类卤化物卤化物乙二胺四乙酸（乙二胺四乙酸（EDTA）磺胺类磺胺类-内酰

4、胺类抗生素内酰胺类抗生素亚硫酸氢纳亚硫酸氢纳稀释法稀释法稀释法、甘氨酸、硫代硫酸盐稀释法、甘氨酸、硫代硫酸盐卵磷脂、聚山梨酯卵磷脂、聚山梨酯亚硫酸氢纳、巯基乙酸盐、硫代硫酸盐亚硫酸氢纳、巯基乙酸盐、硫代硫酸盐卵磷脂卵磷脂聚山梨酯聚山梨酯硫代硫酸盐硫代硫酸盐镁或钙离子镁或钙离子对氨基苯甲酸对氨基苯甲酸-内酰胺酶内酰胺酶表表1 常见干扰物的中和剂或灭活方法常见干扰物的中和剂或灭活方法n 培育基部分培育基部分n 4、按顺序陈列归类培育基、按顺序陈列归类培育基1.4. 均为直接用于无菌检查的液体培育均为直接用于无菌检查的液体培育基。基。n 培育基灵敏度检查部分培育基灵敏度检查部分n1、修订了黑曲霉的孢

5、子悬液制备方、修订了黑曲霉的孢子悬液制备方法法 n 删除了删除了“用管口带有薄的无菌用管口带有薄的无菌棉花或纱布能过滤菌丝的无菌毛细棉花或纱布能过滤菌丝的无菌毛细吸管吸管 吸出孢子悬液的操作方法吸出孢子悬液的操作方法n2、新添加稀释后的任务用菌液的保、新添加稀释后的任务用菌液的保管条件和保管期限：管条件和保管期限：n “ 菌液制备后假设在室温下放置，菌液制备后假设在室温下放置，应在应在2小时内运用，假设保管在小时内运用，假设保管在28，可在，可在24小时内运用。黑曲霉孢小时内运用。黑曲霉孢子悬液可保管在子悬液可保管在28，在验证过，在验证过的储存期内运用。的储存期内运用。n 稀释液、冲洗液及其

6、制备方法部分n2019版： 1. 0.1%蛋白胨水溶液n 2. pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液n 2019版新添加：n “可根据供试品的特性，选用其他阅历证的适宜的溶液作为稀释液、冲洗液。方法验证实验部分方法验证实验部分1、验证实验用菌种及菌液制备在培育基灵敏度所用菌种的根、验证实验用菌种及菌液制备在培育基灵敏度所用菌种的根底上，删除了铜绿假单胞菌，增订了大肠埃希菌。底上，删除了铜绿假单胞菌，增订了大肠埃希菌。 2 2、验证实验中样品用量、验证实验中样品用量修订为：修订为： 薄膜过滤法验证实验样品量：薄膜过滤法验证实验样品量： “ “ 取每种培育基规定接种的供试品总量按取每种培育基规定接种的供

7、试品总量按薄膜过滤法过滤。薄膜过滤法过滤。 直接接种法验证实验样品量：直接接种法验证实验样品量：“其中其中1 1管接入每支培育基规定量的供试品管接入每支培育基规定量的供试品量，量，“ 明确了验证实验所需样品量是供明确了验证实验所需样品量是供试品的检验量而不是供试品的检验数量。试品的检验量而不是供试品的检验数量。n供试品的无菌检查部分供试品的无菌检查部分n1、阳性对照用量：、阳性对照用量：n 原：原：“假设采用直接接种法，应添加供假设采用直接接种法，应添加供试品试品1支或瓶作阳性对照用。支或瓶作阳性对照用。n修订为修订为 ：假设采用直接接种法，应添加：假设采用直接接种法，应添加供试品无菌检查时每

8、个培育基容器接种供试品无菌检查时每个培育基容器接种的样品量作阳性对照用。的样品量作阳性对照用。n因假设是液体制剂，应该采用薄膜因假设是液体制剂，应该采用薄膜过滤法，假设是固体制剂每管接种量能过滤法，假设是固体制剂每管接种量能够不止够不止1支或瓶，应按验证的方法确支或瓶，应按验证的方法确定。定。n供试品的的无菌检查部分供试品的的无菌检查部分n 薄膜过滤法：薄膜过滤法：n1、新增规定：抗生素供试品应选择、新增规定：抗生素供试品应选择低吸附的滤器及滤膜低吸附的滤器及滤膜n2、新增规定：对每片滤膜的总冲洗、新增规定：对每片滤膜的总冲洗量不得过量不得过1000mln3、新增规定：所用冲洗量、冲洗方、新增

9、规定：所用冲洗量、冲洗方法同验证实验法同验证实验 供试品的无菌检查部分供试品的无菌检查部分 薄膜过滤法薄膜过滤法4、增、修订无菌气喷雾剂供试品的检验、增、修订无菌气喷雾剂供试品的检验方法方法新增规定：冰室的温度应至少为新增规定：冰室的温度应至少为-20，添加：开启容器后添加：开启容器后 “将供试品转移至无菌容器将供试品转移至无菌容器中的操作步骤。中的操作步骤。 供试品的无菌检查部分供试品的无菌检查部分 薄膜过滤法薄膜过滤法5、增、修订：装有药物的注射器供试品的检验方、增、修订：装有药物的注射器供试品的检验方法法删除删除 “装上无菌针头非包装中所配带的装上无菌针头非包装中所配带的 修订为修订为

10、“取规定量，排出注射器中的内容物，假设取规定量，排出注射器中的内容物，假设需求可吸入稀释液或标签所示的溶剂溶解，直接过需求可吸入稀释液或标签所示的溶剂溶解，直接过滤滤 供试品的无菌检查部分供试品的无菌检查部分 直接接种法直接接种法原直接接种法中删除原直接接种法中删除-内酰胺类或磺胺类供试品内酰胺类或磺胺类供试品 n供试品的无菌检查部分供试品的无菌检查部分n 培育及察看培育及察看n对于培育对于培育14天后，不能从外观上判别天后，不能从外观上判别有无微生物生长时，删除了：有无微生物生长时，删除了：“或划线或划线接种于斜面培育基上接种于斜面培育基上 的规定。的规定。n同时删除了可根据斜面能否有菌生长

11、同时删除了可根据斜面能否有菌生长而判别的规定。而判别的规定。n 结果判别部分结果判别部分n新增订阳性对看管和阴性对看管新增订阳性对看管和阴性对看管的实验结果对于整体实验结果判的实验结果对于整体实验结果判别的作用：别的作用：n “ 阳性对看管应生长良好，阴阳性对看管应生长良好，阴性对看管不得有菌生长。否那么，性对看管不得有菌生长。否那么，实验无效。实验无效。n 表表1、表、表2和表和表3部分部分n 表表1n接种每种培育基所需的最少检验数量接种每种培育基所需的最少检验数量n备注中对供试品容器装量不够接种两种培育基备注中对供试品容器装量不够接种两种培育基的情况，明确规定最少检验数量应加倍。的情况，明确规定最少检验数量应加倍。 表表2液体制剂最少检验量及上市抽验样品液体制