蛋白聚糖1ppt课件

1、一、单糖的构造和性质一、单糖的构造和性质二、重要的单糖和单糖衍生物二、重要的单糖和单糖衍生物三、寡糖三、寡糖四、多糖四、多糖五、糖缀合物五、糖缀合物六、寡糖构造的分析六、寡糖构造的分析五、糖缀合物1、糖蛋白2、寡糖链的生物学功能3、蛋白聚糖4、脂多糖蛋白聚糖(proteoglycan)广泛存在的糖胺聚糖和蛋白聚糖 原核生物胞外多糖真核生物药用真菌银耳棘皮动物补品海参结缔组织关节软骨蹄筋皮肤常见的蛋白聚糖物质 结缔组织中含量较高：软骨、角膜基质、关节滑液、蹄筋、粘液、眼玻璃体等 银耳、燕窝、海参等保健品 葡萄糖胺、硫酸软骨素、透明质酸等成分的保健品和药物什么是蛋白聚糖？和糖蛋白的区别？ 蛋白聚糖

2、是蛋白质与硫酸化的糖胺聚糖共价衔接的大分子糖复合物。 Proteoglycans are a class of glycosylated proteins which have covalently linked sulfated glycosaminoglycans, (i.e., chondroitin sulfate, dermatan sulfate, heparan sulfate, heparin, keratan sulfate). 蛋白聚糖的分子组成和分类 中心蛋白 糖胺聚糖glycosaminoglycan，过去也称粘多糖：是具有多聚阴离子的杂多糖，由己糖醛酸或半乳糖与氨基己

3、糖构成的二糖单位反复几十到几百次组成的线性糖链。一个蛋白聚糖分子可含有1条到上百条GAG链。 衔接区寡糖糖胺聚糖的类型 透明质酸(hyaluronic acid, HA) 硫酸软骨素/硫酸皮肤素(chondroitin sulfate, CS/dermatin sulfate, DS) 硫酸角质素(keratan sulfate, KS) 硫酸乙酰肝素/肝素(heparan sulfate, HS/heparin, Hep) 糖胺聚糖衔接区寡糖 KS链的N-衔接和O-衔接：中心蛋白的分类 丝甘蛋白聚糖(serglycin)：M最小，约2万，含24个延续的Ser-Gly反复。 饰胶蛋白聚糖(de

4、corin)：M约3.6万，富含Leu反复序列，在结缔组织中参与调理胶原纤维的构成。 粘结蛋白聚糖(syndecan)： M约3.2万，具有跨膜构造。 可聚蛋白聚糖(aggrecan)：M很大，可聚集，是软骨中的主要构造分子。 某些蛋白聚糖如可聚蛋白聚糖能以一个透明质酸Mr高达20106分子为骨干构成典型的蛋白聚糖聚集体。蛋白聚糖的聚集体蛋白聚糖的聚集体软骨的可聚蛋白聚糖聚集体的构造表示图软骨的可聚蛋白聚糖聚集体的构造表示图五、糖缀合物 1、糖蛋白 2、寡糖链的生物学功能 3、蛋白聚糖 4、脂多糖1.革兰氏阴性细菌和鼠伤寒沙门氏菌的细革兰氏阴性细菌和鼠伤寒沙门氏菌的细胞壁外膜的特有成分。胞壁外

5、膜的特有成分。2.脊椎动物免疫系统应对细菌感染时产生脊椎动物免疫系统应对细菌感染时产生的抗体的原型靶子，因此也是细菌血清型的抗体的原型靶子，因此也是细菌血清型的重要决议因子。的重要决议因子。 脂多糖是革兰氏阴性的外膜的组成成脂多糖是革兰氏阴性的外膜的组成成分，构造较复杂分，构造较复杂,分子量超越分子量超越10000。脂多。脂多糖是热稳定的，易从细胞壁抽提、纯化。糖是热稳定的，易从细胞壁抽提、纯化。它是确定菌体抗原特性的决议因子，因此它是确定菌体抗原特性的决议因子，因此又称为又称为O-抗原。抗原。脂多糖分子由脂多糖分子由O-侧链、中心寡糖和侧链、中心寡糖和 A组组成的脂多糖构造后两部分合在一同又

6、叫成的脂多糖构造后两部分合在一同又叫R-中心。中心。O-侧链是由侧链是由24个糖基组成寡糖的个糖基组成寡糖的反复构造的长链。反复构造的长链。 中心寡糖是中心寡糖是910个糖基组成的分枝寡糖个糖基组成的分枝寡糖链，其中包括一种不常见的七碳糖链，其中包括一种不常见的七碳糖L-甘油甘油-D-甘露型庚糖甘露型庚糖(Hep)，和一种不常见的八碳糖酸，和一种不常见的八碳糖酸 3-脱氧脱氧-D-甘露型甘露型-辛酮糖酸辛酮糖酸(DO)。Hep和和DO的羟基部分地被磷酸、焦磷酸、乙醇胺和磷酸的羟基部分地被磷酸、焦磷酸、乙醇胺和磷酸乙醇胺取代。脂质乙醇胺取代。脂质A部分是脂多糖的骨架，根本部分是脂多糖的骨架，根本

7、组成单位是以组成单位是以 -1，6糖苷键相联的糖苷键相联的D-葡萄糖胺双葡萄糖胺双糖糖,其中一个糖基的其中一个糖基的 位上联着中心寡糖，两个糖位上联着中心寡糖，两个糖基的基的 和和 位上的羟基被磷酸取代位上的羟基被磷酸取代,其他位置上的羟其他位置上的羟基和胺基都被脂肪酸取代。脂质基和胺基都被脂肪酸取代。脂质A上的脂肪酸常上的脂肪酸常见的有见的有12C,14C，16C的饱和脂肪酸和的饱和脂肪酸和 -羟十四羟十四烷酸。烷酸。一、单糖的构造和性质一、单糖的构造和性质三、寡糖三、寡糖二、重要的单糖和单糖衍生物二、重要的单糖和单糖衍生物四、多糖四、多糖五、糖缀合物五、糖缀合物六、寡糖构造的分析六、寡糖构

8、造的分析1.糖蛋白的纯化。糖蛋白的纯化。2.从糖蛋白中释放出完好的寡糖。从糖蛋白中释放出完好的寡糖。3.寡糖的纯化。寡糖的纯化。4.寡糖的单糖组成测定。寡糖的单糖组成测定。5.寡糖的测序。寡糖的测序。糖蛋白寡糖糖蛋白寡糖寡糖混合物寡糖混合物用内切糖苷酶作用，产生寡糖1Ion-exchange chromatography2) Gel filtration 3) Lectin-Affinity chromatography分别的寡糖分别的寡糖纯化的寡糖纯化的寡糖强酸水解单糖单糖完全甲基化的糖完全甲基化的糖更小的寡糖更小的寡糖HPLC或衍生出的其它层析分析以及气液层析酸水解产生单糖，分子中除了糖苷

9、键涉及的羟基外，其它每个羟基都甲基化分别混合物中的片断 对每个寡糖分子进展甲基化和酶解分析核磁共振和质谱用CH3I,强碱进展彻底甲基化用特异性的糖苷酶进展酶促水解 混合物的组分混合物的组分 单糖单位的种单糖单位的种类和含量类和含量糖苷键的位置糖苷键的位置单糖的序列；糖苷单糖的序列；糖苷键的位置和构型键的位置和构型单糖的序列；单糖的序列；糖苷键的位置和构型糖苷键的位置和构型Analysis methods of sugar4h2019.9.21.甲基化分析法甲基化分析法 甲基化分析是研讨糖类构造的重要手段, 它用以确定糖苷键的衔接位置。主要过程是将糖的全部自在烃基经过甲基化反响转变为稳定性很强的

10、甲醚, 然后酸水解得到部分甲基化的单糖, 将它们转变为相应的糖醇乙酸酷, 用气相层析、气质联用等方法确定各种单糖残基的种类和相对含量, 进而可以推断糖的衔接及分支情况, 还可以了解反复单元中含糖残基的数目及种类。以上过程是最常用的方法。2。外切糖苷酶法。外切糖苷酶法1内切糖苷酶内切糖苷酶:它们水解聚糖链内部它们水解聚糖链内部的专注糖苷键，释放糖链片段，包括从的专注糖苷键，释放糖链片段，包括从肽链上释放聚糖链；肽链上释放聚糖链；2外切糖苷酶：它们只能从聚糖连的外切糖苷酶：它们只能从聚糖连的非复原端逐个切下单糖残基，并对单糖基非复原端逐个切下单糖残基，并对单糖基和糖苷键类型有专注性要求。和糖苷键类

11、型有专注性要求。3.质谱和核磁共振质谱和核磁共振NMR谱谱质谱：待测化合物分子吸收能量在离子源的电离室中后质谱：待测化合物分子吸收能量在离子源的电离室中后产生电离，生成分子离子，分子离子由于具有较高的能量，产生电离，生成分子离子，分子离子由于具有较高的能量，会进一步按化合物本身特有的碎裂规律分裂，生成一系列确会进一步按化合物本身特有的碎裂规律分裂，生成一系列确定组成的碎片离子，将一切不同质量的离子和各离子的多少定组成的碎片离子，将一切不同质量的离子和各离子的多少按质荷比记录下来，就得到一张质谱图。由于在一样实验条按质荷比记录下来，就得到一张质谱图。由于在一样实验条件下每种化合物都有其确定的质谱

12、图，因此将所得谱图与知件下每种化合物都有其确定的质谱图，因此将所得谱图与知谱图对照，就可确定待测化合物用电场和磁场将运动的离子谱图对照，就可确定待测化合物用电场和磁场将运动的离子带电荷的原子、分子或分子碎片按它们的质荷比分别后带电荷的原子、分子或分子碎片按它们的质荷比分别后进展检测的方法。测出了离子的准确质量，就可以确定离子进展检测的方法。测出了离子的准确质量，就可以确定离子的化合物组成。这是由于核素的准确质量是一多位小数，决的化合物组成。这是由于核素的准确质量是一多位小数，决不会有两个核素的质量是一样的，而且决不会有一种核素的不会有两个核素的质量是一样的，而且决不会有一种核素的质量恰好是另一核素质量的整数倍。质量恰好是另一核素质量的整数倍。核磁共振核磁共振NMR谱：谱：核磁共振主要是由