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1、关于我国SPF鸡(蛋)发展情况的综述摘要本文从SPF鸡(蛋)的概念,SPF鸡群的建立程序、生产要求、饲养管理及环境监测注意事项等方面对SPF鸡(蛋)进行了简要的介绍,同时阐明了SPF鸡(蛋)的发展历史及国内外的生产现状,综合分析了我国SPF鸡(蛋)产业发展中存在的主要问题并提出了改进措施,以期对我国SPF鸡(蛋)产业的发展提供良好的借鉴作用。一、SPF动物及SPF鸡(蛋)概述1.1 SPF动物的概念SPF动物即无特定病原体动物(SpecificPathogenFreeanimals,SPF),是指动物体内没有特定的微生物或寄生虫存在,但可能带有非特定的微生物和寄生虫的动物,也称三级动物。该级别
2、的动物除了一、二级动物应排除的病原外,不携带主要潜在感染或条件致病性病原以及对科研试验具有明显干扰作用的病原。SPF动物来源于无菌动物,必须饲养在屏障系统或隔离系统中,实行严格的微生物学控制。11.2 SPF鸡(蛋)的概念SPF鸡指无特定病原体鸡,SPF蛋指不含有国际规定的19种病原体(禽腺病毒、产蛋下降综合症、禽脑脊髓炎病毒、禽流感病毒、多杀性巴氏杆菌、禽呼肠孤病毒、禽白血病、禽贫血病毒、鸡痘病毒、鸡副嗜血杆菌、传染性支气管炎病毒、传染性法氏囊病病毒、传染性喉气管炎病毒、鸡马立克氏病病毒、鸡败血支原体、鸡滑液囊支原体、鸡新城疫病毒、网状内皮增生症病毒、鸡白痢沙门氏菌)2和相关抗体的卵。SPF
3、鸡的培育建立在对无菌鸡培育成功的基础上,最初是通过挑选生产性能良好的母鸡,经各种检测证实无主要传染病病原(特别是可经蛋垂直传播的病原),对种蛋消毒,孵育而成。SPF鸡(蛋)是生物制品的原材料。主要用于生物制品及有关制品的疫苗制作、检验、检疫,其生产繁育条件在万级净化环境设施条件下进行。31.3 SPF鸡群的建立一个指定的SPF鸡群是由未感染上述19种疾病的垂直传播病原的鸡建立的。这个鸡群建立于连续两代检测的指定SPF鸡群。一般建立和维持SPF鸡群时应该遵循的过程见表1。为建立新的SPF鸡群,必须对该SPF鸡群连续3代进行一系列的检测,第一代中所有鸡在20周之前至少要检测一次,确保不含禽白血病群
4、抗原,并经酶免疫分析(EIA)检测不含禽白血病病毒A、B、J亚型抗体。所有鸡还必须经检测不含垂直传播抗原的抗体。从8周龄开始鸡群检测不含沙门氏菌。临床检测从8周龄开始,鸡群不能有任何传染病症状。检测实验方法和指导原则都在表格中给与了陈述。从20周龄开始,鸡群进行指定SPF鸡的常规检测。之后2代也使用与此检测规定同样的步骤(除了产蛋前对每只鸡进行的垂直传播抗原的检测)。指定的SPF鸡群的所有检测结果必须连续3代显示无指定抗原。从同一地点的另一个单独设施中的指定SPF鸡群来源的鸡胚可以引入。从8周龄开始,这些新引入的鸡被认为是一个鸡群,并依照前面描述的检测步骤进行检测。41.4 SPF鸡场生产要求
5、SPF鸡场应保持相对独立、安全无污染、相对洁净、水电配套、交通便利、远离城区、养殖场、矿山、工厂、商业网点、主要交通要道。内部环境符合GBl49252001实验动物环境设施和GB50447-2008实验动物建筑技术规范。进入SPF鸡舍必须严格执行“SOP”进出入程序,进入SPF鸡舍的物品必须经过熏蒸、高压灭菌或酸化等消毒、或灭菌方法处理,表1SPF群的建立和维护的图表进展新种群建立无垂直传播病原体的群体20周龄之前,检测所有禽白血病抗原和抗体从第8周开始,进行沙门氏菌的检测和一般临床观察从第20周开始,对特定的病原体进行常规检测第2代20周龄之前,检测所有禽白血病抗原和抗体从第8周开始,进行沙
6、门氏菌的检测和一般临床观察从第20周开始,对特定的病原体进行常规检测第3代20周龄之前,检测所有禽白血病抗原和抗体从第8周开始,进行沙门氏菌的检测和一般临床观察4认定为SPF鸡群(如果所有的检测结果都合格)第3代从第20周开始,对特定的病原体进行常规检测产蛋后对垂直传播病原体进行检测后代从12周至20周,对鸡群进行两次5%的抽样,检测禽白血病抗原和其他病原的抗体从第8周开始,进行沙门氏菌的检测和一般临床观察从第20周开始,对特定的病原体进行常规检测产蛋后对垂直传播病原体进行检测人流、物流、动物流、气流严格分开、避免交叉感染。1.5 SPF鸡饲养管理注意事项及环境监测SPF鸡的饲养管理主要涉及到
7、以下几个因素:温度、湿度、喂料次数、饮水量、光照强度和时间、风机参数等.上述因素关系到SPF鸡的生存环境质量和SPF鸡是否达到国内和国际标准.同时应加强饲养场所的卫生消毒工作。SPF鸡饲养环境监测主要是对噪声、照明、空气中细菌及粉尘、温度、湿度、气流速度、换气次数、系统压力梯度和过滤器的过滤效率等进行测定,实施良好的监控机制是确保SPF鸡质量的重要措施.因此应特别注意饲养SPF鸡隔离器的安装使用,并加强对SPF鸡的饲养管理5。1.5.1温度:温度是育雏的关键因素。SPF鸡本身抵抗能力比普通鸡差,对外界的防寒能力极小,因此隔离器和孵化时的环境要接近,以减少雏鸡的温度应激,尤其是转入后的前3d特别
8、重要,此时保持适宜的温度有利于雏鸡体内卵黄的吸收。饲养时温度设置如下:前1周为3637C。以后每天减1C,直至降到中央空调控制的洁净室(饲养室)温度1825C。1.5.2湿度:由于饲养环境为负压环境,对湿度的要求也比较高。一般要求适宜的湿度为65%.要注意防止因雏鸡脱水,而造成饲养质量问题。同时,也要提高洁净室的洁净程度,一般采取向地面洒消毒水的方法.一方面可增加湿度;另一方面可以进行消毒。1.5.3喂料和饮水:根据实验需求,采用自由采食方式饲养或进行限食,也可根据实验的要求决定饲养方式。1. 5.4光照参数:前3do采用24h光照,强度为301x,以后每天减少1h的光照,直至降到16h为止,
9、以后就均按照该光照时间进行,关灯9:0016:00:开灯17:008:00。1.5. 5风机参数:饲养场所的送风机和排风机是独立的系统,保证饲养场所始终是负压环境,这是额定的.是不可调的。根据鸡的承受能力,可调节隔离器上面送风机和排风机。一般隔离器不能保证100Pa时,就需要更换风机,以保证其内部的负压。1.5.6卫生消毒:饲养场所每周打扫2次。每天都要进行消毒,饲养场所的墙角都是半径3-5cm的圆弧面.这样可减少死角有利于场内的打扫和消毒。二、国内外SPF鸡(蛋)发展历史鸡作为实验动物是从1789年Pasteur用鸡研究鸡霍乱开始的,1902年Bamson用鸡验证了动物遗传符合孟德尔的遗传定
10、律。以后,人们用鸡做肿瘤的发生和肿瘤免疫的研究,成功地研制出人类的第一个抗癌疫苗、鸡的马立克病疫苗。由于鸡繁殖快、卵生、胚胎在体外孵化,容易控制,易进行实验操作,成本低,一次可获得大量的鸡胚和细胞,在胚胎期,鸡的免疫系统发育不全,鸡胚和鸡胚细胞适宜做多种病毒的培养基,可用于病毒的分离、鉴定、传代、抗原和疫苗的生产等特点,深受研究者的喜爱。1950年首个商业性SPF鸡群在美国Sunrise农场建立;1959年,美国农业部地区家禽研究所根据研究需要建立供实验室研究用SPF鸡群;1960年美国SPAFAS公司成立,1993年被CharlesRiver公司收购,是目前全球最大的SPF种蛋及相关产品供应
11、商;1965年德国Lohmann公司成功建立了“Valo”品牌的SPF鸡群;在整个60年代中,一些国家的疫苗厂建立了自己的SPF鸡群;1973年英国Wickham实验室建立SPF鸡群,并于80年代在墨西哥、巴西、印度等国建立授权生产厂;1986年美国Hy-Vac公司建立,SPF蛋产量与Sunrise农场大致相同,1994年被德国Lohmann畜禽育种公司买下,澳大利亚于1974年由CSIRO建立SPF鸡群。纵观目前国际市场,SPF鸡产业已被美国CharlesRiver公司,德国Lohmann公司和美国Sunrise农场三大公司垄断,其生产量和销售量约占全球的80%以上。其中CharlesRiv
12、er是目前全球最大的SPF鸡及相关产品专营企业,相关产品近千种,其产品领域涉及:SPF种蛋、禽病诊断试剂、人及畜禽生物制品、各种实验试剂和与生命科学研究有关的产品等,范围广,规模大。到2010年,该公司已拥有11个SPF鸡生产厂,36幢产蛋鸡舍。其年产SPF种蛋可高达3660万枚。除满足其本国市场的需求外,目前正在积极开拓包括中国在内的国际市场,必将对一些中、小型SPF鸡生产厂家形成巨大的挑战。我国是一个潜在的利用SPF鸡和SPF种蛋的大国。但由于SPF鸡的饲养一次性投资比较大,技术、管理要求比较高等原因,在我国起步比较晚,规模也比较小。1979年我国农业部向哈尔滨兽医研究所下达SPF鸡培育及
13、相关微生物监控技术的研究任务;1983年,北京生物制品研究所利用小型隔离器,用美、德两国莱航SPF种蛋进行了小规模实验;山东省农科院1982年开始对SPF鸡进行研究,1985年首次利用国产净化设施和美国APAFAS的SPF种蛋进行饲养研究;北京实验动物研究中心与澳大利亚政府1986-1991年进行了为期五年的技术合作,建成为我国小儿麻疹疫苗生产提供SPF种蛋的全屏障设施,解决了我国人用疫苗SPF种蛋的供应问题,1991年又成功建成规模较大的SPF鸡场;同年,中国农业科学院哈尔滨兽医研究所利用澳大利亚援助的设备和从澳大利亚进口的SPF种蛋建成了国内一流哈尔滨国家级SPF种禽饲养室;1993年,南
14、锡等在中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,利用设有HEPA过滤装置的隔离器等设备,采用国内普通鸡(京白鸡)培育出无ALV、旧V、MDV和NDV等多种疫病的SPF鸡场基础群,并于1996年以此为原材料进行了我国SPF种鸡群培育的研究工作,现已取得阶段性进展。江苏南京药械厂SPF鸡场,采用国外先进设备和美国APAFAS的SPF种蛋。1997年开始投入使用,成为国内规模最大、技术先进白SSPF种蛋生产单位之一。1999年l1月,由中国农业大学、农业部中监所和山东省农科院家禽所联合起草的“中国SPF鸡微生物监控标准”颁布,并规定自2000年5月1日正式实施,这对我国的SPF鸡的发展起到了积极的推动作用。三
15、、中国SPF鸡(蛋)生产现状到2007年底为止,全国共有七家生产SPF鸡、蛋的企业,分别是中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(年生产能力为300万枚)、辽宁益康生物有限公司(年生产能力为150万枚)、北京实验动物研究中心(年生产能力为300万枚)、济南斯帕法斯家禽有限公司(年生产能力320万枚SPF蛋)、济南赛斯家禽科技有限公司(年生产能力480万枚SPF蛋卜山东省农业科学院家禽研究所(年生产能力150万枚SPF蛋)、中牧股份南京药械厂(年生产能力为100万枚)。7。据中国兽药监察所2006年统计,国内SPF鸡胚需要量约为2100万枚,之后农业部又审批通过了13种新的禽用活疫苗的注册,这在一定程度
16、上增加了对SPF鸡胚的需求,而且根据农业部2006年683号公告,新兽药的研究和检定要使用SPF鸡和SPF鸡胚,这又在一定程度上加大了SPF鸡胚的需求,最新预测SPF鸡胚的年需要量约在4000万枚左右。随着科学技术的发展,对实验动物性实验的结果精确性要求越严格,对实验动物的质量要求就越高,我国利用SPF鸡和SPF种蛋的趋势日益明显,需求量也不断地增加。市场的需求催生了企业的发展,自2007年以来,SPF鸡生产企业的发展势头很猛,原有企业纷纷扩大规模,新的企业不断出现,SPF鸡胚的生产能力迅速提高,有力地保证了国内生物制品生产的需求。据2010年最新调查统计,2009年全国16家SPF鸡生产企业
17、共生产SPF鸡胚约2396万枚,按现有SPF鸡群存养量推算,2010年国内SPF鸡胚生产量可达3600万枚以上,到2010年2月底,国内有18家企业领取SPF鸡生产许可证,预计2011年国内SPF鸡胚的产能可达4500-5000万枚,而且目前国内个别生物制品企业已开始从国外进口SPF鸡胚,考虑到国外SPF鸡生产企业进军中国市场可能带来的冲击,国内SPF鸡胚很多将呈供大于求的局面。8四、SPF鸡生产中存在的问题及改进措施SPF鸡生产企业的快速发展带来的好处不需多言,但同样也带来了很大的隐患。目前我国生产企业存在的问题不容小觑。4.1 缺乏规范的种子中心2005年,全国兽用生物制品生产企业通过GM
18、P验收后,生物制品的质量得到了显著提高,但我国的兽用生物制品质量,特别是禽用活疫苗尚未达到国际先进水平。制约其发展的瓶颈问题主要是禽用活疫苗的生产必须使用SPF鸡蛋作为制苗用材料。而国内还没有一家独立的供种单位。引种时,各SPF鸡场都是自行从美国进口种卵。由于办理手续很繁琐,严重影响了SPF鸡种卵的质量,而且花费甚多。4.2 质量检测问题目前国际上SPF鸡的检测已实现标准化,国内省级以上的兽医诊断实验室经资质认证后均有能力开展工作。但国内目前没有标准注册的诊断试剂生产,进口诊断试剂也几乎未在国内注册,没有销售许可文号,特殊需要进口诊断试剂,手续繁杂,价格也很高,因此目前国内绝大多数SPF蛋生产
19、单位尚未按标准进行检测。另一方面,国内绝大部分兽医诊断实验室没有通过国家实验室认可和国家计量认证,特别是SPF鸡的检测,因此不能出具合法的检测报告。目前,各SPF鸡(蛋)生产企业都是自己检自己的产品。各家在检测过程中应用的试剂、方法、每次检测的频率、检测次数各不相同,不能真实反映产品的质量状况。实际生产中还存在一些问题,比如:生产管理粗放,外源微生物的污染,环境及设施不符合标准,微生物不合格,对动物福利不关切等。4.3 改进措施针对以上问题,我们应从多方面进行改进,具体措施主要有:加强法制化管理,建立健全实验动物法律法规,加强宣传,加大执法力度。增加经费投入,开辟资金渠道,加大实验动物的投入力
20、度。争取国家财政经费,支持国家SPF鸡(蛋)保种中心、国家SPF鸡(蛋)质量检测机构、SPF鸡(蛋)基础性研究。建立国家SPF鸡保种中心,逐步形成全国实验动物保种中心网络,科学地维持和管理我国SPF鸡(蛋)资源,加强与世界各国SPF鸡(蛋)保种机构的交流合作。对SPF鸡(蛋)的弓|种、保种,全国实行统一规划,统一管理。建立和健全全国实验动物质量监测体系,进一步健全实验动物国家标准;在全国实行统一的SPF鸡(蛋)质量认证和通报制度,选择有条件的单位,作为国家认可的实验动物质量检测机构,承担实验动物质量检测任务。加强SPF鸡(蛋)行业技术队伍建设,稳定现有的实验动物技术队伍。进行SPF鸡(蛋)人才培养,采取多种形式,加强和规范SPF鸡(蛋)技术人员的培训和考核,提高SPF鸡(蛋)技术队伍的整体水平。为从事SPF鸡(蛋)生产管理人员提供学习、进修机会,促进科学管理。要特别重视和加强年轻人的培养,造就一批跨世纪人才。鼓励大学、研究院所开办培训班、进修班,加强技术交流和学术讲座。大力开展国际交流和合作,坚持改革,扩大开放,加强与世界各国和国际SPF鸡(蛋)学术组织的交流与合作。引进吸收国外先进技术、标准化体系和管理经验,努力寻求同国外在SPF鸡(蛋)学科领域的合作研究或合资经营。建立全国实验动物统计报告制度,建立实
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