益气活血药对心肌组织及H9C2细胞Cx43表达和凋亡的影响精品ppt课件PPT学习教案

1、会计学1益气活血药对心肌组织及益气活血药对心肌组织及H9C2细胞细胞Cx43表达和凋亡的影响精品表达和凋亡的影响精品ppt课件课件2心肌缝隙连接蛋白43心肌细胞凋亡n心血管系统疾病是危害人类健康的常见病。心肌缝隙连接蛋白43和细胞凋亡的异常在心血管疾病的发病过程中都扮演了重要角色。 第1页/共42页3第2页/共42页4第3页/共42页5n过度的细胞凋亡会加速心肌细胞的丢失，造成心功能的恶化，并促进心室重构的发生和发展。 第4页/共42页6第5页/共42页7第6页/共42页8第7页/共42页9第8页/共42页10参照文献，采用冠脉结扎法制作大鼠心肌梗死模型。王硕仁,王振涛,赵明镜,李敏.心气虚病

2、证动物模型及其评价体系的构建.中国实验动物学报.2002;10(1): 33-38. 第9页/共42页11结扎冠脉前 结扎冠脉后模型组 心功能比较n采用心电图和心脏超声评价心梗大鼠造模是否成功。n术后与术前比较，大鼠心电图ST段明显抬高。n取材前超声检查显示模型大鼠左心室内径明显扩大，室壁变薄，收缩运动减弱，心功能降低。第10页/共42页12第11页/共42页13n生脉低剂量组n生脉高剂量组n生脉和血塞通低剂量组n生脉和血塞通高剂量组第12页/共42页14第13页/共42页15第14页/共42页16第15页/共42页17第16页/共42页18sx 第17页/共42页19第18页/共42页20第

3、19页/共42页21第20页/共42页22 在芯片实验基础上，对心梗大鼠Cx43的基因和蛋白表达进行了验证，结果同样证实心肌梗死发生后Cx43 mRNA和蛋白的表达均明显降低。第21页/共42页23不同时间点两组心肌细胞凋亡百分率(%)的变化0510152025303天5天10天4周8周12周时间心 肌细 胞凋 亡百 分率 （% ）手术组边缘区假手术组边缘区 *与同一时间点假手术组比较* P 0 . 0 1 ；与其它时间模型组边缘区比较P 0 . 0 1 ；与3 、 5 、10 天、 12 周模型组 边 缘区比较P 0 . 0 1 ；与3 天 、5 天、12 周模型组 边 缘区比较P 0 .

4、0 1 在凋亡方面，我们动态观察了从冠脉结扎术后3天到12周，心肌细胞凋亡率的变化，模型组在各个时点凋亡率均明显高于假手术组。并且从3天到4周，模型组凋亡率先呈下降趋势，而后从4周到12周凋亡率又逐渐增加。第22页/共42页24第23页/共42页25室颤阈值的降低，表明心脏电稳定性差，容易发生室颤。与假手术组比较，心梗模型组室颤阈值降低，益气活血药治疗后室颤阈值提高。第24页/共42页26假手术组假手术组模型组模型组益气活血组益气活血组卡托普利组卡托普利组 取材时可见，模型组大鼠梗死范围较大，室壁变薄和心腔扩大明显。益气活血药治疗后，梗死范围有一定程度的缩小。第25页/共42页27 心肌梗死大

5、鼠的心重/体重比明显增加，益气活血药治疗后，脏体比值下降。第26页/共42页28 模型组左心室内径明显高于假手术组，益气活血药治疗后，左室内径变小。第27页/共42页29益气活血药治疗后，心肌梗死范围明显缩小。第28页/共42页30 心肌梗死大鼠Cx43 mRNA表达明显降低，益气活血药治疗后Cx43 mRNA表达增加。第29页/共42页31 免疫组化染色心肌Cx43呈棕黄色颗粒表达，假手术组界线清晰成线状排列，主要位于闰盘内，分布整齐。模型组Cx43表达明显减弱甚至消失，残存的Cx43界线不清，分布紊乱。与模型组比较，益气活血组和卡托普利组Cx43表达增加，分布比较整齐。 第30页/共42页32图像分析显示，模型组Cx43表达的强度和阳性面积均低于假手术组；益气活血药治疗后，Cx43的表达和面积均显著增加。第31页/共42页33第32页/共42页34 H9C2细胞HE染色 200 H9C2细胞HE染色 400第33页/共42页35第34页/共42页36Hoechst染色是一种经典而快速的细胞凋亡检测方法。正常细胞染色后细胞核呈蓝色；细胞发生凋亡时，染色质固缩，细胞核会呈致密浓染，或呈碎块状致密浓染，颜色高亮。第35页/共42页37第36页/共42页38第