版权说明:本文档由用户提供并上传,收益归属内容提供方,若内容存在侵权,请进行举报或认领
文档简介
1、微波辅助萃取微波辅助萃取气相色谱气相色谱质谱联用质谱联用 分析石蒜中的加兰他敏分析石蒜中的加兰他敏 指点教师:指点教师: 李攻科教授李攻科教授报告人:报告人: 汪军霞汪军霞1. 前言前言 n前苏联科学家初次分别出了加兰他敏。前苏联科学家初次分别出了加兰他敏。n加兰他敏是一种具有可逆性和选择性的乙酰胆碱酯酶加兰他敏是一种具有可逆性和选择性的乙酰胆碱酯酶抑制剂抑制剂AChE,可以作为治疗,可以作为治疗AD的药物。的药物。 1.1 加兰他敏及其氢溴酸盐的化学性质和组成加兰他敏及其氢溴酸盐的化学性质和组成分子式分子式 :C17H21NO3 分子量分子量 :287.36化学称号化学称号 :4a,5,9,
2、10,11,12-Hexahydro-3-methoxy-11-methyl-6H-benzofuro3a,3,2-ef2benzazepin-6-ol 1.2 分析研讨现状分析研讨现状u药理作用研讨概略药理作用研讨概略u加兰他敏的传统提取方法加兰他敏的传统提取方法u加兰他敏的分析检测方法加兰他敏的分析检测方法1.2.1 药理作用研讨概略药理作用研讨概略u重症肌无力重症肌无力u脊髓前角灰质炎小儿麻木症后遗症脊髓前角灰质炎小儿麻木症后遗症u术后肠肌麻木术后肠肌麻木u尿潴留尿潴留 u解箭毒解箭毒u阿尔茨海默病阿尔茨海默病1.2.1.1 药理作用特点药理作用特点u具有可逆性和选择性的乙酰胆碱酯酶抑具
3、有可逆性和选择性的乙酰胆碱酯酶抑制剂制剂AChEu作用时间长作用时间长u无毒性或致癌作用无毒性或致癌作用u 耐受性好耐受性好 1.2.2 加兰他敏的传统提取方法概述加兰他敏的传统提取方法概述n传统消费工艺:将石蒜经过乙醇热提,洗涤,萃取,重结晶,得到氢溴酸加兰他敏原料药。n缺陷:能耗高、原辅料损耗大、消费周期n 长,而且加兰他敏提取不完全。 1.2.3 加兰他敏的分析检测方法综述加兰他敏的分析检测方法综述u薄层色谱薄层色谱TLCu高效液相色谱高效液相色谱HPLC u气相色谱法气相色谱法GC u免疫分析法免疫分析法IA u高效毛细管电泳高效毛细管电泳HPCEu联用方法联用方法1.3 微波辅助萃取
4、技术微波辅助萃取技术u微波辅助萃取原理微波辅助萃取原理u微波辅助萃取特点微波辅助萃取特点u微波辅助萃取系统微波辅助萃取系统uMAE在植物提取中的运用在植物提取中的运用1.3.1 微波辅助萃取原理微波辅助萃取原理 u微波加热有两种机理:离子传导和偶极微波加热有两种机理:离子传导和偶极子转动。子转动。u物质吸收微波的程度主要取决于其介电物质吸收微波的程度主要取决于其介电常数,被萃取物质进入介电常数小,微常数,被萃取物质进入介电常数小,微波吸收才干相对较差的萃取剂中波吸收才干相对较差的萃取剂中 。 1.3.2 微波辅助萃取特点微波辅助萃取特点u升温速度快升温速度快u加热均匀加热均匀u选择性好选择性好
5、u萃取效率高萃取效率高u伴有生物效应伴有生物效应 1.3.3 微波辅助萃取系统微波辅助萃取系统 高压密闭微波萃取系统 : 磁控管 波导管 微波腔 波形搅拌器 循环安装 转台 1.3.4 MAE在植物提取中的运用在植物提取中的运用 u最早的报道来自最早的报道来自1986年,匈牙利学者年,匈牙利学者Ganzler K用微波提取了羽扇豆、玉米等作物中的油脂、用微波提取了羽扇豆、玉米等作物中的油脂、棉籽酚等有效成分棉籽酚等有效成分 。u国内外已有很多将国内外已有很多将MAE运用于中药中有效成运用于中药中有效成分提取的文献报道。分提取的文献报道。u本实验室的研讨人员在这方面也做了大量的本实验室的研讨人员
6、在这方面也做了大量的任务。任务。 2 实验部分实验部分u仪器及操作条件仪器及操作条件u试剂和样品试剂和样品u样品处置过程样品处置过程u定性和定量定性和定量2.1 仪器及操作条件仪器及操作条件 仪器仪器Mars型微波炉型微波炉CEM,USA;R201旋转蒸发仪上海申科机械研讨旋转蒸发仪上海申科机械研讨所;所;HP-6890GC-5973MSD配配G1701B.02.05任务站任务站Hewlett-Packard,USA;DB-5MS熔融毛细管柱熔融毛细管柱J&W,CA。操作条件操作条件u色谱条件:升温程序初温色谱条件:升温程序初温150 ,坚持,坚持3 min,以,以6 / min的速度
7、升至的速度升至300 ,坚持坚持5 min。进样口温度。进样口温度250 ,不分流,不分流进样。载气为高纯氦气,流速进样。载气为高纯氦气,流速1.0 mL / min。u质谱条件:接口温度质谱条件:接口温度280 ,EI,电子,电子能量能量70 eV,离子源温度,离子源温度230 ,四极杆,四极杆温度温度150 ,质量扫描范围,质量扫描范围50 550 amu。 2.2 试剂和样品试剂和样品u氢溴酸加兰他敏规范品购自氢溴酸加兰他敏规范品购自Sigma公司。公司。u甲醇、乙醇、石油醚沸程:甲醇、乙醇、石油醚沸程:90120 、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、盐酸、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、盐酸、浓氨水、碳酸钠
8、分析纯试剂,广州化浓氨水、碳酸钠分析纯试剂,广州化学试剂厂。学试剂厂。u石蒜:鳞茎棕黑色片状物,有特殊香味。石蒜:鳞茎棕黑色片状物,有特殊香味。2.3 样品处置过程样品处置过程u前处置:前处置: 粉碎,过筛,储存在枯燥器中。粉碎,过筛,储存在枯燥器中。u微波辅助萃取:定量称取样品放入微波微波辅助萃取:定量称取样品放入微波罐中,参与一定体积的萃取溶剂,在一罐中,参与一定体积的萃取溶剂,在一定的控制温度下萃取一定的时间。取出定的控制温度下萃取一定的时间。取出萃取液,过滤,滤液旋干后甲醇溶解,萃取液,过滤,滤液旋干后甲醇溶解,定容至定容至5 mL。u乙醇加热回流萃取:准确称取乙醇加热回流萃取:准确称
9、取1 g1 g石蒜石蒜样品,放入圆底烧瓶中,参与一定体积样品,放入圆底烧瓶中,参与一定体积的萃取溶剂,水浴加热回流的萃取溶剂,水浴加热回流2 h2 h后,冷后,冷却过滤,再旋转蒸发至近干,用甲醇定却过滤,再旋转蒸发至近干,用甲醇定容至容至5 mL5 mL,取,取1 L1 L用用GC-MSGC-MS测定。测定。2.4 定性和定量定性和定量 采用未经衍生化的采用未经衍生化的GC-MS方法进展定性,以峰面积方法进展定性,以峰面积定量,不分流进样,进样量定量,不分流进样,进样量1 L。 图一图一 加兰他敏甲醇规范溶液色谱图加兰他敏甲醇规范溶液色谱图4.006.008.0010.0012.0014.00
10、16.0018.0020.0022.0024.0026.0028.0030.0032.000200000400000600000800000100000012000001400000160000018000002000000220000024000002600000280000030000003200000340000036000003800000Time-AbundanceTIC: 0114S01.D 4.006.008.0010.0012.0014.0016.0018.0020.0022.0024.0026.0028.0030.0032.00020000040000060000080000
11、01000000120000014000001600000180000020000002200000240000026000002800000300000032000003400000360000038000004000000Time-AbundanceTIC: 0115Y3MP.D21 图二 石蒜样品的甲醇溶液色谱图标志为1的是加兰他敏的峰3 结果与讨论结果与讨论u微波萃取溶剂的选择微波萃取溶剂的选择u微波条件的优化微波条件的优化u微波辅助萃取方法的线性范围、检出限、微波辅助萃取方法的线性范围、检出限、回收率和精细度回收率和精细度u和传统方法的对比和传统方法的对比3.1 微波萃取溶剂的选择微
12、波萃取溶剂的选择u正确选择萃取溶剂是实现高效率萃取的关键正确选择萃取溶剂是实现高效率萃取的关键u 步骤。步骤。uMAE中,所选的溶剂应满足以下条件:中,所选的溶剂应满足以下条件:u 1 具有吸收微涉及将微波转化为热能的具有吸收微涉及将微波转化为热能的 u 才干;才干;u 2 可以选择性的从样品基体中将待测物分可以选择性的从样品基体中将待测物分别萃别萃u 取出来;取出来;u 3 方便于后续处置过程。方便于后续处置过程。u u 表1 不同溶剂萃取效率的比较 溶剂溶剂 甲醇甲醇 乙醇乙醇丙酮丙酮 乙酸乙酯乙酸乙酯加兰他敏加兰他敏的含量的含量0.02320.0064 3.2微波条件的优化微波条件的优化
13、 实验号实验号颗 粒 度颗 粒 度/mesh溶剂体积溶剂体积/ml辐射温度辐射温度/ C 辐射时间辐射时间 /min 峰面积峰面积相对峰面积相对峰面积 1 2040 10 65 511906302 36.8 2 2040 20 75 1521394576 66.1 3 2040 30 85 2527012145 83.5 4 4060 10 75 2522631878 69.9 5 4060 20 85 532366940 100 6 4060 30 65 1531475106 97.2 7 60 10 85 1518904841 58.4 8 60 20 65 2521981459 67.9
14、 9 60 30 75 525350629 78.3表表2 微波萃取条件的正交实验设计及峰面积结果微波萃取条件的正交实验设计及峰面积结果OAD9(43) 表3 各要素不同程度对应的峰面积之和及平均值% 注:Ki峰面积之和;ki峰面积平均值。 颗粒度颗粒度 mesh 溶剂体积溶剂体积 mL 辐射温度辐射温度 辐射时间辐射时间minK1 60313023 53443021 65362867 69623871K2 86473924 75742975 69377083 71774523K3 66236929 83837880 78283926 71625482k1 20194341 17814340
15、21787622 23207957k2 28824641 25247658 23125694 23924841k3 22078976 27945960 26094642 23875161 图三 颗粒度、溶剂体积、控制温度、辐射时间于萃取效率的影响 0.00E+001.00E+072.00E+073.00E+074.00E+075.00E+076.00E+077.00E+078.00E+079.00E+07回收率颗粒度溶剂体积辐射温度辐射时间影响因素水平1水平2水平3 表表4 优化的微波萃取条件优化的微波萃取条件 颗粒度颗粒度mesh溶剂体积溶剂体积 mL辐射温度辐射温度 辐射时间辐射时间 mi
16、n 4060 20 8553.3 微波辅助萃取方法的线性范围、微波辅助萃取方法的线性范围、检出限、回收率和精细度检出限、回收率和精细度 表表5 线性范围、检出限、回收率和精细度线性范围、检出限、回收率和精细度线性方程线性方程Y=3.3048E5X1.2784E7线性相关系数线性相关系数R0.9996线性范围线性范围10 100 mgL-1检出限检出限3.42 mgL-1回收率回收率99.3 %RSD7.9 %(n=6)3.4 和传统方法的对比和传统方法的对比 表表6 微波萃取法与乙醇加热回流萃取法测定微波萃取法与乙醇加热回流萃取法测定加兰他敏的结果比较加兰他敏的结果比较 加兰他敏的含量加兰他敏
17、的含量/ mgL-1 RSD/%(n=6)萃取时间萃取时间/min微波萃取法微波萃取法 96.64.45 乙醇加热回乙醇加热回流萃取法流萃取法99.4 9.91204. 结论结论 本实验建立了本实验建立了MAEGCMS分析石蒜中分析石蒜中加兰他敏的方法,并且利用正交设计实验优加兰他敏的方法,并且利用正交设计实验优化了微波萃取测定石蒜样品中加兰他敏的条化了微波萃取测定石蒜样品中加兰他敏的条件件,方法平均回收率方法平均回收率99.3 %,检出限,检出限3.42 mgL-1,RSD = 4.4 %,线性范围,线性范围10 100 mgL-1。将本方法与乙醇加热回流提取法相比,结果将本方法与乙醇加热回流提取法相比,结果阐明本方法省时、精细度好、操作简便,适阐明本方法省时、精细度好、操作简便,适宜于石蒜中加兰他敏的快速测定。宜于石蒜中加兰他敏的快速测定。 致致 谢谢 u在本论文的研讨任务和写作过程中,得到了许多人的在本论文的研讨任务和写作过程中,得到了许多人的指点、关怀和协助。指点、关怀和协助。u首先,要衷心赞赏我的导师李攻科教授,赞赏她对我首先,要衷心赞赏我
温馨提示
- 1. 本站所有资源如无特殊说明,都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
- 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等,如果需要附件,请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
- 3. 本站RAR压缩包中若带图纸,网页内容里面会有图纸预览,若没有图纸预览就没有图纸。
- 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
- 5. 人人文库网仅提供信息存储空间,仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑,并不能对任何下载内容负责。
- 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容,请与我们联系,我们立即纠正。
- 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。
最新文档
- 2024年满洲里市扎赉诺尔矿区中蒙医院高层次卫技人才招聘笔试历年参考题库频考点附带答案
- 2024年湘西土家族苗族自治州人民医院高层次卫技人才招聘笔试历年参考题库频考点附带答案
- 2024年07月浙江南京银行杭州临安支行阶段性社会招考笔试历年参考题库附带答案详解
- 2024年淮南市矿务局谢二职工医院高层次卫技人才招聘笔试历年参考题库频考点附带答案
- 2024年淄博市中医医院高层次卫技人才招聘笔试历年参考题库频考点附带答案
- 在安全方面的不足及改善
- 2024年07月江苏江苏长江商业银行科技信息类岗位招考笔试历年参考题库附带答案详解
- 企业产权登记流程
- 发热病理生理
- 培训教材制作
- 各种预混料配方设计技术
- 中铁二局工程项目全员安全教育培训考试试题(普工)附答案
- 08坦白检举教育
- 10、美的微波炉美食创意拍摄脚本
- 07FK02防空地下室通风设备安装PDF高清图集
- ANSI-ASQ-Z1.4-抽样标准培训教材
- 思想品德鉴定表(学生模板)
- 满堂支架计算
- MA5680T开局配置
- (完整word版)澳大利亚签证54表(家庭构成)
- 螺杆式风冷冷水(热泵)机组电路图
评论
0/150
提交评论