抗生素的分离

1、第二节第二节 抗生素的分离抗生素的分离砖头砖头分离抗生素产品时应注意的几个问题分离抗生素产品时应注意的几个问题 从发酵液中提取抗生素时，通常要注意以下几个问题从发酵液中提取抗生素时，通常要注意以下几个问题：1)发酵液的组成成分非常复杂发酵液的组成成分非常复杂，有数百种甚至更多，各种化合物的形状、大小、相对分子质量和理化性质都各不相同，有的迄今还是未知物，而且这些化合物在分离时仍在不断的代谢变化中。2)在发酵液中在发酵液中，有些抗生素含量很低或极微有些抗生素含量很低或极微，有的只有1/10 000，甚至更少。制备时，原材料用量很大，得到产品很少，与投料量相比“虎头蛇尾”。3)许多抗生素，一旦离开

2、了生物体内环境，很易变性许多抗生素，一旦离开了生物体内环境，很易变性和被破坏和被破坏，应十分注意保护这些化合物的生物活性，应十分注意保护这些化合物的生物活性，常选择十分温和的条件，尽可能在较低温度和洁净常选择十分温和的条件，尽可能在较低温度和洁净环境中进行环境中进行。一般来说制备的操作时间长、手续较繁琐。因为许多大分子在分离过程中，过酸、过碱、重金属离子、高温、剧烈的机械作用、强烈的辐射和机体内自身酶的作用，均可破坏这些分子的结构或生理活性。 4)抗生素的分离制备过程几乎都在溶液中进行抗生素的分离制备过程几乎都在溶液中进行，各种温度、pH、离子强度等参数，对溶液中各种组成的综合影响，常常无法固

3、定，有些实验或工艺的设计理论性不强，常带有很大的经验成分。因此，要建立要建立重复性好的成熟工艺，对生物材料、各种试剂及其重复性好的成熟工艺，对生物材料、各种试剂及其辅助材料等都要严格地加以规定。辅助材料等都要严格地加以规定。常用的的抗生素提取方法包括溶剂萃取法离子交换沉淀法膜分离法吸附法 菌体细胞的分离菌体细胞的分离固体悬浮物的去除固体悬浮物的去除蛋白质的去除蛋白质的去除重金属离子的去除重金属离子的去除色素、热原质、毒性物质等有机物质的去除色素、热原质、毒性物质等有机物质的去除改善培养液的处理性能改善培养液的处理性能调节适宜的调节适宜的PH和温度和温度 培养液预处理的主要内容培养液预处理的主要

4、内容 加热加热 由于加热可能使某些热敏感性蛋白发生不可逆的变性，因此这种预处理方法仅适用于对非热敏感性产品发酵液的预处理。适当加热之后，发酵液中的蛋白由于变性而凝聚，形成较大的颗粒，发酵液的粘度就会降低，一般加热的用65-80度。 调节调节PH值值 适当的PH值可以提高产物的稳定性，减少其在随后的分离纯化过程中的损失。此外，发酵液PH值的改变会影响发酵液中某些成分的电离程度，从而降低发酵液的粘度。在调节PH值时要注意选择比较温和的酸和碱，以防止局部过酸或过碱。草酸是一种较常用的PH值调节剂。 加入絮凝剂加入絮凝剂 通常情况下，细菌的表面都带有负电荷，可以在发酵液中加入带正电荷 的絮凝剂，从而使菌体细胞与絮凝剂结合形成絮状沉淀，降低发酵液的上粘度，利于菌体的收获。 培养液的固液分离方法培养液的固液分离方法 分离前的处理分离前的处理杂质杂质溶质溶质原溶剂原溶剂萃取剂萃取剂Light phaseHeavy phase溶液萃取过程 溶剂萃取法提取抗生素溶剂萃取法提取抗生素反萃取在溶剂萃取分离过程中，当完成萃取操作后，为进一步纯化目标产物或便于下一步分离操作的实施，往往需要将目标产物转移到水相。这种调节水相条件，将目标产物从有机相转入水相的操作就称为反萃取（Back extraction)萃取方式萃取方式（1 1）单级