血清直接胆红素D-BIL测定

1、血清直接胆红素（D-BIL）测定1 .实验原理直接胆红素与2,4-二氯苯胺重氮盐形成重氮化合物，在酸性条件下呈红色。2 .标本：2.1 病人准备：无特殊要求。最好用禁食的标本以减少乳糜血的干扰。2.2 类型：血清、肝素或EDTA1浆，应避光保存。3 .标本存放：1525c保存可稳定2天；28c保存可稳定7天;-20C保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。4 .标本运输：常温条件下避光保存运输。5 .标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血、非避光保存运输的标本。6 .实验材料6.1 试剂：奥林巴斯总胆红素试剂盒：试剂+空白对照6.1.1 试剂准备：试剂为即用式。6.1.2 试剂稳定性与贮

2、存：试剂避光保存于28C,若无污染，可稳定至失效期。试剂有效期为18个月。试剂2必需避光保存试剂不可冰冻。6.1.3 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。6.1.4 注意事项：此试剂为体外诊断用。警告！腐蚀剂！不要入口。避免和眼睛，皮肤或衣服接触。如果接触到，立即用大量的水冲洗受损害的部位15分钟。接触到眼睛或吞服，立即寻找医疗保护。6.2 校准品：使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.SO&件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SO浅:件7 .仪器：奥林巴斯AU270C&化分析仪8 .操作步骤8.1 项目基本

3、参数：参见生化检验奥林巴斯AU270C&化分析仪项目测定参数.SO浅:件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU270C&化分析仪操作规程.SO&件检验结果的判断与分析10 .质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2s为质控警告限，3s为失控限，绘制质控图，判断是否在控。质控规则参见生化室室内质控操作规程.SO找件。11 .计算方法以TruCalU复合校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以以mol/L报告。手工测定计算方法为： Au直接胆红素（以mol/L）=x校准液浓度 As

4、12 .参考值范围：6.8mol/L参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差别。根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。13 .临床意义：胆红素是血红蛋白的降解产物。游离胆红素非极性很强，几乎不溶解于水。在血液中与白蛋白形成复合物由脾脏向肝脏运输。在肝脏中，胆红素与葡萄糖醛酸结合，生成可溶性胆红素葡萄糖醛酸酯由胆管排入肠道。溶血（肝前黄疸）、实质的肝损伤（肝性黄疸）和胆管堵塞（肝后黄疸）都会导致血液胆红素增高，形成高胆红素血症。人群中常见先天性慢性高胆红素血症，称为Gilbert综合症。由于胆红素降解酶的功能滞后以及出生后红细胞破碎增多，使6070%勺婴儿血液出现总胆红素增高。常

5、用的胆红素检测方法能检测总胆红素和直接胆红素。直接胆红素的测定主要检测水溶性的结合胆红素，因此可以根据总胆红素和直接胆红素的差来估计游离胆红素的含量。14 .操作性能14.1 线性范围：1.7171mol/L14.2 精密度：精密度白评估是根据NCCLSt荐的标准方法5,AU2700比内精密度小于4%gSDK0.04,总精密度小于5MSDK0.07o用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS规则。批内精密度n=20x(mol/L)s(mol/L)CV(%)批间精密度n=20X(mol/L)s(mol/L)CV(%)样品16.00.203.34样品16.20.193.12样品212.80.

6、121.00样品213.00.191.46样品336.40.260.71样品335.40.461.3014.3 方法学比较：本公司的试剂盒（y）与某商品化试剂盒（x）,同时对85个样品进行DBIL检测，将检测结果作方法学比较，其统计结果如下：y=0.95x+0.68mol/L;r=0.995。14.4 灵敏度：1.7mol/L。14.5 病人结果可报告范围：1.7171mol/L15超出范围结果处理本法线性上限为171mol/Lo样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。16 .病危报警值的处理无。17 .方法局限性17.1 本法线性上限为171mo

7、l/Lo样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:1稀释，重新测定，结果乘以2。17.2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度01704mol/L,甘油三酯浓度w22.6mmol/L时没有观察到干扰。血红蛋白浓度）0.50g/L将产生干扰。18 .补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家进行维修。rd19 .参考文献:Tietz,N.W.(Ed),FundamentalsofClinicalChemistry,3Edition,W.B.Saunders,1987.VandenBergh,A.andMueller,P.,Biochem乙77:90,1916NCCLS,Interfer

8、enceTestinginClinicalChemistry,EP7-P,1986.Young,D.S.,EffectsofDrugsonClinicalLaboratoryTests,4thEdition,AACCPress,1995.NCCLS,EvaluationProtocolEP5-T2,1992.Rand,R.N.,DIPasque,A.,ClinChem1962;8:570Henry,J.,Cannon,D.C.,Winkelmann,J.V.,Clinicalchemistry,principlesandtechnics,Harper&RowPublishersIns.,HagerstownMaryland,1974:1042Tho