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1、双缩脲测定蛋白质的含量双缩脲测定蛋白质的含量内蒙古农业大学生物化学与分子生物学实验教学中心制作人：王瑞刚实验原理实验器材实验试剂实验步骤实验原理 双缩脲在碱性溶液中与Cu2+产生紫色的络合物,这一反 应称“双缩脲反应”。蛋白质分子中肽键，也能与Cu2+ 发生 双缩脲反应，溶液紫色的深浅与蛋白质含量在一定范围内 成正比，而与蛋白质的氨基酸组成及分子量无关。该紫色 的络合物在580nm处有最大吸收值，通过测定580nm处的 吸光值用于谷物蛋白质含量的测定。实验器材1分光光度计 2分析天平 3移液管4具塞三角瓶 5漏斗 6 三角瓶实验试剂110%KOH溶液 2无水乙醇3碳酸铜4酪蛋5豆粉实验步骤(一

2、)标准曲线的绘制 按下表加入各试剂，振荡10min，静置片刻，将上清 过滤后580nm测定吸光值。以吸光值为横坐标,酪蛋白含 量为纵坐标,绘制标准曲线。编号12345678910酪蛋白（g）00.050.060.070.080.090.100.110.120.13碳酸铜（g）1.1.001.001.001.001.001.001.001.001.00无水乙醇（ml）2020.0020.0020.0020.0020.0020.0020.0020.0020.0010%KOH（ml）2020.0020.0020.0020.0020.0020.0020.0020.0020.00OD580(二)样品的测定编号123豆粉（g）00.10000.1000碳酸铜（g）1.001.001.00无水乙醇（ml）2020.0020.0010%KOH（ml）2020.0020.00振荡10min，静置片刻，将上清过滤后580nm测定吸光值OD580结果计算：

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