【市公开课课件】1.2.2微生物的选择培养和计数课件2021-2022学年高二下学期生物人教版选择性必修3

1、1.2.2微生物的选择培养和计数自然界中微生物数量繁多，想要分离出特定的微生物，仅仅是通过平板划自然界中微生物数量繁多，想要分离出特定的微生物，仅仅是通过平板划线法或稀释涂布平板法很难实现。线法或稀释涂布平板法很难实现。 19731973年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌，进而提年，科学家从美国黄石国家公园的热泉中筛选出水生栖热菌，进而提取出耐高温的取出耐高温的DNADNA聚合酶。聚合酶。 为什么水生栖热菌能从热泉中筛选出来呢？为什么水生栖热菌能从热泉中筛选出来呢？问问这是因为水生栖热菌能在这是因为水生栖热菌能在70-8070-80的高温条件下生存，而绝大多的高温条件下生存，

2、而绝大多数微生物在此条件下不能生存。数微生物在此条件下不能生存。同理： 人为提供有利于目的菌生长，同时抑制或阻止其他微生物生长的条件，人为提供有利于目的菌生长，同时抑制或阻止其他微生物生长的条件，进行实验室微生物的筛选。进行实验室微生物的筛选。选择培养基根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。根据微生物对生存环境的要求，到相应的环境中去寻找。耐寒微生物耐寒微生物石油分解菌石油分解菌被石油污染被石油污染的土壤的土壤冰川冻土层冰川冻土层选择培养基Selective medium（一）选择培养基1.1.概念概念: :2.2.类型类型: :在微生物学中，将在微生物学中，将允许特定种类的微生物

3、生长允许特定种类的微生物生长，同时，同时抑制或抑制或阻止其他种类微生物生长阻止其他种类微生物生长的培养基称为的培养基称为选择培养基。选择培养基。（1 1）改变改变培养条件培养条件。70708080的高温的高温分离耐高温的分离耐高温的水生栖热菌水生栖热菌使用使用将将pHpH调至酸性调至酸性的培养基的培养基分离分离耐酸菌耐酸菌（2 2）改变培养基中的改变培养基中的营养成分营养成分。不加碳源（含碳有机物）的培养基不加碳源（含碳有机物）的培养基不加氮源的培养基不加氮源的培养基分离出分离出固氮菌固氮菌分离出分离出自养型微生物自养型微生物（3 3）添加添加某种化学物质某种化学物质。加入青霉素加入青霉素分离

4、酵母菌、霉菌等分离酵母菌、霉菌等真菌真菌加入高浓度食盐的培养基加入高浓度食盐的培养基分离得到分离得到金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌培养基中加培养基中加氨苄青霉素氨苄青霉素具有具有抗氨苄抗氨苄青霉素能力青霉素能力的菌落的菌落长出各种各长出各种各样的细菌样的细菌选 择 培 养 基 培养基培养基+ +氨苄青霉素氨苄青霉素 没有没有抗氨苄青霉抗氨苄青霉素能力素能力的菌落的菌落被淘汰被淘汰怎样怎样选择选择出出抗氨苄青霉素能抗氨苄青霉素能力力的细菌的细菌? ?培养基培养基【思考】怎么证明一个选择培养基具有选择性呢？怎么证明一个选择培养基具有选择性呢？ 应该设置应该设置基础培养基基础培养基（如牛肉膏蛋白胨培养

5、基）或（如牛肉膏蛋白胨培养基）或完全培养基完全培养基作为对照，若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数菌作为对照，若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数菌多于多于该该选选择培养基择培养基，则该选择培养基，则该选择培养基具有选择性具有选择性。基础培养基基础培养基选择培养基选择培养基 那么如果让你分离那么如果让你分离土壤中分解尿素的细菌，土壤中分解尿素的细菌，你应该怎么设计呢？你应该怎么设计呢？尿素的立体结构【思考讨论】 尿素尿素CO(NH2)2含氮量高，化学性质稳定，是现代含氮量高，化学性质稳定，是现代农业生产中一种重要的氮肥。农业生产中一种重要的氮肥。尿素尿素施入土壤后，会施入土壤后，会被土壤中

6、被土壤中的的某些细菌分解成某些细菌分解成NH3，再被转化为再被转化为NO3-、NH4+等被植物吸收等被植物吸收。而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶而这些细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶。CO(NH2)2脲酶脲酶 + H2O+ CO22NH3 在选择培养基中，以尿素作为唯一氮源，只有能合成脲在选择培养基中，以尿素作为唯一氮源，只有能合成脲酶的细菌才能生长发育繁殖。酶的细菌才能生长发育繁殖。1.1.将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如将土壤稀释液中能分解尿素的细菌分离出来，培养基的配方该如何设计何设计？问问2.2.该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点

7、该培养基与普通培养基有哪些共同点和不同点？ 除以尿素作为唯一氮源外，该培养基的其他营养成分与普通培除以尿素作为唯一氮源外，该培养基的其他营养成分与普通培养基基本相同。养基基本相同。 只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，缺乏脲酶的微生物不，缺乏脲酶的微生物不能分解尿素，而能分解尿素，而缺乏氮源缺乏氮源的微生物是不能生长发育繁殖的。的微生物是不能生长发育繁殖的。 利用利用以尿素作唯一氮源以尿素作唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。解尿素的细菌。配方：葡萄糖葡萄糖10.0g10.0g尿素尿素1.0g1.0gKHK

8、H2 2POPO4 41.4g1.4gNaNa2 2HPOHPO4 42.1g2.1gMgSOMgSO4 47H7H2 2O O0.2g0.2g琼脂琼脂15.0g15.0g蒸馏水蒸馏水1000ml1000ml碳源氮源提供无机盐；调节pH。凝固剂牛肉膏牛肉膏5.0g5.0g蛋白胨蛋白胨10.0g10.0gNaClNaCl5.0g5.0g琼脂琼脂20.0g20.0g蒸馏水蒸馏水定容到定容到1000ml1000ml培培养养基基一一KHKH2 2POPO4 41.4g1.4gNaHNaH2 2POPO4 42.1g2.1gMgSOMgSO4 47H7H2 2O O0.2g0.2g葡萄糖葡萄糖10.0g

9、10.0g尿素尿素1.0g1.0g琼脂琼脂15.0g15.0g蒸馏水蒸馏水定容到定容到1000ml1000ml培培养养基基二二1.1.从物理性质来讲，两者属于从物理性质来讲，两者属于_培养基，判培养基，判断依据是断依据是_；该类培养基的主要；该类培养基的主要用途为用途为_。2.2.从用途上来讲，从用途上来讲， 属于选择培养基，目属于选择培养基，目的是为了获得的是为了获得 。3.3.两种培养基共有的培养基成分有：两种培养基共有的培养基成分有： 。培养基一的碳源为培养基一的碳源为 ，氮源为，氮源为 ；培养基二的碳源为培养基二的碳源为 ，氮源为，氮源为 。固体固体添加了凝固剂琼脂添加了凝固剂琼脂分离

10、、鉴定、计数、保存分离、鉴定、计数、保存培养基二培养基二能分解尿素的微生物能分解尿素的微生物碳源、氮源、无机盐、水碳源、氮源、无机盐、水牛肉膏牛肉膏蛋白胨蛋白胨葡萄糖葡萄糖尿素尿素微 生 物 的 选 择 培 养Selective culture of microorganisms（二）微生物的选择培养方法方法: :稀释涂布平板法稀释涂布平板法主要过程主要过程: :A A、梯度稀释菌液、梯度稀释菌液 B B、涂布平板、涂布平板将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。脂固体培养基的表面

11、，进行培养。稀释度足够高时，能在培养基表面形成单个菌落。稀释度足够高时，能在培养基表面形成单个菌落。要对土壤进行要对土壤进行充分稀释充分稀释，然后再将菌液，然后再将菌液涂布涂布到制备好的到制备好的选择培养基选择培养基上上。 由于土壤细菌的数量庞大，由于土壤细菌的数量庞大，那么怎么获得那么怎么获得要想得到要想得到特定微生物特定微生物的纯的纯培养物培养物呢呢？问问答 细菌宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大部分分布在距细菌宜在酸碱度接近中性的潮湿土壤中生长，绝大部分分布在距地表地表38cm38cm的土壤层。铲去表层土的土壤层。铲去表层土3cm3cm左右，取样，将样品装入事先准左右，取样，将样品

12、装入事先准备好的信封中。备好的信封中。操作步骤操作步骤: :（1 1）土壤取样）土壤取样 取土样时用的铁铲和取样取土样时用的铁铲和取样袋在使用前袋在使用前都需要灭菌都需要灭菌。操作。操作完成后，一定完成后，一定要洗手要洗手。注意（2 2）样品的稀释（）样品的稀释（梯度稀释菌液梯度稀释菌液） 将将10g土样加入盛有土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。取无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。取1mL上清液上清液加入盛有加入盛有9mL无菌水的试管中，依次无菌水的试管中，依次等比稀释等比稀释。1101 mL1 mL1 mL1 mL1 mL1 mL1102110311041105110611079 m

13、L 无菌水无菌水90mL无菌水无菌水10g微量微量移液器移液器（3 3）涂布平板）涂布平板取取0.1mL菌液，滴菌液，滴加到培养基表面。加到培养基表面。将涂布器浸在将涂布器浸在盛有酒精的烧杯盛有酒精的烧杯中。中。将涂布器放在火焰上灼将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布。冷却后，再进行涂布。用涂布器将菌液均匀地涂布在培用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。使涂布均匀。 待涂布的菌液被培养基吸收后，待涂布的菌液被培养基吸收后，将平板倒置，放入恒温箱培养。将平板倒置，放入恒温箱培养。1.10g

14、1.10g土样土样加入盛加入盛有有90mL90mL无菌水中后，无菌水中后，已稀释已稀释1010倍倍，再计算时，不要忽略；，再计算时，不要忽略；2.2.由于使用的是选择培养基，所以一般情况下，获得的单菌落即目的菌，由于使用的是选择培养基，所以一般情况下，获得的单菌落即目的菌，但因为但因为有些微生物可以利用目的菌的代谢产物来生长繁殖有些微生物可以利用目的菌的代谢产物来生长繁殖，所以还需要，所以还需要进一步验证；进一步验证；3.3.过程中所有操作都应在过程中所有操作都应在酒精灯火焰旁酒精灯火焰旁进行；进行；4.4.将涂布器从酒精中取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后再放将涂布器从酒精中取出时，要

15、让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后再放在火焰上灼烧；在火焰上灼烧；不要将过热的涂布器放在盛有酒精的烧杯中，以免引燃不要将过热的涂布器放在盛有酒精的烧杯中，以免引燃酒精酒精。【特别提醒】2.2.未接种的培养基表面是否有菌落生长很关键，如果无菌落生未接种的培养基表面是否有菌落生长很关键，如果无菌落生长，说明了什么？长，说明了什么？ 未接种的培养基在恒温箱中保温一段时间后，如果无未接种的培养基在恒温箱中保温一段时间后，如果无菌落生长，说明培养基制备成功、合格，未受到污染。菌落生长，说明培养基制备成功、合格，未受到污染。 1. 1.培养时要将一个未接种的培养基和一个已接种的培养基放在培养时要将一个未接种的

16、培养基和一个已接种的培养基放在一起培养，为什么一起培养，为什么？问问培养未接种的培养基的作用是对照。培养未接种的培养基的作用是对照。 微 生 物 的 数 量 测 定 Determination of the number of microorganisms（三）微生物的数量测定 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过计数平板上的菌落数，就能推测出样品中大约稀释液中的一个活菌。通过计数平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。含有多少活菌。1.稀释涂布平板法2.显微镜直接计数法间接计

17、数法直接计数法1.1.间接计数法间接计数法 稀释涂布平板法稀释涂布平板法选择选择30-30030-300个菌落的平板进行计数；个菌落的平板进行计数；每个每个稀释度稀释度至少取至少取3 3个个平板取其平板取其平均值平均值；统计的菌落往往比活菌的统计的菌落往往比活菌的实际数目低实际数目低；统计的结果一般用统计的结果一般用菌落数菌落数而不是活菌数来表示；而不是活菌数来表示；恰当的稀释度、涂布是否均匀恰当的稀释度、涂布是否均匀是成功统计菌落数目的关键。是成功统计菌落数目的关键。计数原则: 当两个或多个细当两个或多个细胞连在一起时，平板胞连在一起时，平板上观察到的只是一个上观察到的只是一个菌落。菌落。稀

18、释稀释10103 3倍倍稀释稀释10104 4倍倍稀释稀释10105 5倍倍空白对照空白对照计算公式:每每g g样品中的菌落样品中的菌落数数 (CV)Mp M代表稀释倍数代表稀释倍数p C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数p V代表涂布平板时所用的稀释液的体积代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL)例：某同学在稀释倍数为例：某同学在稀释倍数为10106 6 的培养基中测得平板上菌落数的平均数的培养基中测得平板上菌落数的平均数为为234234，那么每，那么每g g样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为样品中的菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为

19、0.1mL) ( )0.1mL) ( )A. 2.34A. 2.3410108 8 B. 2.34B. 2.3410109 9 C. 234 D. 23.4 C. 234 D. 23.4 （2340.1）106=2.34109答B例：甲同学做此实验在稀释倍数例：甲同学做此实验在稀释倍数10105 5获得获得3 3个平板，菌落数分别是个平板，菌落数分别是8080、9090、100100，涂布平板时均使用，涂布平板时均使用0.1ml0.1ml菌液，试计算每克土壤中可以分菌液，试计算每克土壤中可以分离尿素的细菌数目？离尿素的细菌数目？（80+90+100）/30.1 105 =9 107个个 某两位

20、同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。从对某两位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数。从对应稀释倍数为应稀释倍数为10106 6的培养基中，得到以下两种统计结果：甲同学在该浓的培养基中，得到以下两种统计结果：甲同学在该浓度下涂布了一个平板，统计的菌落数为度下涂布了一个平板，统计的菌落数为230230；乙同学在该浓度下涂布了；乙同学在该浓度下涂布了A A、B B、C C三个平板，统计的菌落数分别为三个平板，统计的菌落数分别为2121、212212、256256，该同学以这，该同学以这三个平板上菌落数的平均值三个平板上菌落数的平均值163163作为统计结果。作为统计结果。 请评

21、价这两位同学的实验结果的有效性：请评价这两位同学的实验结果的有效性：1.1.甲同学甲同学_； 原因是原因是_。2.2.乙同学乙同学_； 原因是原因是_。实验操作不合理实验操作不合理未设置重复实验组未设置重复实验组结果计算不合理结果计算不合理2121与另外两组数值相差太大，应舍去与另外两组数值相差太大，应舍去1.1.直接计数法直接计数法 显微镜直接计数法显微镜直接计数法 利用利用细菌计数板细菌计数板或或血细胞计数板血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积里样品，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。中微生物的数量。缺点：缺点： a.不能区分死菌和活菌不能区分死菌和活菌偏大。偏大。b.不适于对运

22、动细菌的计数。不适于对运动细菌的计数。c.个体小的细菌在显微镜下难以观察。个体小的细菌在显微镜下难以观察。优点：优点： 快速、直观快速、直观血细胞计数板：血细胞计数板：细菌计数板：细菌计数板：常用于常用于相对较大相对较大的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数。的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数。对细菌等对细菌等较小的细胞较小的细胞进行观察和计数。进行观察和计数。【探究 实践】土壤中分解尿素的细菌的分离与计数CO(NHCO(NH2 2) )2 2 + H + H2 2O 2NHO 2NH3 3 + CO + CO2 2 脲酶脲酶（1 1）从土壤中）从土壤中分离分离出能够分解尿素的细菌出能够分解尿素的细菌（2

23、 2）统计每克土壤样品中究竟含有）统计每克土壤样品中究竟含有多少多少这样的细菌这样的细菌1.1.实验目的：实验目的：2.2.实验原理：实验原理：绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作唯一氮源的选酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。 常见的分解尿素的微常见的分解尿素的微生物：芽孢杆菌、小球菌、生物：芽孢杆菌、小球菌、棒状杆菌等细菌，某些真棒状杆菌等细菌，某些真菌和放线菌也能分解尿素。菌和放线菌也能分解尿素。（

24、1 1）土壤取样）土壤取样（2 2）配制培养基）配制培养基（3 3）样品的稀释与涂布平板）样品的稀释与涂布平板（4 4）微生物的培养与观察）微生物的培养与观察取样地点要求：酸碱度接近中性的潮湿土壤取样地点要求：酸碱度接近中性的潮湿土壤取样过程：铲去表土（一般取样过程：铲去表土（一般3cm3cm左右）左右）注意事项：注意事项：铁铲和取样袋在使用前都要灭菌；事毕洗手。铁铲和取样袋在使用前都要灭菌；事毕洗手。 选择培养基选择培养基* *以尿素为唯一氮源以尿素为唯一氮源 完全培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）完全培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基）作为对照，来作为对照，来判断选择培养基是否具有选择作用判断选择培

25、养基是否具有选择作用2.2.操作步骤：操作步骤：每个浓度至少设置每个浓度至少设置4 4个平板个平板选择选择培养基（平行培养基（平行重复重复）牛肉膏蛋白胨培养基（用以牛肉膏蛋白胨培养基（用以判断判断选择培养基是否具有选择作用选择培养基是否具有选择作用）。）。本实验使用的平板和试管较多，为了避免混淆，最好在使本实验使用的平板和试管较多，为了避免混淆，最好在使用前用前做好标记做好标记。 例：标记注明组别、培养日期和平板上培养样品的稀释度等。例：标记注明组别、培养日期和平板上培养样品的稀释度等。培养条件： 不同种类的微生物，往往需要不同的不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度培养温度和和培养时间培养

26、时间。观察： 每隔每隔24h24h统计一次菌落数目统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结，选取菌落数目稳定时的记录作为结果。（果。（防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目） 一般来说，在相同的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落一般来说，在相同的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征，如形状、大小和颜色等。特征，如形状、大小和颜色等。（细菌一般在（细菌一般在30-37的温度下培养的温度下培养1-2d）得到的菌落一定是分解尿素的细菌吗？不一定，还需要进一步的鉴定不一定，还需要进一步的鉴定 测细菌数：一般用104、105、106稀释液 测放线菌

27、：一般用103、104、105稀释液 测真菌数：一般用102、103、104稀释液 选择一个比较宽的范围，将选择一个比较宽的范围，将11031107倍稀释的稀释液倍稀释的稀释液分别涂布到平板上培养，以保证能从中选择出菌落数在分别涂布到平板上培养，以保证能从中选择出菌落数在30300的的平板进行计数。平板进行计数。【思考讨论】 在初次实验中，对于稀释的范围没有把握，怎样做才能保证从中在初次实验中，对于稀释的范围没有把握，怎样做才能保证从中选择出菌落数在选择出菌落数在30300的平板进行计数的平板进行计数？问问CO(NH2)2+H2O脲酶CO2+2NH3土壤中分解尿素的细菌的鉴定原理： 在以尿素为

28、唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果菌后，如果p pH H升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。升高，指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。鉴定培养基方法：呈呈碱性碱性，遇酚红指示剂，遇酚红指示剂呈红色呈红色。 在以尿素为唯一氮源的培养基中加入在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂酚红指示剂，培养某种细菌后，如果培养某种细菌后，如果pHpH升高升高，指示剂将，指示剂将变红。变红。可以观察可以观察菌落周围是否出现红色环带菌落周围是否出现红色环带，红色环带直径与菌落直径比值红色环带直径与菌落直径比值越大越大，说明分解

29、能力说明分解能力越强越强。液体培养基：液体培养基：可以直接看可以直接看液体的变色液体的变色情况；情况；固体培养基：固体培养基：鉴别培养基：鉴别培养基：在培养基中加入某种指示剂或化学药品(不影响微生物正常生长)，使微生物的某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应。从而达到鉴定的作用。伊红和美蓝培养基鉴别大肠杆菌刚果红培养基鉴别纤维素分解菌工具工具接种环接种环涂布器涂布器原理原理 在数次划线后培养，可在数次划线后培养，可以分离到由一个细菌细胞繁以分离到由一个细菌细胞繁殖而来的肉眼可见的细胞群殖而来的肉眼可见的细胞群体，即菌落体，即菌落 在稀释度足够高的菌液里，在稀释度足够高的菌液里，聚

30、集在一起的微生物将被分散成聚集在一起的微生物将被分散成单个细菌细胞，从而能在培养基单个细菌细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落表面形成单个的菌落特点特点方法简单，但不适宜计数方法简单，但不适宜计数单菌落更易分开，可以计数，但单菌落更易分开，可以计数，但操作复杂操作复杂共同点共同点 使培养基上形成由单个细菌细胞繁殖而来的子细胞群体使培养基上形成由单个细菌细胞繁殖而来的子细胞群体菌落菌落项目选择培养基鉴别培养基原理原理 加入不影响甚至促进目标微加入不影响甚至促进目标微生物生长，而抑制或阻止其他生物生长，而抑制或阻止其他种类微生物生长的化学物质种类微生物生长的化学物质 加入某种指示剂或化学药品加入

31、某种指示剂或化学药品( (不不影响微生物正常生长影响微生物正常生长) )，使，使微生物的微生物的某种代谢产物与培养基中的特定指某种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应示剂或化学药品发生反应用途用途培养、分离出目标微生物培养、分离出目标微生物鉴别目标微生物鉴别目标微生物举例举例 培养酵母菌和霉菌时，可培养酵母菌和霉菌时，可在培养基中加入青霉素，抑制在培养基中加入青霉素，抑制细菌的生长；细菌的生长； 利用以尿素为唯一氮源的培利用以尿素为唯一氮源的培养基来培养可分解尿素的细菌养基来培养可分解尿素的细菌 可用伊红美蓝培养基鉴定饮用可用伊红美蓝培养基鉴定饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌水或乳

32、制品中是否含有大肠杆菌( (若若有，则菌落呈黑色有，则菌落呈黑色) )图示图示尿素尿素分分解菌解菌大肠杆菌大肠杆菌课堂小结微生物的数量测定选择培养基的作用微生物选择培养获取纯培养物的方法-稀释涂布平板法微生物的选择培养和计数选择培养基微生物的选择培养科学实例筛选原则选择培养基的概念及举例稀释涂布平板法的操作过程间接计数法 稀释涂布平板法直接计数 计数板计数法土壤中分解尿素的细菌的分离与计数培养基的制备实验设计（1）土壤取样（2）样品的稀释（3）稀释涂布平板法接种（4）微生物的培养与观察结果分析评价1. 研究人员用无机盐、琼脂和石油配制的培养基从被石油污染的土壤中筛选出了一种石油降解菌，判断下列相关表述是否正确。（1）这种培养基是一种选择培养基。（ ）（2）利用这种石油降解菌可以降解石油，修复土壤。（ ）（3）相对于未被污染的土壤，从被石油污染的土壤中更容易分离到石油降解菌。（ ）2. 用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数，原因是（ ）A. 菌落中的细菌数目是固定的B. 平板上的一个菌落就是一个细菌C. 通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同D. 平板上的一个菌落一般来源于样品稀释液中的一个活菌D3.回答下列与细菌培养相关的问题。(1)在细菌培养时,培养基中能同时提供碳源、氮源的成分是(填“蛋