铵态氮测量方法

1、精选优质文档-倾情为你奉上铵态氮测量方法（2molL-1KCl浸提靛酚蓝比色法）1）方法原理2molL-1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。在含氮0.050.5molL-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。2）试剂（1）2molL-1KCl溶液  称取149.1g氯化钾（KCl，化学纯）溶于水中，稀释至1L。（2）苯酚溶液  称取苯酚（C6H5OH，化学纯）10g和硝基铁氰化钠Na2Fe(CN)5NO2

2、H2O100mg稀释至1L。此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4冰箱中保存。（3）次氯酸钠碱性溶液  称取氢氧化钠（化学纯）10g、磷酸氢二钠（Na2HPO47H2O, 化学纯）7.06g、磷酸钠（Na3PO412H2O, 化学纯）31.8g和 52.5gL-1次氯酸钠(NaOCl，化学纯，即含10%有效氯的漂白粉溶液)5mL溶于水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中，在4冰箱中保存。（4）掩蔽剂  将400gL-1的酒石酸钾钠（KNaC4H4O64H2O, 化学纯）与100gL-1的EDTA二钠盐溶液等体积混合。每100mL混合液中加入10 molL-1氢氧化钠

3、0.5mL。（5）2.5µgmL 1铵态氮（NH4+N）标准溶液  称取干燥的硫酸铵(NH4)2SO4，分析纯0.4717g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L，制备成含铵态氮（N）100µgmL 1的贮存溶液；使用前将其加水稀释40倍，即配制成含铵态氮（N）2.5µgmL 1的标准溶液备用。3）仪器与设备：往复式振荡机、分光光度计。4）分析步骤（1）浸提  称取相当于10.00g干土的新鲜土样（若是风干土，过10号筛）准确到0.01g，置于150mL三角瓶中，加入氯化钾溶液100mL，塞紧塞子，在振荡机上振荡1h。取出静置，待

4、土壤氯化钾悬浊液澄清后，吸取一定量上层清液进行分析。如果不能在24h内进行，用滤纸过滤悬浊液，将滤液储存在冰箱中备用。（2）比色  吸取土壤浸出液5mL(含NH4+N2µg25µg)放入50mL容量瓶中，用氯化钾溶液补充至10mL，然后加入苯酚溶液5mL和次氯酸钠碱性溶液5mL，摇匀。在20左右的室温下放置1h后（注1），加掩蔽剂1mL以溶解可能产生的沉淀物，然后用水定容至刻度。用1cm比色槽在625nm波长处（或红色滤光片）进行比色，读取吸光度。（3）工作曲线 分别吸取0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL NH4+N标准液于

5、50mL容量瓶中，各加10mL氯化钠溶液，同（2）步骤进行比色测定。5）结果计算土壤中NH4+（N）含量（mgkg-1）=  式中：显色液铵态氮的质量浓度(µgmL 1)；     V显色液的体积(mL)；     ts分取倍数；     m样品质量（g）。6）注释注1. 显色后在20左右放置1h,再加入掩蔽剂.过早加入会使显色反应很慢,蓝色偏弱;加入过晚,则生成的氢氧化物沉淀可能老化而不易溶解.硝态氮测定方法（双波长紫外分光光度法）实验原理：利

6、用硝酸根离子在220 nm处有较强的紫外吸收这一特性,定量分析了土壤浸提液中的NO3 -. 溶解的有机物在210 nm和275 nm处均有吸收,而NO3 -在275 nm处没有吸收,因此在275 nm波长处做另一测量,以校正硝酸盐值. 最低检出浓度0.004 mg/ kg ,测定上限为4.000 mg/ kg ,适合高浓度土样浸提液的高倍稀释.试剂：CaSO4 (分析纯) , 量浓度为1 mol/ L的盐酸(优级纯) 溶液, 质量浓度为100g/ mL的硝酸盐氮标准贮备液, 质量浓度为25g/ mL的硝酸盐氮标准使用液.实验方法标准曲线的绘制：分别取硝酸盐氮标准使用液0.0 ,0.5 ,1.0

7、 ,2.0 ,3.0 ,4.0g/ mL 置于50 mL 比色管中, 各管中加入1.0 mL 1 mol的盐酸溶液,摇匀,用紫外分光光度计在210 nm和275 nm处,用1 cm石英比色皿测定吸光度. 以A= A210-kA275的计算方法求得校正吸光度. （系数k的确定方法分别准确移取10g/ mL 硝酸盐氮使用液2.00mL 、土壤浸提液2.00 mL 置于各自的50 mL 比色管中, 用二次蒸馏水定容, 摇匀, 用1 cm 的石英比色皿,以二次蒸馏水作参比, 在紫外- 可见分光光度计上测定吸光值。土壤样品、硝酸盐氮在210 nm 处有最大吸收, 在275 nm 处吸收较弱,选取210 nm、275 nm 为测量波长和参比波长测定土壤中硝态氮,根据A210 - KA275 =0 的公式进行计算, 求得K的平均值。土壤样品测定：称取10.00 g新鲜土样,分别置于150 mL具塞三角瓶,在三角瓶内加0.2gCaSO4 ,加100 mL二次蒸馏水,于振荡器上振荡15 min ,放置30 min后,倾出上清液,用中速或慢速无氮定量滤纸过滤. 吸取滤液50.00 mL (视NO3 - N 的浓度而定) 置于50 mL比色管中, 用水准确稀释至刻度, 加1.0 mL 1 mol的盐酸溶液, 测量吸光度. 结果计算:c =c0*V总*D*1000/M*103式中: c 为N