第10章 巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静药物的分析

1、第十章第十章巴比妥及苯并二氮杂卓类镇巴比妥及苯并二氮杂卓类镇静催眠药物的分析静催眠药物的分析Analysis of Barbitureties and 广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室Contents基本结构与主要性质1鉴别试验2特殊杂质检查3含量测定4广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室CCCONONC OR1R2R3543216HH环状丙二酰脲类化合物环状丙二酰脲类化合物( (一一) )基本结构基本结构广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室典型药物CCCONONC OH5C2H5C2HH巴比妥CCCONONC OH5C2HH苯巴比妥(Phe

2、nylbarbital)(barbital)广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室CCCONONC ONaCH2CHCH2CHCH3C3H7H司可巴比妥钠(Secobarbital)CNHCNHCOOOH5C2CH3(CH2)2CHCH3戊巴比妥(Pentobarbital)广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室硫喷妥钠HCCCONONCSNaC2H5CH3CH2CH2CHCH3广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室CCCONONC OR1R2R3543216HH( (一一) )基本结构基本结构酰胺键的水解酰胺键的水解酸性，与醛加成反应酸性，与醛加成反

3、应侧链反应：侧链反应：双键，苯环双键，苯环络合反应络合反应与金属离子反应与金属离子反应广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室( (二二) )主要性质主要性质u性状性状白色结晶或结晶性粉末白色结晶或结晶性粉末u溶解度溶解度微溶或极微溶于水，易溶于乙醇等有机溶剂微溶或极微溶于水，易溶于乙醇等有机溶剂 钠盐易溶于水，难溶于有机溶剂钠盐易溶于水，难溶于有机溶剂1.1.弱酸性弱酸性 ( (pKa:7.38.4) )CO NHCNCOOHR1R2+ NaOHCO NHCNCOONaR1R2+ H2O广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室CCCONONCOHR1R2HCCCONO

4、NCOR1R2HHCCCONONCOR1R2HCCCONONCOR1R2+ H+ H+pK1=8+ H+ H+pK2=12一一级级电电离离二级电离二级电离烯醇互变烯醇互变广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室2.2.水解反应水解反应NHNOOOHR2R1+5NaOHCHCOONaR1R2+2Na2CO3+NH3NHNOOOHR1CHCOONaR1R2+2NH3CR1R2COONaCONHCONH2H2OH2O广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室NHNONaOO+2H2OONHNH2O+NaHCO3pH6789分解率(%)261741pH对苯巴比妥分解率的影响20C

5、放置一年巴比妥钠注射液不能预先配制进行加热灭菌，须巴比妥钠注射液不能预先配制进行加热灭菌，须制成粉针剂，临用时溶解。制成粉针剂，临用时溶解。广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室3.3.与金属离子反应与金属离子反应a.与银盐的反应5,55,5取代的巴取代的巴比妥类药物比妥类药物AgNO3Na2CO3可溶性可溶性的一银盐的一银盐AgNO3二银盐二银盐白色沉淀白色沉淀NNR1R2OONaONNR1R2OOAgONNR1R2OOAgONNR1R2OOAgAgOH+AgNO3Na2CO3NaHCO3NaNO3H+AgNO3Na2CO3+NaHCO3NaNO3H巴比妥类药物分子结构中含有酰

6、亚巴比妥类药物分子结构中含有酰亚胺基团胺基团,在碳酸钠溶液中生成钠盐在碳酸钠溶液中生成钠盐而溶解而溶解,因而可与硝酸银反应因而可与硝酸银反应广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室CCOCONHNCONaR1R2白色难溶性二银盐白色难溶性二银盐CCOCONNCONaR1R2AgAgNO3Na2CO3滴加滴加AgNO3AgCCOCONNCOR1R2Ag用这种形式表用这种形式表示也是一样的示也是一样的广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室3.3.与金属离子反应与金属离子反应b.与铜盐的反应NNCuN+ CuSO42+SO42-铜吡啶试剂2巴比妥类药物在吡啶溶液中生成烯醇式

7、异巴比妥类药物在吡啶溶液中生成烯醇式异构体构体,可与吡啶试剂反应形成稳定的配位化可与吡啶试剂反应形成稳定的配位化合物合物,产生类似双缩脲的呈色反应产生类似双缩脲的呈色反应广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室3.3.与金属离子反应与金属离子反应b.与铜盐的反应巴比妥类巴比妥类铜吡啶铜吡啶显色显色巴比妥类紫色或紫色沉淀硫巴比妥类绿色NNOOOR1R2HH水-吡啶NNOOR1R2OH部分离子化NNOOR1R2O-NNOOR1R2O-NCuN2+NNNHOOR1R2OCuHNNOOR1R2ON广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室CR1R2COCONHNHCOCR1R2C

8、OCONNHC OHCR1R2COCONNHCO-+H+水吡啶部分离子化CR1R2COCONNHC O-2+NNCu2+CR1R2COCONNHCOCR1R2COCONNHCOCuNN有色配位化合物用这种形用这种形式表示也式表示也是一样的是一样的广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室c.与钴盐的反应紫堇色钴盐巴比妥类药物碱性CO NHCONHCOR1R22+Co2+4(CH3)2CHNH2+CoR2R1CONHCONCOR2R1NCONHCOCONHCH(CH3)2NHCH(CH3)2(CH3)2CHN+H32Co(NO3)2、CoO、Co(Ac)2异丙胺无水甲醇或乙醇广西医科大

9、学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室d. .与汞盐的反应与汞盐的反应巴比妥类药物+汞盐白色（可溶于氨试液）NHNOOOR1R2NNOR1R2OHgNO3OHNHNOOR1R2OHgNO3H+ Hg(NO3)2-HNO3+NNOR1R2OHgNO3OHNH3+ H2ONNOR1R2OHgOHONH4+NH4NO3广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室4.4.香草醛反应香草醛反应( (Vanillin) )棕红色香草醛巴比妥类药物浓硫酸戊巴比妥鉴别： 取戊巴比妥取戊巴比妥10mg，加香草醛约，加香草醛约10mg和硫酸和硫酸2ml，混，混合后在水浴上加热合后在水浴上加热2min，

10、显棕红色。放冷，小心加，显棕红色。放冷，小心加入乙醇入乙醇5ml，即显紫色并变成蓝色。，即显紫色并变成蓝色。广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室5.5.紫外吸收光谱特征紫外吸收光谱特征(nm)2902702502300.51.01.5A巴比妥类药物的紫外吸收光谱ABC240nm255nmA.H2SO4液(0.05mol/L,未电离)B.pH9.9缓冲液(一级电离)C.pH13NaOH液(1mol/L,二级电离)1,5,5-1,5,5-三取代巴比妥类三取代巴比妥类药物不存在二级电离，药物不存在二级电离，最大吸收波长不变。最大吸收波长不变。广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物

11、分析教研室3202802402000.80.50.2(nm)A238287304硫代巴比妥的紫外吸收光谱A.HCl液(0.1mol/L)B.NaOH液(0.1mol/L)6.6.薄层色谱行为特征薄层色谱行为特征广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室7.7.显微结晶显微结晶 药物本身晶形药物本身晶形反应产物晶形反应产物晶形广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室( (一一) )丙二酰脲类的鉴别试验丙二酰脲类的鉴别试验u取供试品约0.1g，加碳酸钠试液1ml与水10ml，振摇2min，滤过，滤液中逐滴加入硝酸银试液，即生成白色沉淀，振摇，沉淀即溶解；继续滴加过量的硝酸银试

12、液，沉淀不再溶解。u取供试品约50mg，加吡啶溶液(110)5 ml，溶解后，加铜吡啶试液1ml，即显紫色或生成紫色沉淀。银盐反应银盐反应铜盐反应铜盐反应广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室( (二二) )测定熔点测定熔点 巴比妥类的钠盐酸 游离巴比妥类药物 过滤 洗涤 干燥 测熔点 ( (三三) )利用特殊取代基或元素的鉴别试验利用特殊取代基或元素的鉴别试验 利用不饱和取代基的鉴别试验(司可巴比妥钠) 利用芳环取代基的鉴别试验(苯巴比妥钠) 硫色素反应(硫代巴比妥类)广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室1.1.司可巴比妥钠的鉴别司可巴比妥钠的鉴别NHNNaOO

13、OCH3CH3CH2I2NHNNaOOOCH3CH3CH2II褪色NHNNaOOOCH3CH3CH2Br BrBr2NHNNaOOOCH3CH3CH2OH OHKMnO4广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室2.2.苯巴比妥的鉴别苯巴比妥的鉴别黄色苯巴比妥423SOHKNOa.硝化反应 b.硫酸-亚硝酸钠反应 苯巴比妥与苯巴比妥与NaNONaNO2 2-H-H2 2SOSO4 4反应生成反应生成橙黄色橙黄色橙红色橙红色c.甲醛-硫酸反应 苯巴比妥与甲醛苯巴比妥与甲醛-H-H2 2SOSO4 4反应生成反应生成玫瑰红色环玫瑰红色环 区分苯巴比妥与不含芳环取代的巴比妥类药物。广西医科

14、大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室3.3.硫代巴比妥类的鉴别硫代巴比妥类的鉴别硫色素反应硫色素反应NHNOOSNaH3CCH3H3C+Pb2+NaOHNHNOOSH3CCH3H3C2PbPbS硫代巴比妥类与巴比妥类的区别以前以前广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室( (一一) )苯巴比妥苯巴比妥C2H5OH,H2SO4水解酯化CH2CONH2，CH2COOC2H5C2H5ONa OCOC2H5OC2H5CCONaCOOC2H5COOC2H5HCl酸化 ，消除CHCOOC2H5COOC2H5CCOOC2H5COOC2H5C2H5C2H5Br乙基化广西医科大学广西医科大学

15、药物分析教研室药物分析教研室CCOOC2H5COOC2H5C2H5CH3ONa环合CH2NH2NOCCONaC2H5CONHCONCCOC2H5CONHCONH酸析HCl广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室1.酸度酸度中间体中间体乙酰化不完全时，乙酰化不完全时，与尿素缩合产生的杂质与尿素缩合产生的杂质COHHNHHNCHCOHNCOHNOCHCOOC2H5COOC2H5苯基丙二酰脲酸性较强检查方法取本品0.20g，加水10ml，煮沸搅拌1min，放冷，滤过后，取滤液5ml，加甲基橙指示液1滴，不得显红色广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室2.乙醇溶液澄清度乙醇溶

16、液澄清度检查中间体、等乙醇中不溶物。取本品1.0g，加乙醇5ml，加热回流3min，溶液应澄清 3.中性或碱性物质中性或碱性物质( (提取重量法提取重量法, ,溶解度差异溶解度差异) ) 副产物：2-苯基丁酰(胺)脲或分解产物 不溶于NaOH T.S.而溶于醚分液漏斗NaOH T.S.乙醚H2O过滤干燥滤纸蒸发皿1051hr1010，冰醋酸中滴，冰醋酸中滴定突跃不明显，需加入醋酐，定突跃不明显，需加入醋酐，使碱性增强，突跃更明显使碱性增强，突跃更明显广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室应用实例应用实例游离弱碱性药物：游离弱碱性药物：地西泮、尼克刹米或氯氮卓，基于氮原子地西泮、尼

17、克刹米或氯氮卓，基于氮原子的弱碱性可以结晶紫为指示剂，非水溶液直接滴定，终点颜的弱碱性可以结晶紫为指示剂，非水溶液直接滴定，终点颜色绿色蓝绿色蓝色不等。色绿色蓝绿色蓝色不等。氢卤酸盐类药物：氢卤酸盐类药物：加入过量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其形成加入过量的醋酸汞冰醋酸溶液，使其形成难电离的卤化汞，再用高氯酸滴定，可用结晶紫、橙黄难电离的卤化汞，再用高氯酸滴定，可用结晶紫、橙黄作作为指示剂，或用电位法指示终点。为指示剂，或用电位法指示终点。硫酸盐类药物：硫酸盐类药物：硫酸为二元酸，但在非水介质中只显示一元硫酸为二元酸，但在非水介质中只显示一元酸解离为酸解离为HSOHSO4 4- -广西医科大学广西医

18、科大学药物分析教研室药物分析教研室HPLC碱性药物碱性药物HPLC法分析的特点及问题法分析的特点及问题1. 一般液相色谱法中色谱柱都是以硅胶为载体，将固定一般液相色谱法中色谱柱都是以硅胶为载体，将固定相键合在硅胶上相键合在硅胶上残留有硅羟基，容易和碱性药物残留有硅羟基，容易和碱性药物形成比较强的氢键作用形成比较强的氢键作用色谱峰拖尾严重色谱峰拖尾严重2. 固定相常用的填料为硅胶键合的固定相常用的填料为硅胶键合的C18，为非极性柱，为非极性柱，一般使用一般使用pH范围为范围为283. 生物碱性药物一般都做成盐，易溶于水，极性强，在生物碱性药物一般都做成盐，易溶于水，极性强，在C18柱上的保留作用弱柱上的保留作用弱难以形成有效的分离难以形成有效的分离广西医科大学广西医科大学药物分析教研室药物分析教研室1. 加扫尾剂加扫尾剂在流动相中加入在流动相中加入0.1%1.0%三乙胺或三乙胺或 二乙胺二乙胺原理：原理：有机碱可以掩蔽硅胶上残留的硅羟基，防止药物有机碱可以掩蔽硅胶上残留的硅羟基，防止药物 被吸附得太被吸附得太“死死”2. 换色谱柱换色谱柱 宽程宽程pH柱：柱：即可以在即可以在pH114范围使用的色谱柱，范围使用的色谱柱，通过调节流动相的通过调节流动相的pH，一般使流动相，一般使流动相pHpKb+2，使药物以分