浮游植物的采集、计数与定量方法

1、n浮游植物（浮游植物（Phytoplankon）又称浮游藻类，又称浮游藻类，是水中悬浮生活的若干种藻类的总称。是水中悬浮生活的若干种藻类的总称。浮浮游植物及其生产力的作用：游植物及其生产力的作用：n水生态系统的重要成员与重要功能之一：水生态系统的重要成员与重要功能之一：n是鱼类天然饵料的重要组成部分；是鱼类天然饵料的重要组成部分；n由于浮游植物对环境的变化十分敏感，故由于浮游植物对环境的变化十分敏感，故在环境监测中，也有重要作用。在环境监测中，也有重要作用。浮游植物的现存量：浮游植物的现存量：定义：定义：指的是某一瞬间单位水体中所存在的浮游植物指的是某一瞬间单位水体中所存在的浮游植物的量。的量

2、。两种表示方法：两种表示方法： 用用数目数目单位表示的密度，一般用单位表示的密度，一般用个升个升为单位，五、六十为单位，五、六十年代用之；年代用之； 用用重量重量单位（单位（mg/L）表示的现存量称为生物量（表示的现存量称为生物量（Biomass）。）。70年代以来被广泛使用。年代以来被广泛使用。不同水体，不同不同水体，不同种类种类的藻类在的藻类在个体个体上有很大上有很大差异差异，仅仅用仅仅用数量数量就很难评价。这就要求，浮游植物的定就很难评价。这就要求，浮游植物的定量工作，必须以测算生物量为目标。量工作，必须以测算生物量为目标。 n在早期在早期不同水体饵料生物不同水体饵料生物的丰欠调查中，的

3、丰欠调查中，人们往往只注重浮游植物的种类或数量，人们往往只注重浮游植物的种类或数量，其其原因原因在于：在于：n浮游植物生物量测算繁琐。浮游植物生物量测算繁琐。一、采样：一、采样：1、工具、工具25 目目2采样点的选择及采样层次的确定采样点的选择及采样层次的确定n选择采样点的原则是，采样点在平面上的分布要选择采样点的原则是，采样点在平面上的分布要有代表有代表性性。根据调查的目的而定。根据调查的目的而定。n一般要求一般要求湖心、库心、江心湖心、库心、江心必须采样，有条件时采样点必须采样，有条件时采样点可适当多设一些，如可适当多设一些，如大的湖湾、库湾、河流大的湖湾、库湾、河流的上、中、的上、中、下

4、游水体的下游水体的沿岸带、浅水区沿岸带、浅水区等也要设点采集。等也要设点采集。n凡水深凡水深不超过不超过2米米者，可于采样点水下者，可于采样点水下0.5m处采水，处采水，n水深水深210米米以内，应距底以内，应距底0.5米米处另采一个样，处另采一个样，n水深水深超过超过10米米时。应于时。应于中层中层增采一个水样。增采一个水样。池塘：池塘：样点可设在距样点可设在距岸边岸边1m处。水深处。水深小于小于2m时采一中时采一中层水样。若水深层水样。若水深大于大于2m时，最好采时，最好采上、中、下层上、中、下层水样。水样。亚表层：水下亚表层：水下20cm左右。左右。中中 层：水体中间部分。层：水体中间部

5、分。下下 层：离底层：离底20cm左右。左右。水库及河流：水库及河流：样点可设在样点可设在上、中、下游上、中、下游。上游：设十个点（亚表层或中层）上游：设十个点（亚表层或中层）中游：水在中游：水在23米深时设一个点，采米深时设一个点，采2个样（上中层和中个样（上中层和中下层）下层）下游：设下游：设23个样点。中心点个样点。中心点3个样（上、中、下层），个样（上、中、下层），两测点各一个样（中层）两测点各一个样（中层）湖泊：湖泊：中心区设一点。中心区设一点。进水口进水口和和出水口出水口也应设点。也应设点。 3采样量及采样次数采样量及采样次数n每一个采样点应采水每一个采样点应采水1000ml。n若

6、系一般性调查，可将若系一般性调查，可将各层采的水等量混合各层采的水等量混合，取，取1000ml混合水样固定混合水样固定；n或者或者分层采水分层采水，分别计数分别计数后取平均值。后取平均值。（分层采水可以了解每一采样点各层水中浮游植物的数量和种类）（分层采水可以了解每一采样点各层水中浮游植物的数量和种类）n采样次数可多可少。有条件时还可采样次数可多可少。有条件时还可逐月采样逐月采样一次，一次，一般情况可采样一次，最低限度应在一般情况可采样一次，最低限度应在春季、夏季春季、夏季末、秋初末、秋初各采样一次。各采样一次。 二、二、n鲁哥氏液鲁哥氏液即将即将6克克碘化钾碘化钾溶于溶于20ml水中，水中，

7、待其完全溶解后，加入待其完全溶解后，加入4克克碘碘充分摇动，充分摇动，待碘全部溶解后定容到待碘全部溶解后定容到100ml即配成鲁哥即配成鲁哥氏液。氏液。沉淀浓缩：沉淀浓缩：n上述水样，摇匀后倒入上述水样，摇匀后倒入1000ml瓶子瓶子中沉中沉淀淀24小时小时，用，用虹吸管虹吸管小心抽出上面不含小心抽出上面不含藻类的藻类的“清液清液”。剩下。剩下3050ml沉淀物沉淀物转入转入50ml的定量瓶的定量瓶中；再用上述虹吸出中；再用上述虹吸出来的来的“清液清液”少许冲洗三次沉淀器，冲少许冲洗三次沉淀器，冲洗液转入定量瓶中。洗液转入定量瓶中。n浓缩时浓缩时切不可搅动底部切不可搅动底部，万一动了应重，万一

8、动了应重新静止沉淀。新静止沉淀。n凡以凡以碘液固定碘液固定的水样固定的水样，瓶塞的水样固定的水样，瓶塞要要拧紧。拧紧。还要加入还要加入24的甲醛固定液的甲醛固定液（福尔马林），即每（福尔马林），即每100ml样品需另加样品需另加4ml福尔马林，以利于福尔马林，以利于长期保存长期保存。采水时，每瓶样品必须采水时，每瓶样品必须贴上标签贴上标签，标签上，标签上药剂在药剂在采集的时间、地点、采水体积采集的时间、地点、采水体积等等，其他详细内容应另行做好记录，以备，其他详细内容应另行做好记录，以备查对，避免错误。查对，避免错误。三、计数方法三、计数方法 工具：工具：将浓缩沉淀后水样充分摇匀后，立将浓缩沉

9、淀后水样充分摇匀后，立即用即用0.1ml吸量管吸量管吸出吸出0.1ml样品样品，注入，注入0.1ml计数框计数框内（计数框的内（计数框的表面积表面积最好是最好是2020），小心盖上），小心盖上盖玻片盖玻片（22222），在盖盖玻片时，要求），在盖盖玻片时，要求计数框计数框内没内没有有气泡气泡，样品不溢出计数框。然后在，样品不溢出计数框。然后在10或或40倍显微镜下计数。倍显微镜下计数。每瓶标本计数数量：每瓶标本计数数量：计数计数两片两片取其平均值取其平均值，每片大约计算，每片大约计算50100个个视野视野，但视野，但视野数可按数可按浮游植物的多少而酌情增减浮游植物的多少而酌情增减。如平均如平均

10、每个视野每个视野不超过不超过12个时，要数个时，要数200个视野以上，如果平均每个视野有个视野以上，如果平均每个视野有56个时要数个时要数100个视野，如果平均每个视野个视野，如果平均每个视野有十几个时数有十几个时数50个视野就可以了。个视野就可以了。n同一样品的两片同一样品的两片计算结果和计算结果和平均数平均数之差之差如不大于其如不大于其均数均数的的15，其均数视为，其均数视为有效结果，有效结果，否则还必须测第三篇。否则还必须测第三篇。n在计数过程中，常碰到在计数过程中，常碰到某些个体一部分某些个体一部分在视野在视野中，另一部分在视野外，这时可中，另一部分在视野外，这时可规定出在视野规定出在

11、视野上半圈者上半圈者计数，出现在计数，出现在下下半圈者半圈者不计数。不计数。n数量最好用数量最好用细胞表示细胞表示，对不宜用细胞数，对不宜用细胞数表示的表示的群体或丝状体群体或丝状体，可求出其平均细，可求出其平均细胞数胞数?。n计算时优势种类尽可能鉴别到种或属，计算时优势种类尽可能鉴别到种或属，注意不要把注意不要把浮游植物当作杂质浮游植物当作杂质而漏计。而漏计。四、数量与生物量的计算：四、数量与生物量的计算：1一升水中的浮游植物的一升水中的浮游植物的数量数量（N）可用可用下列公式计算：下列公式计算：式中：式中：Cs 计数框面积（计数框面积（2），一般为），一般为4002。Fs 每个视野的面积（

12、每个视野的面积（2），），R2，视野半径视野半径r可用台微尺测可用台微尺测出（一定倍数下）。出（一定倍数下）。Fn 计数过的视野数。计数过的视野数。V 一升水样经沉淀浓缩后的体积（一升水样经沉淀浓缩后的体积（ml）U 计数框的体积（计数框的体积（ml）为为0.1ml。Pn 计数出的浮游植物个数。计数出的浮游植物个数。此常数用此常数用K表示，则上述公式可简化为：表示，则上述公式可简化为：N=KPn。PnUVFnFsCsNnPn代表代表某种藻类的个数某种藻类的个数，计算结果，计算结果N只只表示一升水中表示一升水中这种藻类的数量这种藻类的数量；nPn若代表若代表各种藻类的总数各种藻类的总数，计算结果

13、，计算结果N则表示一升水中则表示一升水中浮游植物的总数浮游植物的总数。n前者若求浮游植物数量将各计算结果相前者若求浮游植物数量将各计算结果相加即可。加即可。2生物量一般按生物量一般按体积体积来换算来换算 这是因为浮游植物个体积小，这是因为浮游植物个体积小，直接称重直接称重较困难，且其细胞较困难，且其细胞比重多接近于比重多接近于1。可用。可用形态相近似的几何体积公式形态相近似的几何体积公式计算细胞体计算细胞体积。细胞体积的毫升数相当于细胞重量积。细胞体积的毫升数相当于细胞重量的克数。的克数。下列体积公式，可供计算生物量时参考：下列体积公式，可供计算生物量时参考：圆锥体：圆锥体：V=1/3RR2

14、2h h圆柱体：圆柱体：V=RR2 2h h球球 体：体：V=4/3RR3 3椭圆体：椭圆体：V4/3ab2（a a为长轴半径，为长轴半径，b b为短轴半径）为短轴半径）圆台体：圆台体：V V1/3H1/3H（ + + ）长方体与正方体长方体与正方体ababh h或或a a3 3不规则性藻类不规则性藻类可分可为几个部分计算。可分可为几个部分计算。 n硅藻细胞的计算通式：硅藻细胞的计算通式：V壳面面积壳面面积带带面平均高度面平均高度 每种藻类至少随机测量每种藻类至少随机测量20个以上个以上，求出，求出这种藻类这种藻类个体种的平均值个体种的平均值，一般都制成，一般都制成附表供查找。此平均值乘上一升水种该附表供查找。此平均值乘上一升水种该种藻类的数量，即得到一升水中这种藻种藻类的数量，即得到一升水中这种藻类的生物量（类的生物量（mg/L）。）。 由于同一种类的细胞大小可能有较大的由于同一种类的细胞大小可能有较大的差别，同一属内的差别就更大了，因此差别，同一属内的差别就更大了，因此必须实测必须实测每次水样中每次水样中主要种类主要种类（即优势（即优势种）的细胞大小并计算平均重量，其他种）的细胞大小并计算平均重量，其他种类可以参考附表计算。种类可以参考附表计算。n藻类