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文档简介
1、药物制剂的微生物学检查无抗菌无抗菌作用的作用的供试品供试品抽抽样样接种于培养基硫乙醇酸盐培养接种于培养基硫乙醇酸盐培养基及改良马丁培养基管基及改良马丁培养基管 培培养养细菌细菌 37 37 霉菌、酵母菌霉菌、酵母菌 25 25 接接种种实验方法实验方法(一)、蜜丸细菌总数测定一)、蜜丸细菌总数测定(二)、蜜丸霉菌总数测定(二)、蜜丸霉菌总数测定1、无菌条件下随机称取、无菌条件下随机称取10g蜜丸置研钵中逐渐加入蜜丸置研钵中逐渐加入100ml生理盐水研磨为生理盐水研磨为1:10药液,分别量取药液,分别量取9ml生理盐水置生理盐水置10ml 具塞刻度试管中,其中一支加入具塞刻度试管中,其中一支加入
2、1:10药液药液1ml后稀后稀释为释为1:100后再取后再取1ml加入加入9ml生理盐水具塞刻度试管中生理盐水具塞刻度试管中药物稀释为药物稀释为1:1000。2、取、取10个干烤后玻璃平皿,其中个干烤后玻璃平皿,其中6个平皿,每个平皿,每2个分别加个分别加入入1:10,1:100,1:1000药液各药液各1ml,然后加入,然后加入50普普通琼脂培养基、(通琼脂培养基、(2,3,5-氯化三苯基四氮唑)氯化三苯基四氮唑)15ml做细做细菌培养;剩余的菌培养;剩余的4个平皿,每个平皿,每2个分别加入个分别加入1:10,1:100,药液各药液各1ml共共4个,然后加入个,然后加入50虎红马丁培养基虎红
3、马丁培养基15ml做做霉菌培养,并立刻转动平板使药液与培养基充分混匀。霉菌培养,并立刻转动平板使药液与培养基充分混匀。10个平板置个平板置37培养箱培养培养箱培养24h后并计数每个稀释度的后并计数每个稀释度的3个平个平板的菌落均数。板的菌落均数。 阴性 菌落紫黑色、有金属光泽乳糖发酵、IMViC试验发酵乳糖产酸产气、MViC:+ + - -培培 养养 基基菌菌 落落 形形 态态伊红美蓝琼伊红美蓝琼脂(脂(EMBEMB平板)平板)呈呈紫黑色紫黑色、浅紫色、蓝紫色或粉红色,菌落中心呈深紫色或无明、浅紫色、蓝紫色或粉红色,菌落中心呈深紫色或无明显暗色中心,圆形,稍凸起,边缘整齐,表面光滑,湿润,显暗
4、色中心,圆形,稍凸起,边缘整齐,表面光滑,湿润,常有常有金属光泽。金属光泽。麦康凯琼脂麦康凯琼脂(MacC) 鲜桃红色或微红色,菌落中心呈深鲜桃红色或微红色,菌落中心呈深桃红色桃红色,圆形,扁平,圆形,扁平,边缘整齐,表面光滑,湿润。边缘整齐,表面光滑,湿润。 大肠埃希菌菌落形态特征大肠埃希菌菌落形态特征大肠埃希菌在麦康凯琼脂平板上大肠埃希菌在麦康凯琼脂平板上 发酵乳糖菌落发酵乳糖菌落 大肠埃希菌在伊红美蓝琼脂平板大肠埃希菌在伊红美蓝琼脂平板上的菌落特征上的菌落特征吲哚试验(吲哚试验(I I)+ -+ -甲基红试验甲基红试验(M) (M) + -+ -VPVP试验(试验(ViVi)+ -+ -枸椽酸盐利用试验(枸椽酸盐利用试验(C C) + -+ - - +M - 甲基红(methyl red)实验葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇 甲基红 -葡萄糖丙酮酸 甲基红 +- +葡萄糖丙酮酸乙酰甲基甲醇 二乙酰红色化合物 + 胍基化合物葡萄糖丙酮酸 乙酰甲基甲醇 - - +利用枸橼酸盐
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