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文档简介

1、lAGE-SCALE PREPARATIONlAGE-SCALE PREPARATION单克隆抗体的大量制备体内诱生法（IN ANIMALS）体外诱生法（IN CELLS）研究进展（RESEARCH PROGRESS）CONTENTSCATALOG取Balb/c雌性经产鼠若干只预处理：腹腔注射0.5ml液态石蜡或降植烷注射器抽取腹水，得到大量单克隆抗体腹腔内接种1ml对数生长期的杂交瘤细胞悬浮液12周后体内诱生法接种10天左右腹水的杂交瘤细胞Advantages可得到大量的腹水单抗获的抗体浓度高操作简便、经济腹腔有自然吞噬作用，避免组织污染造成的杂交瘤细胞生长不良腹腔本身为杂交瘤细胞良好培养坏

2、境，使其始终处于对数生长期Disadvantages腹水中常混有小鼠的各种杂蛋白（包括Ig），提纯困难有污染动物病毒的危险鼠源性单抗有抗原性，在人体内产生人抗鼠抗体，降低治疗效果又诱发变态反应将杂交瘤细胞置于培养瓶进行培养得到单克隆抗体离心去除细胞及其碎片收集培养上清液一段时间体外诱生法Advantages 减少鼠类动物疾病给产物带来的污染; 避免鼠的其它抗体的存在过程可以工程化和自动控制, 提高了重演性可以采用单元操作法培养, 随着规模增大, 降低生产成本 Disadvantages得到的单克隆抗体有限，不能超过特定的细胞浓度每天要换培养液，且细胞对剪切力和环境非常敏感会积累有毒的代谢产物血

3、清培养干扰抗体活性，影响抗体分离，增加成本牛初乳免疫球蛋白IgG单克隆抗体的制备 利用标准 IgG蛋白作为免疫原，免疫 6周龄 Balb/c 雌性小鼠，运用淋巴细胞杂交瘤技术，通过间接 ELISA法筛选，采用有限稀释法，经过 3次克隆筛选，获得2株稳定分泌抗 IgG蛋白的杂交瘤细胞株，单抗细胞注射小鼠腹腔收集腹水；亚类鉴定试剂盒确定单抗细胞亚类；测定收集小鼠腹水的抗体效价。抗CPV-2a单克隆抗体的制备 纯化的犬细小病毒(CPV)2a型分离株免疫Balb/c 小鼠,运用淋巴细胞杂交瘤技术，间接 ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞,采用有限稀释法对阳性杂交瘤细胞进行3次亚克隆，得到4株稳定分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞，单抗细胞注射小鼠腹腔收集腹水；亚类鉴定试剂盒确定单抗细胞亚类；测定收集小鼠腹水的抗体效价。1 随着分子生物学的飞跃发展，人鼠嵌合抗体、人源化抗体、完全人源性单克隆抗体应运而生2 嵌合单克隆抗体和由转基因小鼠、噬菌体展示技术、核糖体展示技术及共价展示技术所制备的单克隆抗体取得了激荡人心的丰硕成果体内诱生法1 细胞培养用生物反应器有很大的发展：空纤维固定术、徽胶囊术、空气升液器、生物反应大量培养术、恒化器培养、OPTICELL培养系统2 细胞表达抗体的研究在抗细胞凋亡、促细胞增殖、优化

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