分解纤维素的细菌

1、关于分解纤维素的细菌现在学习的是第一页，共41页在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。选择培养基现在学习的是第二页，共41页1直接计数法：最常用显微镜直接计数法。测定微生物数量的方法：现在学习的是第三页，共41页湖南长郡卫星远程学校2009年上学期制作 032间接计数法：最常用稀释平板计数法。现在学习的是第四页，共41页湖南长郡卫星远程学校2009年上学期制作 03现在学习的是第五页，共41页现在学习的是第六页，共41页阅读阅读2727页基础知识部分第一、二段，回答下列问题：页基础知识部分第一、二段，回答下列问题：1. 1. 纤维素在生物圈的分布状

2、况？纤维素在生物圈的分布状况？纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质。植物的根、茎纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中、叶等器官都含有大量的纤维素。其中棉花棉花是自然界中纤维素含是自然界中纤维素含量最高的天然产物。量最高的天然产物。一、纤维素和纤维素酶一、纤维素和纤维素酶2.2.纤维素酶的组成及作用？纤维素酶的组成及作用？纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即，即C C1 1酶酶、 C CX X酶酶和和葡萄糖苷酶葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种

3、酶将纤维二糖分解成葡萄糖。维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖。现在学习的是第七页，共41页3 3、纤维素的分解、纤维素的分解 能分解能分解纤维素纤维素的微生物有各种细菌、的微生物有各种细菌、真菌和少数放线菌。真菌和少数放线菌。方法：滤纸崩溃法方法：滤纸崩溃法4 4、纤维素酶活性的测定实验：、纤维素酶活性的测定实验：现在学习的是第八页，共41页下列生物能分解纤维素的是（下列生物能分解纤维素的是（ ） 人人 兔兔 牛牛 蘑菇蘑菇 纤维杆菌纤维杆菌A A、 B B、 C C、 D D、C C现在学习的是第九页，共41页二、纤维素分解菌的筛选二、纤维素分解菌的筛选1.1.纤维素分解菌的筛选方法纤维

4、素分解菌的筛选方法刚果红染色法：刚果红染色法：这种方法能够通过颜色反应直接这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选对微生物进行筛选 阅读课本第阅读课本第2828页的相关部分，回答页的相关部分，回答下列问题：下列问题：现在学习的是第十页，共41页2.2.纤维素分解菌的筛选方法的原理纤维素分解菌的筛选方法的原理 刚果红是一种染料，它可以与纤维素形成红色复合物刚果红是一种染料，它可以与纤维素形成红色复合物，但并不和纤维二糖、葡萄糖发生这种反应。当纤维素被，但并不和纤维二糖、葡萄糖发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后刚果红纤维素酶分解后刚果红纤维素的复合物就无法形成，纤维素的复合物就无法形成，培

5、养基中会出培养基中会出现以纤维素分解为中心的现以纤维素分解为中心的透明圈透明圈。这样我们可以通。这样我们可以通过是否产生透明圈来筛选过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。纤维素分解菌。现在学习的是第十一页，共41页练一练：练一练：1.1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是下列关于纤维素酶的说法，错误的是A. 纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖现在学习的是第十二页，共

6、41页练一练：练一练：1.1.下列关于纤维素酶的说法，错误的是下列关于纤维素酶的说法，错误的是A. 纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B. 纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C. 纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D. 葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖现在学习的是第十三页，共41页2.利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是，下列说法错误的是A. 刚果红能与纤维素形成红色复合物刚果红能与纤维素形成红色复合物 B. 刚果红能与纤维二糖

7、形成红色复合物刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C. 刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D. 若培养基上产生了透明圈，则说明已筛若培养基上产生了透明圈，则说明已筛选出了纤维素分解菌选出了纤维素分解菌现在学习的是第十四页，共41页三、实验操作三、实验操作土壤取样土壤取样选择培养选择培养梯度稀释梯度稀释将样品涂布到鉴别纤将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基维素分解菌的培养基上上挑选产生透挑选产生透明圈的菌落明圈的菌落现在学习的是第十五页，共41页土壤取样土壤取样取样环境取样环境富含纤维素的环境中富含纤维素的环境中 由于生物与环境的相互依存关系，在由于生物与环境的相互依

8、存关系，在富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含富含纤维素的环境中，纤维素分解菌的含量相对提高，因此从这种土样中获得目的量相对提高，因此从这种土样中获得目的微生物的几率要高于普通环境。微生物的几率要高于普通环境。原因原因现在学习的是第十六页，共41页土壤取样土壤取样 实例：树林中多年落叶形成的腐殖土实例：树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等。，多年积累的枯枝败叶等。 讨论讨论: :如果找不到合适的环境，可将滤如果找不到合适的环境，可将滤纸埋在土壤中，将滤纸埋在土壤中有什么作纸埋在土壤中，将滤纸埋在土壤中有什么作用？你认为滤纸应埋进土壤中多深？用？你认为滤纸应埋进土壤中多深？ 将滤纸埋

9、在土壤中能使纤维素分解菌将滤纸埋在土壤中能使纤维素分解菌相对集中，实际上是人工设置纤维素分解相对集中，实际上是人工设置纤维素分解菌生存的适宜环境。一般应将滤纸埋于深菌生存的适宜环境。一般应将滤纸埋于深约约10cm10cm左右的土壤中。左右的土壤中。现在学习的是第十七页，共41页1.1.选择培养的目的：选择培养的目的：增加纤维素分解菌的浓度，以确保增加纤维素分解菌的浓度，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物能够从样品中分离到所需要的微生物选择培养选择培养现在学习的是第十八页，共41页参照课本参照课本2929页旁栏中的比例配置，回页旁栏中的比例配置，回答下列问题答下列问题a.a.旁栏中的配方是液

10、体培养基还是固体旁栏中的配方是液体培养基还是固体培养基？为什么？培养基？为什么？b.b.这个培养基对微生物是否具有选择作用？这个培养基对微生物是否具有选择作用？如果具有，是如何进行选择的？如果具有，是如何进行选择的？是液体培养基，原因是配方中无凝固剂是液体培养基，原因是配方中无凝固剂有选择作用，本配方中的碳源是纤维素，所有选择作用，本配方中的碳源是纤维素，所以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖以能分解纤维素的微生物可以大量繁殖2.2.制备选择培养基制备选择培养基现在学习的是第十九页，共41页3.3.操作方法：操作方法：将土样加入装有将土样加入装有30ml选择培养基的选择培养基的锥形瓶中，将锥形瓶

11、固定在摇床上，在一锥形瓶中，将锥形瓶固定在摇床上，在一定温度下振荡培养定温度下振荡培养12天，直至培养液变天，直至培养液变浑浊。也可重复选择培养浑浊。也可重复选择培养现在学习的是第二十页，共41页思考：为什么选择培养能够思考：为什么选择培养能够“浓浓缩缩”所需的微生物？所需的微生物？在选择培养的条件下，可以使那些在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“浓缩浓缩”的作用的作用现在学习的是第二十一页，共41页

12、梯度稀释梯度稀释按照课题按照课题1 1的稀释操作方法，将的稀释操作方法，将选择培养后的培养基进行等比稀释，选择培养后的培养基进行等比稀释，稀释最大倍数到稀释最大倍数到10106 6现在学习的是第二十二页，共41页将样品涂布到鉴别纤维素将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上分解菌的培养基上1. 制备培养基制备培养基:参照旁栏中的比例参照旁栏中的比例2. 涂布平板：涂布平板：将稀释度为将稀释度为104106的菌悬液各取的菌悬液各取0.1ml涂布在培养基上，涂布在培养基上，30倒置培养倒置培养现在学习的是第二十三页，共41页挑选产生透明圈的菌落挑选产生透明圈的菌落 挑取产生明显的透明圈的菌落，一挑取

13、产生明显的透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。般即为分解纤维素的菌落。 接种到纤维素分解菌的选择培养基接种到纤维素分解菌的选择培养基上，在上，在30300 0C C 37370 0C C培养，可获得纯培养培养，可获得纯培养。现在学习的是第二十四页，共41页刚果红染色法刚果红染色法方法一：方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应颜色反应方法二：方法二：在倒平板时就加入刚果红在倒平板时就加入刚果红思考：这两种方法各有哪些优点与思考：这两种方法各有哪些优点与不足？不足？现在学习的是第二十五页，共41页 方法一方法一缺点是操作繁琐，加入刚果缺点是操作繁琐，加入刚

14、果红溶液会使菌落之间发生混杂；优点是这红溶液会使菌落之间发生混杂；优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用菌的作用 方法二方法二优点是操作简便，不存在菌落优点是操作简便，不存在菌落混杂问题混杂问题缺点一是由于培养基中还含有淀粉类缺点一是由于培养基中还含有淀粉类物质，可以使能产生淀粉酶的微生物出现物质，可以使能产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应；缺点二有些微生物具有降解假阳性反应；缺点二有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红，形成明显的透明圈，与纤维降解刚果红，形成明显的透明圈，与纤维素分

15、解菌不易区分素分解菌不易区分现在学习的是第二十六页，共41页实验录像现在学习的是第二十七页，共41页1.在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合下列哪一生物学观点？，符合下列哪一生物学观点？A.生物结构与功能相适应的观点生物结构与功能相适应的观点B.生物结构与功能整体性观点生物结构与功能整体性观点C.生物与环境相适应的观点生物与环境相适应的观点D.生物发展进化的观点生物发展进化的观点练一练：练一练：现在学习的是第二十八页，共41页2.从土壤中分离获得某种微生物的步骤是从土壤中分离获得某种微生物的步骤是土壤取样梯度稀释土壤取样梯度稀释选择培养选择培养 菌悬液

16、涂布平板菌悬液涂布平板挑选出单个菌落挑选出单个菌落A. B.C. D.现在学习的是第二十九页，共41页3. 有关选择培养正确的叙述是有关选择培养正确的叙述是A. 可以增加纤维素分解菌的浓度可以增加纤维素分解菌的浓度B. 可以减少纤维素分解菌的浓度可以减少纤维素分解菌的浓度C. 所用培养基是固体培养基所用培养基是固体培养基D. 所用培养基是平板培养基所用培养基是平板培养基现在学习的是第三十页，共41页四、课题延伸四、课题延伸 本课题对分解纤维素的微生物进行了初本课题对分解纤维素的微生物进行了初步的筛选，但是这只是分离纯化的第一步。步的筛选，但是这只是分离纯化的第一步。为确定得到的是纤维素分解菌，

17、还需要进行为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的测定方发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的测定方法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所法一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。产生的葡萄糖进行定量的测定。现在学习的是第三十一页，共41页4鉴别纤维素分解菌的培养基中碳源为（ ）A、CMC-Na B、木聚糖 C、纤维素 D、裂解酶A现在学习的是第三十二页，共41页5刚果红染色时，加入刚果红应在（ ）（1）制备培养基时（2）梯度稀释时 （3）倒平板时（4）涂布时 （5）长出菌落时A、（1）（3） B、（2）（5） C、（3）（5） D、（4）（5）

18、C现在学习的是第三十三页，共41页6为以纤维素为唯一碳源筛选出真菌和细菌，试分析此类微生物在生态系统中的作用与下列哪种生物类似？（ ）A 硝化细菌 B、 蓝藻 C、蚯蚓 D、兔子C现在学习的是第三十四页，共41页7.有关平板划线操作正确的是（ ）A.使用已灭菌的接种环、培养皿，操作过程中不再灭菌B.打开含菌种的试管需要通过火焰灭菌，取出菌种后需要马上塞上棉塞C.将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线即可D.最后将平板倒置，放入恒温箱中培养D现在学习的是第三十五页，共41页练一练：1、下列关于纤维素酶的说法，错误的是A、纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B、纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C、纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D、葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖2、利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是A、刚果红能与纤维素形成红色复合物 B、刚果红能与纤维二糖形成红色复合物 C、刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D、若培养基上产生了透明圈，则说明已筛选出了纤维素分解菌现在学习的是第三十六页，共41页1、在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合下列哪一生物学观点？（ ）A、生物结构与功能相适应的观点 B、生物