中成药质量标准研究制定技术要求

1、中成药中成药质量标准研究制定技术要求质量标准研究制定技术要求123原则原则保证用药保证用药安全安全科学、先进、规范、实用科学、先进、规范、实用 继承继承、发展、创新发展、创新促进标准国际化促进标准国际化方法学验证方法学验证 中药质量标准方法学验证指导原则中药质量标准方法学验证指导原则 （中国药典（中国药典20102010年版一部年版一部 ）中药标准制定中药标准制定国家药品标准国家药品标准（第四版）（第四版）中药质量标中药质量标准研究制定技术要求准研究制定技术要求供起草用样品的要求供起草用样品的要求 l 研究用样品应具有代表性，覆盖面要广，研究用样品应具有代表性，覆盖面要广， 一般至少应收集一般

2、至少应收集1515批以上样品供研究用；批以上样品供研究用； l独家生产的应不少于独家生产的应不少于1010批，多家企业生产的批，多家企业生产的应尽量收集每家企业的样品应尽量收集每家企业的样品,5,5家以上企业生产家以上企业生产的应至少收集的应至少收集5 51010家企业生产的样品家企业生产的样品l样品量除满足起草研究、留样观察外，还应有不少样品量除满足起草研究、留样观察外，还应有不少于于3 3倍检验量的样品供复核用；倍检验量的样品供复核用；供起草用样品的要求供起草用样品的要求 l对于具有多种不同规格的品种，应收齐全部规格的样对于具有多种不同规格的品种，应收齐全部规格的样品品l试验用样品必须采用

3、合格原辅料依法生产的样品，收试验用样品必须采用合格原辅料依法生产的样品，收集的每批样品均要有该企业的原辅料和成品的自检报集的每批样品均要有该企业的原辅料和成品的自检报告告及详细生产工艺及详细生产工艺。注意注意l阴性样品系指按处方除去被测定的药味，按制阴性样品系指按处方除去被测定的药味，按制法制备的样品，注意应包括所有的辅料和工艺步法制备的样品，注意应包括所有的辅料和工艺步骤，制成量应与原标准相符骤，制成量应与原标准相符供起草用样品的要求供起草用样品的要求阴性对照样品阴性对照样品生产单位应尽可能提供生产单位应尽可能提供研究单位自制研究单位自制中成药质量标准基本内容中成药质量标准基本内容中成药质量

4、标准基本内容中成药质量标准基本内容：名称名称处方处方制法制法性状性状鉴别鉴别特征图谱特征图谱检查检查浸出物浸出物指纹图谱指纹图谱含量含量功能与主治功能与主治用法与用量用法与用量注意注意规格规格贮藏贮藏名称名称 (1)(1)、名称应符合中药及天然药物命名原则。中国药、名称应符合中药及天然药物命名原则。中国药典已收载品种名称原则上不作更改典已收载品种名称原则上不作更改(2)(2)、新增品种或原有品种名称若不符合要求确需修改的，新增品种或原有品种名称若不符合要求确需修改的，可提出申请，由国家药典委员会经过查询后统一进行命名可提出申请，由国家药典委员会经过查询后统一进行命名(3)(3)、与药典收载品种

5、同方异名的应按药典名称进行规范，与药典收载品种同方异名的应按药典名称进行规范，与药典同名异方的应更名或按药典规范处方与药典同名异方的应更名或按药典规范处方处方处方(1)(1)、处方排序按君、臣、佐、使，系列品种排序需统一处方排序按君、臣、佐、使，系列品种排序需统一(2)(2)、成方制剂中含有现版药典未收载的药材和饮片，应成方制剂中含有现版药典未收载的药材和饮片，应同时制定药材和饮片标准，并应符合中药材和饮片标准制同时制定药材和饮片标准，并应符合中药材和饮片标准制定有关技术要求定有关技术要求(3)(3)、饮片炮制方法如药典没有收载的应在标准后注明饮片炮制方法如药典没有收载的应在标准后注明处方处方

6、(4)(4)、中国药典成方制剂中原则上不再收载含有濒危、中国药典成方制剂中原则上不再收载含有濒危药材的品种。属于濒危物种或若需减去或替换的药材应按药材的品种。属于濒危物种或若需减去或替换的药材应按相关要求申报，经批准后方可列入中国药典相关要求申报，经批准后方可列入中国药典(5)(5)、处方药味以提取物（浸膏）表述的，其制法如与药典处方药味以提取物（浸膏）表述的，其制法如与药典已收载的提取物标准相同，则应使用药典提取物名称，执已收载的提取物标准相同，则应使用药典提取物名称，执行该提取物标准；若与药典标准不同或药典未收载，则应行该提取物标准；若与药典标准不同或药典未收载，则应将该提取物标准列于标准

7、正文之下将该提取物标准列于标准正文之下（6 6）属于药典分列的品种或易混淆品种应注意核对属于药典分列的品种或易混淆品种应注意核对和明确所用药材品种，不同剂型的系列品种处方药和明确所用药材品种，不同剂型的系列品种处方药材品种应一致材品种应一致处方处方五味子、南五味子五味子、南五味子 金银花、山银花金银花、山银花葛根、葛根、 粉葛粉葛前胡、前胡、 紫花前胡紫花前胡黄柏、黄柏、 关黄柏关黄柏制法制法（1 1）标准中的标准中的“制法制法”项作为一个法定的公共标准，对同项作为一个法定的公共标准，对同品种要有其普适性，应按实际生产情况简要表述工艺流程品种要有其普适性，应按实际生产情况简要表述工艺流程中的主

8、要步骤中的主要步骤（2 2）制法项内容应符合药典附录制剂通则各剂型有关规定制法项内容应符合药典附录制剂通则各剂型有关规定提取溶剂的名称、提取方法、分离、浓缩、干燥提取溶剂的名称、提取方法、分离、浓缩、干燥等主要步骤并规定制成总量（除另有规定外，以等主要步骤并规定制成总量（除另有规定外，以10001000为单位），不列详细技术参数。但在起草说为单位），不列详细技术参数。但在起草说明中应列出全部的生产工艺流程和详细技术参数明中应列出全部的生产工艺流程和详细技术参数。（3 3）成型工艺中仅用于调整制成量的淀粉、糊精等辅料成型工艺中仅用于调整制成量的淀粉、糊精等辅料可不固定用量可不固定用量制法制法（4

9、 4）大蜜丸、小蜜丸、水蜜丸、水丸等通常可作为同一大蜜丸、小蜜丸、水蜜丸、水丸等通常可作为同一丸剂的不同规格列入同一品种项下丸剂的不同规格列入同一品种项下（5 5）醇沉前的相对密度、测定温度应列出，一般有一个）醇沉前的相对密度、测定温度应列出，一般有一个可以规定范围可以规定范围（6 6）注意同品种多厂家制法的统一，不同规格可折成制）注意同品种多厂家制法的统一，不同规格可折成制成不同量成不同量性状性状（1 1）外观性状是对药品的颜色和外表感官的描述外观性状是对药品的颜色和外表感官的描述（2 2）性状项下应写明品种的外观形状、色、嗅、味等性状项下应写明品种的外观形状、色、嗅、味等（3 3）对制剂颜

10、色的描述可根据对制剂颜色的描述可根据实实样规定一定的范围样规定一定的范围（4 4）注意按照丸剂通则的规定，根据制法和规格对蜜注意按照丸剂通则的规定，根据制法和规格对蜜丸、水蜜丸、水丸、糊丸、蜡丸、浓缩丸（蜜丸、水丸、水蜜丸、水丸、糊丸、蜡丸、浓缩丸（蜜丸、水丸、水蜜丸）等准确分类并在性状中明确。丸、水蜜丸）等准确分类并在性状中明确。鉴别鉴别鉴别鉴别色谱鉴别色谱鉴别理化鉴别理化鉴别显微鉴别显微鉴别一般理化鉴别一般理化鉴别荧光鉴别荧光鉴别光谱鉴别光谱鉴别薄层色谱鉴别薄层色谱鉴别液相色谱鉴别液相色谱鉴别气相色谱鉴别气相色谱鉴别特征图谱鉴别特征图谱鉴别鉴别鉴别(2)(2)、制剂中各药味的鉴别方法除前处

11、理外，原则上、制剂中各药味的鉴别方法除前处理外，原则上应尽量与该药材和饮片的专属鉴别方法一致，如因其应尽量与该药材和饮片的专属鉴别方法一致，如因其他成分干扰或制剂的提取方法不同，不能采用与该药他成分干扰或制剂的提取方法不同，不能采用与该药材相同的鉴别方法时，可采用其他鉴别方法，并在起材相同的鉴别方法时，可采用其他鉴别方法，并在起草说明中予以阐明。草说明中予以阐明。（1)1)鉴别试验应符合重现性、专属性和耐用性的验证鉴别试验应符合重现性、专属性和耐用性的验证要求要求，首先应建立君药、贵重药、易混淆药的鉴别，首先应建立君药、贵重药、易混淆药的鉴别，并对每味药材逐一进行鉴别研究。并对每味药材逐一进行

12、鉴别研究。总体要求鉴别鉴别(3)(3)、系列品种系列品种其鉴别方法应保持一致其鉴别方法应保持一致(4)(4)、处方中含多来源植物药味的，若使用对照药材进、处方中含多来源植物药味的，若使用对照药材进行鉴别时，应对对照药材的适用性进行考察。若对照行鉴别时，应对对照药材的适用性进行考察。若对照药材与供试品图谱差异较大，则不适合采用该对照药药材与供试品图谱差异较大，则不适合采用该对照药材作鉴别对照，可考虑采用对照提取物及对照品进行材作鉴别对照，可考虑采用对照提取物及对照品进行鉴别。鉴别。总体要求总体要求鉴别鉴别（1 1）应对处方中所有以粉末投料的药材逐一进行研究应对处方中所有以粉末投料的药材逐一进行研

13、究（2 2）选择特征性强、与处方中其它药味无交叉干扰的显选择特征性强、与处方中其它药味无交叉干扰的显微特征作为鉴别依据微特征作为鉴别依据，如果确有干扰，可选用其他显微如果确有干扰，可选用其他显微特征或改用其他鉴别方法特征或改用其他鉴别方法（3 3）所收载的特征应明显、易于检出所收载的特征应明显、易于检出对镜检出现概率低于对镜检出现概率低于60%60%的（制片的（制片5 5张，可检出张，可检出规定特征的应不少于规定特征的应不少于3 3张），或镜检难度大的，张），或镜检难度大的，且已有该药材且已有该药材TLCTLC鉴别的，可不作正文规定。对鉴别的，可不作正文规定。对不易查见或无专属性的显微特征不要

14、列入不易查见或无专属性的显微特征不要列入显微鉴别显微鉴别鉴别鉴别（4 4）对于多来源的药材，应采用共有的组织、细胞或内对于多来源的药材，应采用共有的组织、细胞或内含物的特征含物的特征（5 5）药典成方制剂药材粉末通常以细粉（小于药典成方制剂药材粉末通常以细粉（小于180180m m）投料，应注意显微鉴别项下的特征的大小与药材细度尽量投料，应注意显微鉴别项下的特征的大小与药材细度尽量相一致相一致单一药材粉末的主要特征有时不一定能作为鉴别单一药材粉末的主要特征有时不一定能作为鉴别依据，而某些较为次要的特征有时却能起到重要依据，而某些较为次要的特征有时却能起到重要的鉴别作用。因此在选取处方各药味显微

15、特征时的鉴别作用。因此在选取处方各药味显微特征时要考虑到其特征性要考虑到其特征性显微鉴别显微鉴别（6 6）对复方中含有原粉入药的成方制剂，应选择被检药材对复方中含有原粉入药的成方制剂，应选择被检药材特有的与其它药材区别大的特征特有的与其它药材区别大的特征鉴别鉴别（1 1）应选择专属性强、反应明显的显色反应、沉淀反应应选择专属性强、反应明显的显色反应、沉淀反应等鉴别方法等鉴别方法（2 2）必要时写明化学反应式必要时写明化学反应式（4 4）尽量避免用于中药复方制剂中共性成分的鉴别尽量避免用于中药复方制剂中共性成分的鉴别，关注，关注阴性有无干扰阴性有无干扰理化鉴别理化鉴别（3 3）一般用于制剂中的矿

16、物药或某一化学成分的鉴别一般用于制剂中的矿物药或某一化学成分的鉴别鉴别鉴别（1 1）薄层色谱薄层色谱具分离与鉴别特性，并具分离与鉴别特性，并具有直观具有直观、承载信承载信息大、专属性强、快速、经济、操作简便等优点，息大、专属性强、快速、经济、操作简便等优点，是中成是中成药药鉴别的鉴别的首选首选方法。方法。（2 2）新建立的薄层色谱应该）新建立的薄层色谱应该图谱清晰，斑点明显，分离图谱清晰，斑点明显，分离度度、专属性、专属性、重现性重现性与耐用性与耐用性符合要求符合要求，并需提供图谱。，并需提供图谱。薄层色谱薄层色谱鉴别鉴别（3 3）应尽量与该药材和饮片的应尽量与该药材和饮片的薄层色谱薄层色谱鉴

17、别方法一致，鉴别方法一致，如因其他成分干扰或制剂的提取方法不同，可如因其他成分干扰或制剂的提取方法不同，可增加提取、增加提取、纯化处理或展开剂优化纯化处理或展开剂优化。鉴别鉴别供试品溶液的制备供试品溶液的制备：应尽可能除去干扰，同时方法尽量简便，首先进行提取、纯化选择，如回流、超声提取方法，溶剂、时间，酸碱处理，溶剂萃取，柱子纯化等的选择薄层板的选择：吸附剂的比较，选硅胶薄层板的选择：吸附剂的比较，选硅胶G G板还是板还是GF254GF254板板对照品选择：对照品选择：尽量采用以对照品和对照提取物或对照药材同时进行对照。当对照品不易获得时，可采用对照提取物或对照药材为对照新增新增薄层色谱薄层色

18、谱鉴别要求鉴别要求鉴别鉴别提取、纯化选择：提取方法回流、超声或溶剂提取，溶剂提取、纯化选择：提取方法回流、超声或溶剂提取，溶剂选择，酸碱处理，溶剂萃取，柱子纯化选择，酸碱处理，溶剂萃取，柱子纯化薄层板的选择：吸附剂的比较，选硅胶薄层板的选择：吸附剂的比较，选硅胶G G板还是板还是GF254GF254板板对照品选择：对照品选择：尽量采用以对照品和对照提取物或对照药材尽量采用以对照品和对照提取物或对照药材同时进行对照。当对照品不易获得时，可采用对照提取物同时进行对照。当对照品不易获得时，可采用对照提取物或对照药材为对照或对照药材为对照新增新增薄层色谱薄层色谱鉴别要求鉴别要求点样量的选择：不同点样量

19、比较点样量的选择：不同点样量比较鉴别鉴别展开剂选择：展开剂选择：对三个以上的展开系统进行考察比较显色条件选择：显色条件选择：日光、紫外光、显色剂耐用性：耐用性：不同厂牌的薄层板、相对温度、湿度等新增新增薄层色谱薄层色谱鉴别要求鉴别要求阴性空白试验：阴性空白试验：以证明其他药味无干扰点样量的选择：点样量的选择：不同点样量比较原点位置原点位置溶剂前沿溶剂前沿T：25 RH：5112 3 4 5 6 789123 4 5 678溶剂前沿原点位置12345 6 78照片9 庆余辟瘟丹鉴别（2）TLC 照片10 鉴别（2）TLC展开剂比较薄层板：青岛海洋硅胶G板 薄层板：青岛海洋硅胶G板展开剂：甲苯-乙

20、酸乙酯-异丙醇-甲醇-水 展开剂：正丁醇冰醋酸水（6:3:1.5:1.5:0.3） （7:1:2）1、缺黄连阴性 1、缺黄连阴性 38 庆余辟瘟丹样品 2、黄连对照药材 2、9 黄连对照药材 38、 庆余辟瘟丹样品照片11 鉴别（2）TLC薄层板比较薄层板：MN硅胶G板 展开剂：甲苯-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-水 （6:3:1.5:1.5:0.3） 1 缺黄连阴性 2 黄连对照药材 3-8 庆余辟瘟丹样品庆余辟瘟丹庆余辟瘟丹鉴别鉴别（1 1）使用对照药材应保证药材的主斑点在样品中均有对使用对照药材应保证药材的主斑点在样品中均有对应的斑点（可参照制法对药材进行前处理），供试品色谱应的斑点（可参照制

21、法对药材进行前处理），供试品色谱中不能只有对照药材色谱中的中不能只有对照药材色谱中的1 12 2个次要斑点相对应。个次要斑点相对应。（2 2）尽可能采取一个供试液多项多维鉴别使用的薄层色尽可能采取一个供试液多项多维鉴别使用的薄层色谱方法，达到节约资源、保护环境、简便实用的目的谱方法，达到节约资源、保护环境、简便实用的目的（4 4）对原方法的验证注意原标准点样量按手铺板制定，现）对原方法的验证注意原标准点样量按手铺板制定，现用市售薄层板点样量过大分离度差，点样量可减少用市售薄层板点样量过大分离度差，点样量可减少薄层色谱薄层色谱鉴别鉴别（3 3）注意）注意“过柱过柱”的影响，不同品牌、不同批号的吸

22、附剂的影响，不同品牌、不同批号的吸附剂吸附能力有的不同吸附能力有的不同注意点注意点鉴别鉴别（1 1）处方中药味有多种含挥发性成分时，尽可能在同一处方中药味有多种含挥发性成分时，尽可能在同一色谱条件下进行鉴别色谱条件下进行鉴别应根据待测样品的性质，选用合适的色谱柱、检应根据待测样品的性质，选用合适的色谱柱、检测器等，进行系统适应性试验，考察分离度测器等，进行系统适应性试验，考察分离度、专、专属性、耐用性属性、耐用性等等（2 2）用挥发油对照提取物对照，相关组分峰应达到良好分用挥发油对照提取物对照，相关组分峰应达到良好分离，保证结果的重现性离，保证结果的重现性气相气相色谱色谱鉴别鉴别鉴别鉴别处方中

23、处方中成分量低，薄层色谱有干扰成分量低，薄层色谱有干扰时，时，可试研究用液相可试研究用液相色色谱谱鉴别鉴别应根据待测样品的性质选用适宜的色谱柱、流动相、应根据待测样品的性质选用适宜的色谱柱、流动相、检测器等，考察分离度、重复性、检测器等，考察分离度、重复性、专属性与耐用性专属性与耐用性，选择最佳色谱条件选择最佳色谱条件阴性空白试验，确证其他药味无干扰阴性空白试验，确证其他药味无干扰液相液相色谱色谱鉴别鉴别专属性专属性峰纯度试验，确证无重叠峰峰纯度试验，确证无重叠峰鉴别鉴别特征图谱是能够体现中药整体特性的图谱特征图谱是能够体现中药整体特性的图谱或或选取图谱中某选取图谱中某些重要的特征信息，作为控

24、制中药质量的重要鉴别手段。些重要的特征信息，作为控制中药质量的重要鉴别手段。列于鉴别项下列于鉴别项下供试品应呈现与对照品色谱峰保留时间相同的色谱峰，并供试品应呈现与对照品色谱峰保留时间相同的色谱峰，并呈现与对照药材或对照提取物保留时间相同的几个色谱峰呈现与对照药材或对照提取物保留时间相同的几个色谱峰特征图谱鉴别特征图谱鉴别分析方法建立方法认证方法学验证特征图谱鉴别特征图谱鉴别方法的建立方法的建立特征特征图谱图谱方法方法建立建立色谱条件的优化色谱条件的优化检测方法选择检测方法选择HPLC/UVHPLC/ELSD波长选择波长选择*流动相选择流动相选择样品的收集样品的收集*药材或饮片中成药参照物的选

25、择参照物的选择洗脱方式比较流动相系统不同酸度比较GC供试品的制备供试品的制备对照品对照提取物特征图谱特征图谱方法认证方法认证特征图谱是否具有代表性特征图谱是否具有代表性能否表征待测样品所含能否表征待测样品所含成分的专属性成分的专属性峰的确认峰的确认找出不同药材在找出不同药材在图中的特征峰图中的特征峰特征峰专属性特征峰专属性考察考察类似产品的考察类似产品的考察1234567S8910茵陈茵陈金银花金银花栀子栀子黄芩苷黄芩苷特征峰的确认特征峰的确认5.010.015.020.025.030.0min0255075100mAU10.5010.7511.0011.2511.5011.75MPaA.Pr

26、ess.(Status)248nm,4nm (1.00)123456S专属性考察专属性考察6、金雀异黄素、金雀异黄素 S、5-甲基蜂蜜曲菌素甲基蜂蜜曲菌素乌灵胶囊与近似产品指纹比较0.02.55.07.510.012.515.017.520.022.525.027.530.032.5min0250005000075000100000125000150000175000200000225000250000275000300000325000乌灵胶囊金水宝胶囊至灵胶囊百令胶囊宁心宝胶囊123456S色谱柱考察色谱柱考察不同仪器考察不同仪器考察不同流速考察不同流速考察不同柱温考察不同柱温考察溶液的稳

27、定性溶液的稳定性重复性重复性重现性重现性精密度精密度耐用性耐用性方法学验证方法学验证不同不同pHpH考察考察检查检查(1)(1) 按照制剂通则明确各品种需规定的检查项目并制定按照制剂通则明确各品种需规定的检查项目并制定限度值。如：相对密度、限度值。如：相对密度、pHpH值、乙醇量、总固体、软化值、乙醇量、总固体、软化点、黏附力、折光率、喷射速率、喷射试验、注射剂安点、黏附力、折光率、喷射速率、喷射试验、注射剂安全性检查等全性检查等（2 2）根据各品种的情况制定相应的检查项，如：炽灼残）根据各品种的情况制定相应的检查项，如：炽灼残渣、重金属及有害元素、农药残留量、有毒有害物质、渣、重金属及有害元

28、素、农药残留量、有毒有害物质、有机溶剂残留量、树脂降解产物检查等有机溶剂残留量、树脂降解产物检查等（3 3）当药典附录中检查方法有多种并列时，应明确使用）当药典附录中检查方法有多种并列时，应明确使用第几法，并说明理由第几法，并说明理由检查检查(4)(4)药典未收载的剂型应根据其剂型特点和用药需要制药典未收载的剂型应根据其剂型特点和用药需要制定相应的检查项目定相应的检查项目(5)(5)单一成分的制剂或中西合方制剂中的化学药必要时应单一成分的制剂或中西合方制剂中的化学药必要时应检查含量均匀度检查含量均匀度(6)(6)含有毒性药材的制剂，原则上应制订有关毒性成分的含有毒性药材的制剂，原则上应制订有关

29、毒性成分的检查项目，以确保用药安全检查项目，以确保用药安全( (7)7)使用含有矿物药、可能被重金属和有害元素污染的中使用含有矿物药、可能被重金属和有害元素污染的中药饮片（如地龙）生产的中药制剂，或生产过程可能造药饮片（如地龙）生产的中药制剂，或生产过程可能造成相应污染的中药制剂，原则上应采用铅、镉、砷、汞、成相应污染的中药制剂，原则上应采用铅、镉、砷、汞、铜检查法检查并制定相应的限度铜检查法检查并制定相应的限度检查检查(8)(8) 中药注射剂应制定铅、镉、砷、汞、铜检查项，含中药注射剂应制定铅、镉、砷、汞、铜检查项，含雄黄，朱砂的制剂应采用专属性的方法对可溶性砷、汞雄黄，朱砂的制剂应采用专属

30、性的方法对可溶性砷、汞进行检查并制定限度进行检查并制定限度(9)(9) 使用乙酸乙酯、甲醇、三氯甲烷等有机溶媒萃取、使用乙酸乙酯、甲醇、三氯甲烷等有机溶媒萃取、分离、重结晶等工艺的中药制剂应进行残留溶剂检查并分离、重结晶等工艺的中药制剂应进行残留溶剂检查并规定限量规定限量(10)(10) 工艺中使用吸附树脂进行分离纯化的制剂，应控制工艺中使用吸附树脂进行分离纯化的制剂，应控制树脂中残留致孔剂和降解产物。根据吸附树脂的种类、树脂中残留致孔剂和降解产物。根据吸附树脂的种类、型号规定检查项目，主要有苯、二甲苯、甲苯、苯乙烯、型号规定检查项目，主要有苯、二甲苯、甲苯、苯乙烯、二乙基苯等二乙基苯等指纹图

31、谱指纹图谱指纹图谱是基于图谱的整体信息，用于中药质量的整体评指纹图谱是基于图谱的整体信息，用于中药质量的整体评价价，确保其内在质量的均一、稳定确保其内在质量的均一、稳定相关性相关性在建立成方制剂特征图谱或指纹图谱时还应同时建立在建立成方制剂特征图谱或指纹图谱时还应同时建立药材和饮片、中间体的相应图谱。并须对三者间的相关性进药材和饮片、中间体的相应图谱。并须对三者间的相关性进行分析，应具相关性行分析，应具相关性指纹图谱指纹图谱分析方法建立方法认证方法学验证指纹图谱方法指纹图谱方法的建立的建立数据处理和评价浸出物浸出物或总固体或总固体（1 1）可根据成方制剂中主要成分的理化性质选择合可根据成方制剂

32、中主要成分的理化性质选择合适的溶剂有针对性的对某一类成分进行浸出物测定，适的溶剂有针对性的对某一类成分进行浸出物测定，应注意避免辅料的干扰应注意避免辅料的干扰（2 2）含糖等辅料多的剂型对浸出物的测定有一定影含糖等辅料多的剂型对浸出物的测定有一定影响，一般不采用乙醇或甲醇作为浸出溶剂，可根据所响，一般不采用乙醇或甲醇作为浸出溶剂，可根据所含成分选用合适的溶剂含成分选用合适的溶剂（3 3）酒剂、注射液等要求进行总固体测定，含糖或）酒剂、注射液等要求进行总固体测定，含糖或其它辅料应先除去再测定其它辅料应先除去再测定含量测定含量测定。 。 首选制剂处方中的君药、臣药、起主要药效作用的活性成分、类别成

33、分或组分、贵细药及毒性药材中的有效成分、有毒成分测定成分的选定测定成分的选定上述药味的有效成分不明确或无专属性方法进行测定时，可选择其他药味进行含量测定若处方中含有化学药成分必须进行含量测定，并若处方中含有化学药成分必须进行含量测定，并规定上下限规定上下限含量测定含量测定。 。 尽可能建立多指标含量测定尽可能建立多指标含量测定测定成分的选定测定成分的选定或测定单一有效成分后再测定其类别成分总量，如总或测定单一有效成分后再测定其类别成分总量，如总黄酮、总生物碱、总皂苷、总鞣质等黄酮、总生物碱、总皂苷、总鞣质等同一类别的成分或可相互转化的成分可分别测定其单同一类别的成分或可相互转化的成分可分别测定

34、其单个成分的含量合并计算总量，如人参皂苷类、苦参碱个成分的含量合并计算总量，如人参皂苷类、苦参碱和氧化苦参碱等和氧化苦参碱等HPLCHPLC的梯度洗脱，同一色谱条件的梯度洗脱，同一色谱条件同时测定多个成分同时测定多个成分含量测定含量测定。 。 成方制剂所测定的成分应尽量与药材成方制剂所测定的成分应尽量与药材测定成分相对应测定成分相对应测定成分的选定测定成分的选定系列品种质量标准的检测方法及指标系列品种质量标准的检测方法及指标应尽可能统一应尽可能统一测定成分应注意避免测定分解产物、不测定成分应注意避免测定分解产物、不稳定成分、非专属性成分或微量成分稳定成分、非专属性成分或微量成分含量测定含量测定

35、。 。 。 根据成分性质选择专属性、重现性、根据成分性质选择专属性、重现性、实用性好的方法如实用性好的方法如HPLCHPLC、GCGC等等测定测定方法方法的选定的选定检测器的选择，如蒸发光散射检测器等检测仪器的应检测器的选择，如蒸发光散射检测器等检测仪器的应用，扩大了紫外区无吸收成分的检测范围用，扩大了紫外区无吸收成分的检测范围多指标含量测定多指标含量测定一测多评方法一测多评方法以对照提取物为对照以对照提取物为对照双波长测定双波长测定脱水穿心莲对照品溶液色谱图（254nm）消炎利胆片色谱图（254nm）阴性样品溶液色谱图（254nm）穿心莲对照品溶液色谱图（225nm）消炎利胆片色谱图（225

36、nm）阴性样品溶液色谱图（225nm）消炎利胆片消炎利胆片穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯双波长双波长的含量测定的含量测定含量测定含量测定。 。 。 。 含量限度应根据中药制剂实测结果与原料药材的含含量限度应根据中药制剂实测结果与原料药材的含量情况确定量情况确定，至少应有至少应有1515批以上样品数据为依据批以上样品数据为依据含量限度确定含量限度确定检测方法与药典规定不同的或药典药材中无相应含检测方法与药典规定不同的或药典药材中无相应含量测定项的应提供至少量测定项的应提供至少3 3批以上的原料药材含量数批以上的原料药材含量数据，以便计算转移率据，以便计算转移率原粉入药的转移

37、率一般要求在原粉入药的转移率一般要求在90%90%以上以上含量测定含量测定。 。 。 有毒成分及中西药复方制剂中化学药品的含量应规有毒成分及中西药复方制剂中化学药品的含量应规定上下限定上下限含量限度确定含量限度确定上下限幅度应根据测试方法、品种情况、上下限幅度应根据测试方法、品种情况、转移率及标示量确定，一般应在转移率及标示量确定，一般应在10%10%20%20%之间之间中药注射液大类成分的含量限度也应规定中药注射液大类成分的含量限度也应规定上下限上下限规格规格应根据剂型、品种的特点和临床用法与用量制定规范合应根据剂型、品种的特点和临床用法与用量制定规范合理的规格，并提供相应依据理的规格，并提

38、供相应依据片剂（糖衣片规定片芯重量）、胶囊剂、栓剂、合剂、片剂（糖衣片规定片芯重量）、胶囊剂、栓剂、合剂、注射剂、喷雾剂、气雾剂等剂型应规定每个制剂单位的注射剂、喷雾剂、气雾剂等剂型应规定每个制剂单位的重（装）量重（装）量单剂量包装的制剂应规定每个包装单位的装量。如颗单剂量包装的制剂应规定每个包装单位的装量。如颗粒剂、散剂、丸剂等粒剂、散剂、丸剂等以丸数服用的丸剂、滴丸剂应规定每丸或每以丸数服用的丸剂、滴丸剂应规定每丸或每1010丸的重量丸的重量单体成分或有效部位、组分制剂可规定每个制剂单位的单体成分或有效部位、组分制剂可规定每个制剂单位的标示含量标示含量123二、二、中药提取纯化技术要求中药

39、提取纯化技术要求 中药提取纯化方法是中药分析方法的重要组成中药提取纯化方法是中药分析方法的重要组成部分，是得到准确可靠分析结果的重要保证。部分，是得到准确可靠分析结果的重要保证。以确保提取效率、准确性和耐用性符合要求以确保提取效率、准确性和耐用性符合要求中药中药分析方法的建立应充分优化供试样品的提分析方法的建立应充分优化供试样品的提取、纯化方法，最大程度富集待测成分，排除干取、纯化方法，最大程度富集待测成分，排除干扰扰二、二、中药提取纯化技术要求中药提取纯化技术要求中中药药提提取取纯纯化化方方法法提取方法提取方法纯化方法纯化方法冷浸冷浸加热回流加热回流索氏提取索氏提取超声提取超声提取水蒸气蒸馏

40、法水蒸气蒸馏法液液- -液萃取液萃取柱色谱分离纯化柱色谱分离纯化沉淀沉淀衍生化衍生化提取方法的选择提取方法的选择 样品的性状样品的性状 待测成分待测成分的理化性质的理化性质不同不同 工艺的不同工艺的不同 待测成分的含量待测成分的含量选择选择3 3种种提取方法提取方法平行试验平行试验提取方法的选择应根据提取方法的选择应根据提取方法的选择提取方法的选择 检测仪器的选择检测仪器的选择 检测器的选择检测器的选择 检测波长的选择检测波长的选择 流动相或展开剂的选择流动相或展开剂的选择 测定指标的选择测定指标的选择提取方法的选择前应进行以下初步试验选择提取方法的选择前应进行以下初步试验选择提取方法的选择提

41、取方法的选择提取方法提取方法加热回流加热回流索氏提取索氏提取超声提取超声提取冷浸冷浸水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法提取条件提取条件的选择的选择加热回流加热回流超声提取超声提取冷浸冷浸溶剂种类溶剂种类溶剂用量溶剂用量提取提取时间时间提取次数提取次数索氏提取索氏提取溶剂种类溶剂种类提取提取时间时间水蒸气蒸馏法水蒸气蒸馏法浸泡时间浸泡时间蒸馏时间蒸馏时间提取条件提取条件的选择的选择 选用选用3 3种有一定极性差的对待测成分溶解性好且种有一定极性差的对待测成分溶解性好且较少溶解杂质的溶剂提取较少溶解杂质的溶剂提取水、甲醇、乙醇、正丁醇、乙酸水、甲醇、乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、三氯甲烷、乙醚、石油醚乙酯、三氯甲

42、烷、乙醚、石油醚等，亦可选择适当溶剂、适量比等，亦可选择适当溶剂、适量比例混合例混合溶剂种类溶剂种类 依次选用不同的溶剂量，从低到高，平行操依次选用不同的溶剂量，从低到高，平行操作，最终选用待测成分含量不再增加的溶作，最终选用待测成分含量不再增加的溶剂量剂量溶剂用量溶剂用量提取条件提取条件的选择的选择依次增加提取时间，最终选用待测成分含量不再依次增加提取时间，最终选用待测成分含量不再增加的提取时间。至少增加的提取时间。至少3 3个时间个时间提取时间提取时间提取次数提取次数依次增加提取次数，最终选用待测成分含量不再依次增加提取次数，最终选用待测成分含量不再增加的提取次数增加的提取次数提取条件提取

43、条件的选择的选择提取条件提取条件的选择的选择 对温度和对温度和pHpH敏感的待测成分敏感的待测成分 平行试验法平行试验法正交试验法正交试验法还应考察温度和还应考察温度和pHpH值的影响值的影响比较方式比较方式地黄药材中麦角甾苷含量测定地黄药材中麦角甾苷含量测定提取方式的选择提取方式的选择提取方式提取方式相当于样品的相当于样品的麦角甾苷峰面积麦角甾苷峰面积超声超声45 min45 min446446加热回流加热回流1.5 h1.5 h562562索氏提取索氏提取6 h6 h558558结果表明对麦角甾苷的提取效率来说，加热回流比超结果表明对麦角甾苷的提取效率来说，加热回流比超声提取法要好，与索氏

44、提取无显著差异，由于索氏提声提取法要好，与索氏提取无显著差异，由于索氏提取时间较长，考虑方法便捷性和效率，因此选用加热取时间较长，考虑方法便捷性和效率，因此选用加热回流作为地黄药材中麦角甾苷的提取方法回流作为地黄药材中麦角甾苷的提取方法地黄药材中麦角甾苷含量测定地黄药材中麦角甾苷含量测定的提取溶剂的选择的提取溶剂的选择提取溶剂提取溶剂相当于样品的相当于样品的麦角甾苷峰面积麦角甾苷峰面积水水52052050%50%甲醇甲醇616616甲醇甲醇602602结果表明，甲醇和结果表明，甲醇和50%50%甲醇提取率相差不大，甲醇提取率相差不大，T T检验检验无显著差异，考虑操作及溶剂回收方便，因此选用无

45、显著差异，考虑操作及溶剂回收方便，因此选用甲醇作为提取溶媒甲醇作为提取溶媒地黄药材中麦角甾苷含量测定地黄药材中麦角甾苷含量测定溶剂用量的选择溶剂用量的选择 提取溶剂用量（提取溶剂用量（mlml）相当于相当于1g1g样品的样品的麦角甾苷峰面积麦角甾苷峰面积20205325325050562562100100578578结果表明，溶剂结果表明，溶剂5050倍量提取和溶剂倍量提取和溶剂100100倍提取倍提取无显著性差异，而显著高于无显著性差异，而显著高于2020倍量，因此选倍量，因此选用甲醇用甲醇50ml50ml，作为最佳提取溶剂量。，作为最佳提取溶剂量。地黄药材中麦角甾苷含量测定地黄药材中麦角甾

46、苷含量测定提取时间的选择提取时间的选择 提取时间（提取时间（minmin）相当于相当于1g1g样品的样品的麦角甾苷峰面积麦角甾苷峰面积303053453460605305309090527527结果表明，加入甲醇结果表明，加入甲醇50ml50ml，加热回流提取，加热回流提取30min30min，60min60min，90min90min时，对麦角甾苷的含量无显著性差异，时，对麦角甾苷的含量无显著性差异，因此选择提取时间为因此选择提取时间为30 min30 min。 分离纯化方法的选择分离纯化方法的选择液液- -液萃取液萃取柱色谱分离纯化柱色谱分离纯化沉淀沉淀纯化方法纯化方法液液- -液萃取法液

47、萃取法条件选择条件选择液液- -液萃取法液萃取法 萃取萃取溶剂溶剂萃取的用量萃取的用量萃取的次数萃取的次数萃取萃取溶剂的选择溶剂的选择 常被选用的溶剂常被选用的溶剂有有甲醇甲醇、乙醇乙醇、正丁醇等、正丁醇等 碱性条件下用三氯甲烷提取生物碱，碱性条件下用三氯甲烷提取生物碱， 乙酸乙酯乙酸乙酯可可提取黄酮化合物，提取黄酮化合物， 乙醚或石油醚乙醚或石油醚可可提取脂溶性化合物或挥发性成分提取脂溶性化合物或挥发性成分 石油醚石油醚可可除去脂肪油等亲脂性色素；除去脂肪油等亲脂性色素；预测成分溶解度的性质，经反复处理，使其转溶于亲脂预测成分溶解度的性质，经反复处理，使其转溶于亲脂性溶剂和亲水性溶剂之间，以

48、除去水溶性杂质和脂溶性性溶剂和亲水性溶剂之间，以除去水溶性杂质和脂溶性杂质杂质能与酸性染料或大分子酸形成离子对，能溶于有机溶剂能与酸性染料或大分子酸形成离子对，能溶于有机溶剂的性质，利用离子对的萃取与杂质分开的性质，利用离子对的萃取与杂质分开固液萃取法固液萃取法条件选择条件选择 柱色谱分柱色谱分离纯化离纯化法法固定相固定相选择选择洗脱剂洗脱剂选择选择固定相的种类固定相的种类固定相的用量固定相的用量洗脱剂的种类洗脱剂的种类洗脱剂的配比洗脱剂的配比洗脱剂的用量洗脱剂的用量洗脱顺序洗脱顺序固液萃取法固液萃取法条件选择条件选择 氧化铝、聚酰胺、大孔树脂、离子交换树氧化铝、聚酰胺、大孔树脂、离子交换树脂

49、、活性炭、硅烷化硅胶（脂、活性炭、硅烷化硅胶（C18C18、C8C8）、氨）、氨基键合相、硅胶等等基键合相、硅胶等等 常用的固定相常用的固定相 柱容量考察成分的吸附与过载来确定固定柱容量考察成分的吸附与过载来确定固定相的用量相的用量固定相的用量固定相的用量或选用或选用2 2种混合装柱种混合装柱固液萃取法固液萃取法条件选择条件选择 商品固相萃取柱商品固相萃取柱不同品牌的提取效率不同品牌的提取效率批号的提取效率批号的提取效率沉淀法沉淀法不同沉淀试剂不同沉淀试剂沉淀试剂用量沉淀试剂用量沉淀法沉淀法试剂使杂质沉淀，保留溶液试剂使杂质沉淀，保留溶液试剂使预测定成分沉淀，然后滤取沉淀，弃去滤液试剂使预测定

50、成分沉淀，然后滤取沉淀，弃去滤液沉淀方式沉淀方式提取方提取方法法联用联用冷浸超声处理冷浸超声处理加热回流沉淀法加热回流沉淀法123验证项目验证项目鉴别试验鉴别试验限量检查限量检查残留物、添加剂残留物、添加剂含量测定含量测定中药制剂溶出度、释放度中药制剂溶出度、释放度指纹图谱指纹图谱三、中药分析方法验证内容中药分析方法验证内容 提取效率提取效率 准确度准确度 精密度（重复性、中间精密度和重现性）精密度（重复性、中间精密度和重现性） 专属性专属性 检测限检测限 定量限定量限 线性线性 范围范围 耐用性耐用性验证内容验证内容 在建立中药在建立中药定量定量分析方法时应对提取效率进行分析方法时应对提取效

51、率进行考察考察，以保证中药定量分析方法的准确，以保证中药定量分析方法的准确。提取效率提取效率 Extract Efficiency Extract Efficiency提取效率系指用提取效率系指用所建立的方法所建立的方法可可将待测成分有效将待测成分有效提取的程度提取的程度，一般用确定的提取方法所得结果与，一般用确定的提取方法所得结果与增加提取次数等完全提取方法所得结果的相对偏增加提取次数等完全提取方法所得结果的相对偏差表示差表示。提取方提取方法类型法类型完全提取法完全提取法（索氏提取法、多次回流提取法等索氏提取法、多次回流提取法等）平衡提取法平衡提取法（单次超声提取、单次回流提取等单次超声提取

52、、单次回流提取等）提取效率提取效率 完全提取还应选择完全提取还应选择1 1至至2 2种比规定溶剂极性稍大的种比规定溶剂极性稍大的溶剂同法操作，将选定溶剂测得结果与考察溶剂溶剂同法操作，将选定溶剂测得结果与考察溶剂测得结果进行比较，选定溶剂的提取效率不得少测得结果进行比较，选定溶剂的提取效率不得少于于95%95%。 提取效率提取效率完全提取应在规定的提取次数上增加完全提取应在规定的提取次数上增加1 1次至次至2 2次，次，测定结果与选定次数提取所得的含量值相比，相测定结果与选定次数提取所得的含量值相比，相对偏差不得大于对偏差不得大于5%5%。木芙蓉叶芦丁木芙蓉叶芦丁含量加热回流提取效率的比较含量

53、加热回流提取效率的比较 回流次数回流次数2 2次次3 3次次相对平均偏差相对平均偏差含量含量0.850.850.870.871.2%1.2%比较了加热回流比较了加热回流2 2次和次和3 3次时的含量，及高极性溶剂以考察次时的含量，及高极性溶剂以考察方法的提取效率，结果发现方法的提取效率，结果发现木芙蓉叶芦丁木芙蓉叶芦丁含量用稀乙醇加含量用稀乙醇加热回流热回流2 2次法基本上可以将待测成分都提取出来次法基本上可以将待测成分都提取出来 溶剂溶剂稀乙醇稀乙醇70%70%乙醇乙醇提取效率提取效率含量含量0.850.850.860.8698.8%98.8% 平衡提取效率也可采用不同溶剂不同方法或多次提取

54、平衡提取效率也可采用不同溶剂不同方法或多次提取的方法进行验证。将选定方法测得结果与考察方法测的方法进行验证。将选定方法测得结果与考察方法测得结果进行比较，选定方法的提取效率不得少于得结果进行比较，选定方法的提取效率不得少于95%95%。 提取效率提取效率采用平衡提取法进行中药分析时，可采用规定的溶剂提采用平衡提取法进行中药分析时，可采用规定的溶剂提取后，药渣再以相同体积的溶剂提取若干次，用适宜方取后，药渣再以相同体积的溶剂提取若干次，用适宜方法测定残留量，与规定的方法测定结果相比，相对偏差法测定残留量，与规定的方法测定结果相比，相对偏差应不大于应不大于5%5%养胃颗粒芍药苷含量超声提取效率的比

55、较养胃颗粒芍药苷含量超声提取效率的比较 批号批号超声次数超声次数含量（含量（mg/mg/袋）袋）相对平均偏差相对平均偏差1011011011011 1次次36.636.6-2 2次次35.735.71.2%1.2%* *3 3次次35.735.71.2%1.2%* *比较了超声比较了超声1 1次、次、2 2次和次和3 3次时的含量，以考察方法的次时的含量，以考察方法的提取效率，结果发现药典采用的超声提取效率，结果发现药典采用的超声1 1次法基本上可次法基本上可以将待测成分都提取出来以将待测成分都提取出来 专属性（专属性（SpecificitySpecificity） 一种分析方法缺乏专属性时，

56、可由其他辅助一种分析方法缺乏专属性时，可由其他辅助的分析方法作补充。的分析方法作补充。专属性系指在其他成分可能存在下，采用的方专属性系指在其他成分可能存在下，采用的方法能正确测定出被测成分的特性。鉴别试验、法能正确测定出被测成分的特性。鉴别试验、限量检查、含量测定等方法均应考察其专属性限量检查、含量测定等方法均应考察其专属性 （a）黄连纤维束 （b）吴茱萸非腺毛左金丸显微图左金丸显微图左金丸由黄连和吴茱萸两味中药组成左金丸由黄连和吴茱萸两味中药组成，因，因黄连及吴茱萸黄连及吴茱萸均均有石细胞，故分别用有石细胞，故分别用黄连纤维束黄连纤维束与与吴茱萸非腺毛吴茱萸非腺毛的的 特征作特征作为为显微鉴

57、别显微鉴别1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 111. 空白阴性 26. 供试品7. 枳壳对照药材（中检所，121008-200505） 8.柚皮苷对照品（中检所，111730-200603） 911供试品通乐颗粒中枳壳的薄层色谱鉴别通乐颗粒中枳壳的薄层色谱鉴别 min051015mAU -10010203040 VWD1 A, Wavelength=254 nm (DH-0228YX01.D) m in051015m A U -10010203040 V W D 1 A , W avelength= 254 nm (D H -0228C 11.D ) 11.925 18.163妇乐颗粒

58、大黄含测妇乐颗粒大黄含测HPLCHPLC专属性色谱专属性色谱图图 min05101520mAU -10010203040 VWD1 A, Wavelength=254 nm (DH-0228CD11.D) 11.967 18.224大黄酚、大黄素对照品缺大黄空白样品妇乐颗粒样品专属性验证专属性验证阴性干扰试验阴性干扰试验色谱纯度试验色谱纯度试验易混淆试验易混淆试验 专属性（专属性（SpecificitySpecificity） 如果处方中如果处方中2 2味或味或2 2味以上药味含同一化学成分需要鉴别或味以上药味含同一化学成分需要鉴别或测定，则应分别配制不含各单一味药及均不含这些药味的测定，则应

59、分别配制不含各单一味药及均不含这些药味的溶液作为空白溶液。溶液作为空白溶液。 阴性干扰试验阴性干扰试验 空白阴性样品制备：取不含拟测定药味的群药，按照该药空白阴性样品制备：取不含拟测定药味的群药，按照该药品的制备工艺制成空白阴性样品（注意加入全部辅料），品的制备工艺制成空白阴性样品（注意加入全部辅料），再按拟定的样品制备方法制成空白阴性样品溶液再按拟定的样品制备方法制成空白阴性样品溶液薄层色谱法目测空白阴性样品在与对照品相应的位置上应薄层色谱法目测空白阴性样品在与对照品相应的位置上应不出现相同颜色的斑点不出现相同颜色的斑点其它色谱法（其它色谱法（GC/HPLC/TLCSGC/HPLC/TLCS

60、）空白阴性样品色谱图在相应）空白阴性样品色谱图在相应保留时间（或位置）处应无色谱峰，含量测定若有色谱峰保留时间（或位置）处应无色谱峰，含量测定若有色谱峰出现，一般干扰峰面积应在供试品色谱峰面积出现，一般干扰峰面积应在供试品色谱峰面积5 5以下以下溶剂前沿T: 13 RH：65Merck板（UV365nm）1 2 3 4 5 6 7 89 10 11 1. 缺味 29. 供试品 10.何首乌对照药材 11大黄素对照品溶剂前沿T: 13 RH：65Merck板（氨蒸气熏后）1 2 3 4 5 6 7 89 10 11通乐颗粒何首乌的薄层色谱通乐颗粒何首乌的薄层色谱专属性专属性图图缺补骨脂样品HPL