粪便标本细菌学检验标准操作规程

1、1 目的规范粪便标本细菌学检验标准操作规程，确保检验结果准确可靠。2 适用范围粪便培养。3 标本3.1 标本类型粪便、直肠拭子。3.2 标本采集3.2.1 自然排便采集自然排便后，挑取其脓血、猫液部分23g，液体粪便取絮状物23 ml，盛于灭菌容器内，或置于保存液（运送培养基）、增菌培养基中送检。3.2.2 直肠拭子如不易获得粪便时，或排便困难病人及婴儿，可用直肠拭子采取，即以无菌棉拭用保存液或生理盐水湿润后，插人肛门内45 cm（幼儿23 cm）轻轻转动取出，插人卡布（Cary一Blair）运送培养基内或无菌容器内送检。3.2.3 粪便标本应该立即送检，室温保存不能超过2小时，如不能及时送检

2、可以放人磷酸盐甘油（pH 7.（）或转运培养基，但不能超过24小时。培养艰难梭菌的标本保存于一20以下。培养沙门菌和志贺菌的标本应放置磷酸盐甘油溶液中保存。保存弯曲杆菌和弧菌的标本，需加CaCl2（100mg/l）试剂。3.3 标本拒收标准3.3.1 类便标本放t时间超过2小时。3.3.2 送检的粪便标本混有尿液。3.3.3 直肠拭子未置于运送培养基中。3.4 试剂、仪器3.4.1 兰染液、氧化醉试剂、3触酶、血琼脂平板、巧克力平板、麦康凯平板、相关生化试剂等。3.4.2 革兰阴性菌鉴定药敏卡、革兰阳性菌鉴定药敏卡，有效期及储存条件参见试剂说明书。3.4.3 接种针、接种环、显微镜、孵育箱、C

3、O2培养箱等。细菌鉴定和药敏质控参见质量管理。3.5 诊断血清。4 细菌鉴定和药敏质控 参见质量管理程序。5 检验步骤接收标本后，立即对标本进行编号、登记。5.1 涂片检查粪便标本因各种正常菌群含量甚多，仅以染色性和形态无法分辨是否为病原菌。因此，粪便标本一般不作涂片检查。只有怀疑霍乱弧菌及菌群失调所致腹泻时，才作直接涂片检查（观察动力和菌群比例）。5.2 培养5.2.1 沙门-志贺菌培养参见沙门菌属检验标准操作规程、志贺菌属检验标准操作规程。5.2.2 致病性大肠埃希菌培养参见致病性大肠埃希菌检验标准操作规程。5.2.3 霍乱弧菌培养参见霍乱弧菌检验标准操作规程。5.2.4 副溶血弧菌培养参

4、见副溶血弧菌检验标准操作规程。5.2.5 小肠结肠炎耶尔森菌培养参见耶尔森菌属检验标准操作规程。5.2.6 空肠弯曲菌培养参见弯曲菌属检验标准操作规程。5.2.7 金黄色葡萄球菌培养参见葡萄球菌属检验标准操作规程。5.2.8 艰难梭菌培养取水样或猫液样粪便立即接种于环丝氨酸头抱西丁果糖琼脂（简称CCFA)平板上，并将粪便作102106稀释后定量接种。35厌氧环境下培养48小时后，选择粗糙型黄色菌落，移种于葡萄糖厄肉培养基作毒素测定；同时制涂片，悬滴检查动力、革兰染色及生化鉴定。5.2.9 真菌培养参见分枝杆菌属检验标准操作规程。5.2.10 气单胞菌和邻单胞菌的培养参见气单胞菌属检验标准操作规

5、程和邻单胞菌属检验标准操作规程。5.2.11 结核分枝杆菌培养参见分枝杆菌属检验标准操作规程。6 操作流程7 结果报告8 注意事项查出肠道致病菌，报告其菌名和药敏结果。8.1 空肠弯曲菌是微需氧菌，初次分离时需510CO2和85氮。8.2 痢疾病人要采集大量脓血标本另行培养。8.3 粪便标本有很多杂菌，但不能由此认为粪便标本的采集就无需注意杂菌污染，为防止污染必须注意标本的采集方法。9 临床意义正常情况下肠道中有多种细菌寄生，包括大量的厌氧菌、肠球菌、大肠埃希菌、肠杆菌、变形杆菌、粪产碱杆菌等。引起感染性腹泻的病原微生物有：细菌性：产毒素型腹泻，包括霍乱弧菌、肠毒素型大肠埃希菌等；侵袭型腹泻，包括志贺菌、肠致病型大肠埃希菌和肠侵袭型大肠埃希菌等；食物中毒，包括沙门菌、金黄色葡萄球菌、副溶血性弧菌、蜡样芽胞杆菌和肉毒梭菌等；伪膜性肠炎，包括艰难梭菌或金黄色葡萄球菌；慢性腹泻，可能由结核杆菌引起。真菌性：念珠菌、毛霉菌等。病毒