国产琥乙红霉素组分和有关物质的分析

1、国产琥乙红霉素组分和有关物质的分析         作者：杨亚莉 王晨 王明娟 胡昌勤 【摘要】 目的 考察国产琥乙红霉素原料和制剂的组分和有关物质，为修订中国药典2005年版琥乙红霉素质量标准提供依据。方法 采用美国药典30版收载的HPLC法测定6个厂家的红霉素原料、琥乙红霉素原料和制剂共16批样品的组分和有关物质，                

2、0;           作者：杨亚莉 王晨 王明娟 胡昌勤【摘要】  目的 考察国产琥乙红霉素原料和制剂的组分和有关物质，为修订中国药典2005年版琥乙红霉素质量标准提供依据。方法 采用美国药典30版收载的HPLC法测定6个厂家的红霉素原料、琥乙红霉素原料和制剂共16批样品的组分和有关物质，并采用欧洲药典5.0版收载的方法测定琥乙红霉素样品中游离红霉素的含量。结果 国产红霉素以红霉素A为主组分，含有少量的红霉素B、红霉素C和红霉素E组分，有关物质主要为脱水红霉素A，其它有关物质含量较

3、少。以红霉素为原料合成的琥乙红霉素中的主要有关物质为游离红霉素。结论 建议将中国药典2005版琥乙红霉素有关物质的薄层色谱法修订为高效液相色谱法，便于更好地控制产品质量。 【关键词】  琥乙红霉素； HPLC； 组分和有关物质； 游离红霉素    ABSTRACT  Objective  To investigate the related substances profiles of the domestic erythromycin ethylsuccinate bulk material and preparation, and

4、 provide data for the monograph of erythromycin ethylsuccinate in the Chinese Pharmacopoeia 2005.  Method  The ingredient and the related substances of totally 16 batches of erythromycin ethylsuccinate bulk material and preparation of 6 manufacturers were determined using the HPLC method o

5、f USP 30, and the erythromycin free base were determined using the method of EP 5.0. Results  The major ingredient of domestic erythromycin was erythromycin A and there were minor amount of erythromycin B, C and E. The main related substances was anhydroerythromycin A and the content of other i

6、mpurities were relatively small. The major related substances of erythromycin ethylsuccinate synthesized by using erythromycin as starting material was erythromycin free base.  Conclusion  To ensure better quality control for the products, it is recommended that the TLC method involved in

7、the Chinese Pharmacopoeia 2005 to determine the related substances of erythromycin ethylsuccinate to be replaced by the HPLC method.    KEY WORDS  Erythromycin ethylsuccinate;  HPLC;  Related substances;  Erythromycin free base    琥乙红霉素是以红霉素为原料合成的琥珀酸

8、乙酯衍生物，其组分和有关物质与红霉素原料中的组分和有关物质及厂家的生产工艺密切相关。琥乙红霉素质量标准在中国药典2005版1、美国药典30版2和欧洲药典5.0版3均有收载，中国药典2005版系采用薄层色谱法测定有关物质，对琥乙红霉素各组分及有关物质的定性和定量结果均比较差。USP30版和欧洲药典5.0版则采用HPLC法进行定量测定。USP30版采用杂质对照品对已知杂质进行定量，控制红霉素A烯醇醚不得超过3.0%，N去甲基红霉素A不得超过3.0%，任意单个杂质不得超过3.0%；欧洲药典则采用相对保留时间确定各组分及已知杂质，控制任意单个杂质不得超过3.0%，总杂质不得超过5.0%，并对合成工艺和

9、贮藏条件下产生的游离红霉素进行了限度要求。目前国内对琥乙红霉素有关物质的研究较多46，但大多仅限于对单个游离红霉素的测定或有关物质总量的测定，对琥乙红霉素组分及各有关物质未作系统研究。本文参考USP30版和欧洲药典5.0版的标准，对国内6个厂家的琥乙红霉素原料及其制剂的组分和有关物质及游离红霉素进行了定性和定量测定，为了解国内琥乙红霉素产品质量和修订中国药典2005版标准提供依据。    1  仪器与试药    液相色谱仪采用Shimadzu高效液相色谱仪(LC20AT泵、SPDM20A检测器、SIL20AC自动进样系统)，

10、Shimadzu LC Solution色谱工作站。    红霉素对照品(LOT 24200M)、红霉素B对照品(LOT G1C080)、红霉素C对照品(LOT 24202F3)、N去甲基红霉素A对照品(LOT 24202F2)购自美国药典委员会，叔丁醇、乙腈、甲醇为色谱纯，水为双蒸水。    2  实验方法    2.1  溶液的制备    (1)有关物质测定    对照品溶液  取50mg红霉素对照品，精密称定，

11、置25ml容量瓶中，加甲醇12.5ml，振摇使溶解，用水解液磷酸氢二钾(2到100)，用磷酸调pH为8.0稀释至刻度，摇匀。    对照品溶液  分别取红霉素B对照品和红霉素C对照品各5mg，精密称定，置50ml容量瓶中，加甲醇25ml，振摇使溶解，加对照品溶液2.5ml，用水解液稀释至刻度，摇匀。    系统适用性溶液  取2mg N去甲基红霉素A对照品，加至20ml对照品溶液，混匀。    红霉素A烯醇醚溶液  取红霉素USP对照品10mg，加甲醇2ml溶解，加pH3.5

12、磷酸盐缓冲液20ml，放置30min后使用。    供试品溶液  精密称取红霉素约100mg，置50ml容量瓶中，加甲醇至刻度。    供试品溶液  精密称取琥乙红霉素约115mg(制剂按标示量计算取相当量细粉)，置50ml容量瓶中，加甲醇25ml，振摇使溶解，加水解液20ml，混匀，在室温放置12h使水解，用水解液稀释至刻度，立即进样。    (2)游离红霉素测定    对照品溶液  取红霉素对照品(中国药品生物制品检定所，1303072002

13、15，红霉素A92.3%，红霉素B0.9%，红霉素C1.2%)约16mg，至50ml容量瓶中，加流动相至刻度(立即使用)。    样品溶液的制备  称取琥乙红霉素约125mg(制剂按标示量计算取相当量细粉)，置25ml容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，立即进样。    2.2  试验条件    (1)有关物质  色谱柱为Polymer Laboratories 1000A(250mm×4.6mm，8m)，S/N：8MRPS10436A38；流动相为pH8.0缓冲液50ml，加400ml水，加175ml叔丁醇和30ml乙腈，用