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文档简介
1、翻译的过程翻译的过程包扩肽链合成的起始,延伸和终止。原核生物肽链合成的起始 (1)核糖体30S小亚基附着于mRNA起始信号部位。 原核生物中每个mRNA都具有其核糖体结合位点,他是位于AUG上游813个核苷酸处有一段富含嘌呤核苷酸的序列,即是SD序列。先形成IF3-30S亚基-mRNA三元复合物。 (2)30S前起始复合物的形成。 在起始因子IF2的作用下,fMet-tRNAFMET与mRNA分子中的AUG相结合,即密码子与反密码子配对,同时IF3从三元复合物中脱落。形成30S前起始复合物。即IF2-30S亚基-mRNA-fMet-tRNAfmet 复合物。需要GTP和MG2+参与。 (3)7
2、0S起始复合物的形成 50亚基与上述懂得30S结合,同时IF2脱落,形成70S复合物,此时fMet-tRNAFMET占据着50S亚基的钛酰位(P位或给位)。而50S的氨基酰位(A位或受位)暂时为空位。有待于对应mRNA中第二个密码的相应氨基酰tRNA进入,从而进入延长阶段。选择起始密码SD顺序的作用:mRNA上的起始密码常为AUG,少数为GUG,确定起始部位:一是mRNA的5端SD序列与16S的rRNA3端序列的配对,二是mRNA上的起始密码与fMet-tRNAFMET的反密码子的配对。真核细胞的蛋白质合成的起始 (1)43S前起始物的形成 (2)形成48S的起始复合物的形成 (3)形成80S
3、起始复合物。真核与原核的起始不同之处 1真核起始氨基酸是甲硫氨酸,不是N-甲酰甲硫氨酸。 2真核的起始密码总是AUG 3真核有更多的起始因子,作用更复杂。图 4 ATP水解为ADP提供能量,对于mRNA的结合是必须的。 5mRNA5端帽的存在对于起始是需要的 6fMet-tRNAFMET与40S亚基的结合先于与mRNA的结合。进位 2 成肽 当进位后,P位和A位上各结合了一个氨基酰-tRNA,两个氨基酸之间在肽基转移酶作用下,P位上的氨基酸提供阿尔法-COOH基,与A位上的氨基酸的-NH2形成第一个肽键,从而使P位上的氨基酸链接到A位氨基酸的氨基上,这就是转肽。转肽后,在A位上形成了一个二肽酰
4、-tRNA。此步需要MG和K存在。肽基转移酶的组分位50S大亚基上的23SrRNA和5种蛋白质。肽链的延伸 原核生物肽链的延伸需要有70S的起始复合物,氨酰-tRNA,三种延伸因子,以及GTP和MG.三种延伸因子是;热不稳定的EF-Tu,热稳定的ET-Ts,和依赖于GTP的EF-G.在多肽链上每增加一个氨基酸都需要经过进位,转肽,和移位三步。 1进位 在70S起始复合物形成过程中,核糖核蛋白体的P位上已结合了起始型甲酰蛋氨酸tRNA,起始复合物形成以后,EF-Tu先与GTP结合,然后再与氨基酰-tRNA结合成三元复合物,这样三元复合物才能进入A位。此时GTP水解成GDP,EF-Tu-GDP与结
5、合在A位上的氨基酰tRNA分离。释放的EF-Tu-GDP再与EF-Ts和GTP反应重新生成EF-Tu-GTP,并参与下一轮反应。转肽 3 移位 转肽作用发生后,氨基酸都位于A位,P位上是无负荷氨基酸的tRNA.移位因子EF-G和GDP结合到核糖体上,有核糖体具有GTPase活性的某一组分将GTP水解,促进核糖体沿mRNA的5-3方向移动。每次移动一个密码子的距离。移位的结果使原来在A位的肽基-tRNA转移到P位,而A位空出。可以接受下一个性的氨基酰-tRNA的进入。原来在P位的无负载的tRNA被移到E位。移动过程需要GTP提供能量,以后,肽链上的每增加一个氨基酸残基,即重复进位,转肽,移位的循
6、环。延长过程没重复一次,肽链就延伸一个氨基酸残基。实验证明mRNA上的信息阅读是从5端-3端进行,而肽链的延伸是从氨基端到羧基端。移位 移位的机制不清,但延伸和移位是两个分离的独立过程。 真核和原核肽链的延长,主要是延长因子体系部同(图)肽链合成的终止于释放无论原核还是真核都有三种终止密码:UAG UAA和UGA。当核糖体移动到终止密码处时,没有相应的氨酰-tRNA能结合在A位,因为细胞中没有一个tRNA能够与终止密码作用,而是靠特殊的蛋白质因子促成终止作用,这类因子称为终止因子,原核生物油三种:RF1,RF2,RF3.RF1可以识别终止密码UAA和UAG,并结合。RF2可以识别终止密码UAA和UGA,并结合。真核只有一种:eRF,可以识别三种终止密码。 不管是真核还是原核,释放因子都作用于A位,由于他们作用使P位上的肽基转移酶发生变构作用,催化活性变为水解酶活性。从而使肽基,不再转移到氨基-tRNA上,而转给谁分子,以合成的多肽链由于肽基-tRNA的水解,而从核
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