如何开展比对实验(1)

1、编辑课件如何开展比对实验如何开展比对实验2011.1.6编辑课件学习和讨论要点定义和术语定义和术语有关文件的规定和细则有关文件的规定和细则比对试验设计方案要点比对试验设计方案要点不同检测系统检验结果可比性的评估不同检测系统检验结果可比性的评估编辑课件术语和定义检测系统：检测系统：完成一个检测项目所需要的仪器、完成一个检测项目所需要的仪器、试剂、校准品、质控品、操作程序等的组合。试剂、校准品、质控品、操作程序等的组合。 若是手工操作，还必须包括具体的操作人员。若是手工操作，还必须包括具体的操作人员。配套检测系统：配套检测系统：整个检测系统由同一厂商或仪整个检测系统由同一厂商或仪器的指定厂商提供并

2、配套使用，若该系统经器的指定厂商提供并配套使用，若该系统经FDAFDA认可认可, ,使用这样的检测系统对病人标本进行检验，使用这样的检测系统对病人标本进行检验，其结果具其结果具溯源性溯源性。 自建检测系统：自建检测系统：实验室根据自己的意愿自行建实验室根据自己的意愿自行建立的检测系统，其检验结果往往不可溯源，不立的检测系统，其检验结果往往不可溯源，不同检测系统间缺乏可比性。同检测系统间缺乏可比性。编辑课件检测系统检测系统仪器仪器试剂试剂校准品校准品编辑课件溯源性和可比性溯源性溯源性: :通过一条具有规定不确定度的不通过一条具有规定不确定度的不间断的间断的比较链比较链，使测量结果或测量标准，使测

3、量结果或测量标准的值能够与规定的参考标准，通常是与的值能够与规定的参考标准，通常是与国家标准或国际标准联系起来的特性。国家标准或国际标准联系起来的特性。可比性可比性: :不同检测系统或不同检验方法对不同检测系统或不同检验方法对一批病人标本测定结果的一致程度。一批病人标本测定结果的一致程度。两者关系：两者关系：溯源性是可比性的基础，可溯源性是可比性的基础，可比性是溯源性的目标。追求检验结果的比性是溯源性的目标。追求检验结果的可比性是最大的质量。可比性是最大的质量。编辑课件比对试验If the laboratory uses more than one instrument to test for

4、 a given analyte, are the instruments checked against each other at least twice a year for correlation of patient/client results? 实实验验室室使使用用一一台台以以上上的的仪仪器器进进行行同同一一试试验，验，须须每每年年至至少少进进行行两两次次病病人人结结果果的的比比对对编辑课件有关文件的规定和细则有关文件的规定和细则编辑课件C CL LS SI INNC CC CL LS SE EP PCLSI是美国【临床实验室标准化协会】的英文是美国【临床实验室标准化协会】的英文

5、缩写，英文名为缩写，英文名为Clinical and Laboratory Standards Institute。 CLSI前身是前身是NCCLS【美国临床实验室标准化委【美国临床实验室标准化委员会】，英文名称为员会】，英文名称为National committee for clinical laboratory。美国临床实验室标准化。美国临床实验室标准化委员会（委员会（NCCLS）编辑课件EP9-A2CLSI文文件件EP9-A2（用用患患者者标标本本进进行行方方法法比比对对及及偏偏倚倚评评估；估；批批准准指指南南-第第二二版）版）是是为为实实验验室室人人员员和和生生产产厂厂商商制制定定的。

6、的。 它它叙叙述述了了测测定定两两种种方方法法之之间间相相对对偏偏倚倚的的程程序，序，也也叙叙述述了了采采用用一一分分为为二二的的患患者者样样本本设设计计方方法法比比对对试试验验时时所所需需要要考考虑虑的的因因素。素。 编辑课件C CL LS SI I文文件件E EP P9 9- -A A2 2 此文件为临床实验室用户和制造商提此文件为临床实验室用户和制造商提供了设计一个评价实验的指南，用于供了设计一个评价实验的指南，用于评价测定同一被测物的两种方法之间评价测定同一被测物的两种方法之间的偏倚。的偏倚。理想情况下，待评方法（或候选方法）理想情况下，待评方法（或候选方法）应该与参考方法相比较。应该

7、与参考方法相比较。编辑课件C CL LS SI I文文件件E EP P9 9- -A A2 2本本指指南南便便于于估估计计两两种种方方法法在在不不同同样样本本浓浓度度下下的的偏偏倚倚（预预期期的的差差异）异）。如如果果参参较较方方法法同同厂厂家家使使用用的的方方法法相相同，同，那那么么就就可可以以把把实实验验结结果果与与厂厂家家的的声声明明进进行行统统计计学学比比较，较，以以确确定定性性能能是是否否可可以以接接受。受。编辑课件C CL LS SI I文文件件E EP P9 9- -A A2 21.1 比比对对试试验验概概述述评评价价一一个个分分析析方方法法需需要要以以下下条条件：件：操操作作者

8、者有有足足够够的的时时间间熟熟悉悉仪仪器器操操作作及及保保养养程程序；序；操操作作者者有有足足够够的的时时间间熟熟悉悉评评价价方方案；案；在在评评价价实实验验过过程程中，中，待待评评方方法法及及参参比比方方法法必必须须保保证证有有适适当当的的质质量量控控制；制；待待评评方方法法及及参参比比方方法法必必须须有有足足够够的的数数据据以以保保证证结结果果具具有有代代表表性性（需需要要多多少少数数据据取取决决于于两两种种方方法法的的精精密密度度和和干干扰扰作作用，用，两两方方法法间间的的偏偏倚倚大大小，小，样样本本分分析析物物数数据据的的范范围围及及检检测测的的医医学学要要求）求）。编辑课件C CL

9、LS SI I文文件件E EP P9 9- -A A2 2在在熟熟悉悉仪仪器器操操作作过过程程中，中，待待评评和和参参评评方方法法的的操操作作者者必必须须掌掌握握仪仪器器安安装、装、操操作、作、维维护、护、故故障障排排除除及及两两个个方方法法的的质质量量控控制制的的所所有有方方面。面。此此过过程程可可以以在在其其他他评评价价工工作作之之前前或或与与仪仪器器厂厂商商培培训训阶阶段段同同时时进进行。行。两两种种方方法法都都要要进进行行实实验验室室的的常常规规质质量量控控制。制。编辑课件C CL LS SI I文文件件E EP P9 9- -A A2 2在在熟熟悉悉过过程程后，后，方方法法比比对对实

10、实验验即即可可开开始。始。工工作作组组建建议议在在至至少少5个个工工作作日日内内最最少少要要分分析析完完40个个患患者者样样本。本。在在遵遵循循厂厂家家的的推推荐荐进进行行校校准准的的条条件件下，下，增增加加测测定定样样本本数数及及测测定定天天数，数，可可以以提提高高实实验验的的可可靠靠性性及及有有效效性。性。编辑课件CLSI文文件件EP9-A2用用待待评评方方法法和和参参比比方方法法对对每每一一患患者者样样本本各各作作两两份份测测定。定。分分析析每每一一方方法法在在同同一一批批内内的的双双份份测测定定结结果。果。应应尽尽可可能能使使至至少少50样样本本的的测测定定结结果果处处于于实实验验室室

11、的的参参考考区区间间之之外。外。编辑课件C CL LS SI I文文件件E EP P9 9- -A A2 2实实验验结结束束后，后，合合理理记记录录数数据据（如如附附录录所所建建议议的）的）。数数据据作作图图并并目目测测或或统统计计学学方方法法评评价价图图的的相相对对线线性、性、足足够够范范围围和和离离散散的的均均匀匀性。性。根根据据数数据据的的检检查查结结果，果，使使用用简简单单的的线线性性回回归归或或用用其其他他方方法法估估计计在在医医学学决决定定水水平平处处的的预预期期偏偏倚倚的的可可信信区区间。间。然然后后把把此此评评价价结结果果与与厂厂家家声声明明或或内内部部标标准准进进行行比比较较

12、以以判判断断方方法法是是否否可可以以接接受。受。编辑课件医医疗疗机机构构临临床床实实验验室室管管理理办办法法新旧批号试剂对比验证新旧批号试剂对比验证同一项目不同分析系统结果比对评估同一项目不同分析系统结果比对评估编辑课件同一项目不同分析系统结果比对评估同一项目不同分析系统结果比对评估管理办法管理办法中规定：实验室内采用不同方法或仪器检验中规定：实验室内采用不同方法或仪器检验同一项目至少半年进行一次比对，样本至少同一项目至少半年进行一次比对，样本至少20份份具体试验方法同方法学比对实验。具体试验方法同方法学比对实验。比对结果不好应及时解决比对结果不好应及时解决考虑不同方法线性考虑不同方法线性参数

13、可调参数可调 Y=bX+a参数调整后重新比对参数调整后重新比对编辑课件ISO15189编辑课件I IS SOO1 15 51 18 89 9根根据据 ISO15189 临临床床实实验验室室质质量量保保证证之之内内审审要要求求 ,在在同同一一实实验验室室使使用用两两种种以以上上型型号号的的分分析析仪仪时时 ,应应当当进进行行比比对对试试验。验。在在卫卫生生部部的的医医院院管管理理年年检检查查中中 ,明明确确提提出出比比对对试试验验的的重重要要性。性。编辑课件5.6.6 5.6.6 当当同样的检验同样的检验应用应用不同程序或设备不同程序或设备，或在，或在不同地点不同地点进行，或以上各项均不同时，应

14、有确切进行，或以上各项均不同时，应有确切机制以验证在整个临床适用区间内机制以验证在整个临床适用区间内检验结果的可检验结果的可比性。比性。应按适合于程序和设备特性的规定周期验应按适合于程序和设备特性的规定周期验证。证。5.6.7 5.6.7 实验室应文件化并记录比对活动，只要适实验室应文件化并记录比对活动，只要适用，针对其结果迅速采取措施。对识别出的问题用，针对其结果迅速采取措施。对识别出的问题或不足应采取措施并保留记录。或不足应采取措施并保留记录。5.6 检验程序的质量保证检验程序的质量保证编辑课件CLIA88CLIA88编辑课件CLIA884、化化验验结结果果的的比比较较 如如果果实实验验室

15、室对对某某一一项项目目的的测测定定采采用用两两种种相相似似的的方方法，法，则则所所在在组组室室的的负负责责人人必必须须每每年年两两次次对对有有关关的的化化验验结结果果进进行行比比较较工工作，作，步步骤骤如如下：下： 一、一、选选择择适适当当数数量量的的标标本本 二、二、确确定定可可接接受受的的标标准准 三、三、进进行行两两种种方方法法测测定定结结果果的的比比较，较，如如达达不不到到标标 准，准，要要有有解解决决措措施施 四、四、记记录录全全过过程，程，并并保保存存两两年年编辑课件海军总医院检验科 程序文件程序文件 海军总医院检验科 程序文件程序文件 检验科内部比对程序检验科内部比对程序 文件编

16、号：LAB-PF-027 页码：第 1 页，共 3 页 版本：A/0 生效日期：2009-01-01 1 目的目的 建立和实施实验室内部比对计划和程序，以确保实验室内部应用不同的程序或设备，或在不同地点进行，或以上各项均不同时,同一项目的检验结果具有可比性。 2 范围范围 适用于检验科实验室应用不同的检测系统，或同一检测系统在不同地点进行，或以上各项均不同时同一检验项目（主要是指常规生化、血细胞计数、凝血分析等定量检测项目）之间的比对。 3 职责职责 3.1 检验科质量管理层负责组织讨论并确定比对方案的实施计划，准备实验材料等，检验科主任负责审批，并确保比对计划按时进行。 3.2 质量主管具体

17、负责比对计划的实施以及不具有可比性项目的整改。 3.3 各专业组组长负责比对试验的实施和全过程质量监督。 3.4 相关检验人员负责实验室内部质量控制、仪器设备的维护与保养，并完成标本的检测和上报。 4 比对计划比对计划 4.1 标准比对方案：原则上常规生化项目、血细胞计数、凝血三项三地实验室之间的比对每年进行一次。其他项目视具体情况每 12 年进行一次。 4.2 简化比对方案：随卫生部检验中心发放的标本同时进行。 5 工作程工作程序序 5.1 标准比对方案 5.1.1 检验人员有足够的时间熟悉检测系统的各个环节，熟悉评价方案。 5.1.2 在整个实验中，保持实验方法和比较方法都处于完整的质量控

18、制之下，始终对实验结果有校准措施。 5.1.3 实验时间至少做 5 天，时间长一些更好，可以客观反映实际情况。 5.1.4 至少做 40 份病人标本，多一点更好。 5.1.5 尽可能使 50%的实验标本分析物的含量不在参考区间内，各个标本分析物含量越宽越好。 5.1.6 不要使用对任一方法有干扰的标本。 5.1.7 每份标本应有足够的量，以便使实验方法和比较方法都能做双份测定；一份标本不够时可将含量相近的二份标本混合，不能多于二份。 5.1.8 将标本按 1、2、3、4、5、6、7、8 顺序排列先测一遍，然后将顺序倒过来做双份第二次测定。 5.1.9 应在 2 个小时内两种方法对同批标本分别开

19、始实验，最好使用当天采集的标本。 5.1.10 有比对活动的原始数据以及采取的纠正措施均应记录并归档保存。 海军总医院检验科海军总医院检验科 检验科内部比对试验结果记录及分析报告表检验科内部比对试验结果记录及分析报告表 部门： 仪器名称： 仪器编号： 表格编号：LAB-PF-027-01 比对部门： 比对仪器： 仪器编号： 日期 标本编号 比对 项目 本室 结果 测定人 比对 结果 测定人 绝对 偏差 相对 偏差 允许 误差 可接受 性能 备注 可否 可否 可否 可否 可否 可否 可否 可否 可否 可否 可否 可否 可否 可否 可否 可否 可否 可否 可否 可否 可否 可否 可否 纠正措施（不

20、可接受时） ： 操作者： 日 期： 年 月 日 审核意见： 审核者： 日 期： 年 月 日 编辑课件比对试验设计方案要点比对试验设计方案要点编辑课件比比对对计计划划 标标准准比比对对方方案：案：原原则则上上常常规规生生化化项项目、目、血血细细胞胞计计数、数、凝凝血血三三项项三三地地实实验验室室之之间间的的比比对对每每年年进进行行一一次次。其其他他项项目目视视具具体体情情况况每每12年年进进行行一一次。次。 编辑课件比对试验设计方案要点1. 1. 各各种种仪仪器器处处于于良良好好的的工工作作状状态，态，严严格格按按S SO OP P操操作。作。2. 2. 检检验验人人员员有有足足够够的的时时间间

21、熟熟悉悉检检测测系系统统的的各各个个环环节，节，熟熟悉悉评评价价方方案。案。3. 3. 在在整整个个实实验验中，中，保保持持实实验验方方法法和和比比较较方方法法都都处处于于完完整整的的质质量量控控制制之之下，下，始始终终对对实实验验结结果果有有校校准准措措施。施。4. 4. 实实验验时时间间至至少少做做5 5天，天，时时间间长长一一些些更更好，好，可可以以客客观观反反映映实实际际情情况况。编辑课件比对试验设计方案要点5. 5. 至至少少做做4 40 0份份病病人人标标本本，多多一一点点更更好。好。6. 6. 尽尽可可能能使使5 50 0% %的的实实验验标标本本分分析析物物的的含含量量不不在在

22、参参考考区区间间内，内，各各个个标标本本分分析析物物含含量量越越宽宽越越好。好。7. 7. 不不要要使使用用对对任任一一方方法法有有干干扰扰的的标标本本。8. 8. 每每份份标标本本应应有有足足够够的的量，量，以以便便使使实实验验方方法法和和比比较较方方法法都都能能做做双双份份测测定。定。编辑课件比对试验设计方案要点9. 9. 将将标标本本按按1 1、2 2、3 3、4 4、5 5、6 6、7 7、8 8顺顺序序 排排列列先先测测一一遍，遍，然然后后将将顺顺序序倒倒过过来来做做双双份份第第二二次次测测定。定。1 10. 0. 应应在在2 2个个小小时时内内两两种种方方法法对对同同批批标标本本分

23、分别别开开始始实实验，验，最最好好使使用用当当天天采采集集的的标标本。本。编辑课件实实验验样样本本要要求：求：l来源于健康人或患者，无干扰，尽量避免来源于健康人或患者，无干扰，尽量避免储存；储存；l测定物浓度范围在检测线性范围内较均匀测定物浓度范围在检测线性范围内较均匀分布；分布；l样本数至少样本数至少40例（确认），增加数量能提例（确认），增加数量能提高可信性高可信性编辑课件参参比比方方法法 ：实验室当前使用的方法，生产厂家声明的实验室当前使用的方法，生产厂家声明的方法和公认的参考方法都可作为参比方法。方法和公认的参考方法都可作为参比方法。编辑课件参参比比方方法法应应该该做做到到如如下下几几

24、点：点：具有比待评方法更好的精密度；具有比待评方法更好的精密度；可能的情况下，不受已知干扰物质的干扰；可能的情况下，不受已知干扰物质的干扰；使用与待评方法相同的单位；使用与待评方法相同的单位；可能的情况下，与标准品或参考方法有已知可能的情况下，与标准品或参考方法有已知的相对偏倚（可溯源）。的相对偏倚（可溯源）。编辑课件具具体体操操作：作：测定方法：测定方法：每天分别用两种方法进行测定，每天分别用两种方法进行测定， 测定顺序：测定顺序：1、2、3、4、5、6、7、88、7、6、5、4、3、2、1编辑课件 测测定定次次数：数： 至至少少测测定定5天，天，共共40个个样样本，本，160个个测测试试编

25、辑课件12XX12XX12YY编辑课件复复杂杂的的后后期期数数据据处处理理同种方法内离群值检查（参考方法和待评方同种方法内离群值检查（参考方法和待评方法）法）两种方法间离群值检查两种方法间离群值检查绘制散点图、偏倚图绘制散点图、偏倚图回归分析回归分析检查范围是否足够（检查范围是否足够（r0.975）得出回归方程得出回归方程决定水平的预期偏倚与允许总偏差比较决定水平的预期偏倚与允许总偏差比较有文献认为预期偏倚应有文献认为预期偏倚应1/2TEa编辑课件编辑课件编辑课件实验数据的收集、处理和应用1. 不不采采用用已已明明确确有有人人为为误误差差的的结结果。果。2. 记记录录实实验验结结果。果。若若两

26、两方方法法结结果果的的差差值值大大于于任任一一方方法法的的批批内内不不精精密密度度时，时，应应查查对对标标本，本，并并重重新新实实验。验。若若找找不不出出原原因，因，应应保保留留数数据据备备考。考。3. 整整个个实实验验必必须须有有室室内内质质量量控控制，制，失失控控时时必必须须重重做。做。编辑课件实验数据的收集、处理和应用4.4.检检查查每每一一方方法法内内双双份份测测定定值值有有无无离离群群表表现。现。以以4 4倍倍的的各各方方法法差差值值的的均均值值为为判判断断限，限，各各方方法法内内的的成成对对差差值值都都应应在在限限值值内，内，说说明明双双份份测测定定结结果果符符合合要要求。求。5.

27、5.将将实实验验结结果果点点画画于于X X、Y Y座座标标纸纸上，上，图图中中标标出出斜斜率率为为1 1通通过过零零点点的的直直线，线，看看图图了了解解有有无无线线性性关关系，系，有有无无明明显显离离群群点。点。编辑课件实验数据的收集、处理和应用6.6.检检查查X X、Y Y关关系系实实验验点点有有无无离离群群表表现：现：先先看看图图有有无无明明显显离离群群点。点。若若有，有，应应对对X X、Y Y配配对对值值作作离离群群值值计计算。算。以以4 4倍倍的的平平均均差差值值为为判判断断限，限，所所有有差差值值都都不不应应超超出出限限值。值。7.7.检检查查标标本本内内分分析析物物含含量量分分布布

28、是是否否适适当：当：影影响响r r的的因因素素一一是是实实验验点点和和回回归归线线的的离离散散程程度，度，一一是是分分析析物物含含量量分分布布宽宽度。度。一一般般要要求求r r0.0.9 97 75 5或或r r2 20.0.9 95 5，认认为为X X范范围围是是合合适适的的 ( (图图1 1) )。编辑课件编辑课件实验数据的收集、处理和应用8.8.线线性性回回归归统统计：计： = =b bX X+ +a a b b和和a a分分别别表表示示两两种种方方法法间间的的比比例例误误差差和和恒恒定定误误差。差。 根根据据临临床床使使用用要要求，求，可可在在各各个个临临床床决决定定水水平平浓浓度度X Xc c处，处，了了解解Y Y方方法法引引入入后后相相对对于于X X方方法法的的系系统统误误差差（S SE E）。 S SE E= =? Y Yc c- -X Xc c ?编辑课件实验数据的收集、处理和应用9.9.以方法学比较评估的系统误差（以方法学比较评估的系统误差（SESE）1/2CLIA 1/2CLIA 8888允许误差或根据生物学变异设定的