弧菌属Vibriopacini的检验

1、弧菌属Vibrio pacini的检验c II拿羊:SE 机卸;福也工，刁¥柱羊 R 舌'引E.7Sq-it <> t舌L 曲1、菌体大小与形态:G-,菌体短小，直或弯杆菌（卩m x 卩m）,以1根或几根极生鞭毛运动， 无荚膜， 无芽孢。2、培养特性与代谢特征：多数在普通培养基上生长良好；兼性厌氧，具呼吸和发酵两种代谢类型。所有的种可在25 C 生长，多数在30C生长。pH值。Na+刺激所有种生 长，并且为多数种所必需。氧化酶阳性。不产色或产黄色。可代谢 D-葡萄糖和其他碳 水化合物，产酸不产气。还原硝酸盐 （产气弧菌、梅氏弧菌 和病海鱼弧菌除外）。多数种发酵麦芽

2、糖、甘露糖和海藻糖。 多数对弧菌抑制剂 0/129敏感。1、生态特性：发现于各种盐度的水生生境，最常见于海、海岸、海面和海生动物的消化道，有的在淡水中也有发现。有的是人病原菌，有的对海洋脊椎和无脊椎动物致病。最重要的人病原菌：霍乱弧菌(V.cholerea)可引起霍乱；副溶血弧菌（V.parahaemolyticus）污染过的鱼和贝类引起人食物中毒；创伤弧菌（V.vulnificus ）可引起高致死性的败血症。临床意义（临床表现）剧烈上吐卜泻，严电脱水、酸中奇、痉挛、屎闭、休克、死t':jlj 1r* w. J| fl* 1Zu_JA 1fcasl jll J -fJr lllC zw

3、ri/Ar?夕卜Wd tTfi企霄苹萄郴» 刈 引氐歯拥JffcU齐U W 王些霸zJ曲C在无斎KH寸不倉邑尘长酣於 C K zzfnz Wr 夕卜 FH 十生i发欝菊萄柄求寸弧1對抑需U齐破？感fH物株刘n耆钛凿 C在无戕:H寸不肓巨壬工弧菌检验方法：1）初步腕足：与O1群和029群抗血沽多价和单价）凝 集，歯落和歯体艰态、氧化酚试验等作出初步报吿。2）最股鉴定二根捌纯培养后金面生化反应.血消学分群及分型。(一)霍乱弧菌(V. cholerae )分型：H前-常用的° * .忙!方法有1frij &埠丄些111 il J f*zx jfy /1 鸣h *生物#和0

4、-丁 j tt jr |rT 11f=t,T_4 IEi 1 平 Tj UiK血消学分吃根捺H抗脈利<J抗原分型> H抗原为共同抗原*特并性低：O抗原兵有群特异性和型特异性, 是乂 ch/erae分群和分型的基础>根拥O抗原的不R * K cholerae现分为155亍血诂椰.It中仅01 群和O139APJI起祀乱* 02O1轴血消群可引起人类的円肠炎, 不引起霍乱流行> K cholerae O/的O抗原由A、B . C三种抗原成分组成*其中A是 oittr的押特并性抗原*通过三种抗原成分的不冋纽合可分成3个 型：AB构成小川型.AC构成稻叶型* AUC构成彦岛型霍

5、乱弧菌血清学分型出否与O!抗血清凝集O1群0139 群非O1群根据O抗康组成不同稻叶型 (lnaba>小川型 (Ogawa)彦隔型 (Hikojitnu)(<>1 群ACABABC生物学性状：革兰阴性 弯曲弧形或逗点状，首尾相接鱼群样平行排列单端极鞭毛，有普通菌毛和性菌毛悬滴观察：细菌运动，非常活泼，呈穿梭样或流星状。培养特性：> pH 6. 810. 2 耐碱拍酸）>初次分离川PH& 5碱性赍白籐水A 经46h液体衣面大最繁殖，形威菌離选样性培养甚> TCBS <硫彳弋硫酸誌-枸楼酸撒-儲-應WO琼牙旨平板> 含亚砖酸钾的培养基* XX

6、洗琼脂 庆大裤素琼脂El Tor尘物型在血平板上帀形成R -溶血霍乱弧菌在TCBS琼脂平板上形成发酵廉糖的较大的黄色曲落霍乱弧菌检验方法：鉴别试验；霍乱红试验、粘丝试验、0/129敏感试验、鸡红细胞凝集试验、多粘菌素 B敏感试验、噬菌体裂解试验、耐盐 培养试验霍乱红试验：K Ms辰皿吕在含朋i酸盘的苗门H加水中培养H寸. 能分解培养垒中的色氮険产生叼I味同时，将硝酸話还原威为亚硝繼銘两种产物结合空威亚硝梭旳I味" 滴加浓硫梭后呈现酱薇色P为崔乱红试验阳性*但该试滋lb K 济 协祥他屣分瞬色或利还JK4硝棱盐的細凿均能发生阳性反应 粘丝试验: 将（k5% 去氧胆酸钠水溶液与乂 &qu

7、ot;2沧“甘昆匀血浓恳液夕 lmm内悬液由混变泞h 并变得粘稠.以接种环挑取时有 粘丝形成弧閑居细 閑除 K para haem f>lyticus部分 閑株夕卜* 均有此反、0/129敏感试验0/1292« 4-Diamino-6 r 7-Diisopropylpteridiiie2, 4-二抵基_G 7-丙垒嗥症卜将0/129及150-（5的紙贴在接种冇待测産j的琼月旨平板上，35X7WVJ lH-24h® ,纸片阀围出现任何大小的抑闘 圈均为敏!磴 01 君羊利-101 群 K <rhJSj 敏感但己育对O八29耐药的苗株田现，用此试聆作強足肘需 谍慎鸡

8、红细胞凝集试验任泞f净的玻片上商力II生理占丘水1渝，I&L1H-24 11的細閔余斗1阪 培养物与生理盐水混匀型浓厚萌悬液加入用尘理航水洗涤3次的2佔 新鲜鸡红细胞誌水恐液一 満,死分混匀* 1 min内出现凝傘为阳性古典生物唄阳性，El Tor生物瑕阴性多粘菌素B敏感试验在融化并已冷却至50 C的普通琼脂中加入50u/ml 粘菌素 B*混匀后倾注平板，凝罔备用取被测试歯株23h的肉汤培养物*接种平板表m匚35 C 孵 疗诃24h后观察冇无细 凿生长占典尘物型不生长 <做感），ElToMt物型生长 C不皈?咚噬菌体裂解试验第IV组噬菌体可裂解古典生物型不能裂解E】Tor生物粮第

9、V组噬凿体口J裂解El Tor生物型*不能裂解占典生物型V-P试验K 屉占典生物粮阴性El Tot生物空囚彳性， 但育个另U超株为阴性耐盐试验K chalerae能在含0%Y% 氯化钠培养基屮生长 氯化钠浓度岗于6%则不生长（二）副溶血弧菌（ V. parahaemolyticu®具嗜盐性，为海产鱼弧菌病的病原菌，一般在20-28 C引起鱼发病。人类食用或接触污染本菌的鱼、器具类等引致食物中毒。1、形态特征培养特性：系革兰阴性菌呈弧状、杆状、丝状等形态。菌体一端有单鞭毛、运动活泼、无荚膜、无芽孢2、培养特性? 兼性厌氧，菌落中等大小，培养 24h时直径约2mm。? 最适生长温度是30-37 C, 42 C仍可生长。生长pH5.6-9.6(8.0)。? 代时10-20 min，增殖速度是大肠杆菌和志贺氏菌的2倍。? 多数菌株对弧菌抑制剂0/129不敏感，是弧菌属中少有的例外。? 生长繁殖时必须有钠离子。在含2.5% NaCI培养基上生长良好，不含NaCI的培养基不能生长，具嗜盐性。培养特征：A 嗜盐，不耐盐(0%. 1%, 6%. «% ,10%)在TCBS培养基上：为蔗糖不发酵的绿色菌落lf!i (Kanagawa phenomenonK