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文档简介
1、专题1 1.1 DNA重组技术的基本工具课前预习学案1、 预习目标 简述DNA重组技术所需的三种基本工具。 2、 预习内容1、 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,并通过_和_等技术,赋予生物以新的遗传特性,从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在_水平上进行设计和施工的,因此又叫做_。2、 培育转基因抗虫棉的操作过程至少需要三种工具,即_的“手术刀”、_的“缝合针”、将体外重组好的DNA导入受体细胞的“_”。3、 切割DNA的工具是_,又称_。这类酶主要是从_中分离纯化而来的。它们能够_,并且使每一条链中特定部位的_的_断开。DNA分子经过限制酶切割产生的D
2、NA片段末端通常有两种形式_和_。4、 将切割下来的DNA片段拼接成新的DNA分子,是靠_来完成的。根据酶的来源不同,可以将这些酶分为两类:一类是从_中分离得到的,称为E·coliDNA连接酶;另一类是从T4噬菌体中分离出来的,称为_。这两类酶都可以恢复被限制酶切开了的_。5、 质粒是一种裸露的、_、独立于细菌染色体(即拟核DNA)之外,并具有_的_分子。它有一个至多个_,供外源DNA片段插入其中。携带外源DNA的质粒进入受体细胞后,停留在细胞中进行_,或者整合到染色体DNA上,随染色体DNA_。它还有特殊的_,如抗四环素、氨苄青霉素等标记基因,供重组DNA的_。在基因工程中所使用的
3、运载体除质粒外,还有_、_等。三、提出疑惑同学们,通过你的自主学习,你还有哪些疑惑,请把它填在下面的表格中疑惑点疑惑内容 课内探究学案1、 学习目标及重难点1、简述DNA重组技术所需的三种基本工具。2、认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。学习重点:DNA重组技术所需的三种基本工具的作用。学习难点:基因工程载体需要具备的条件。2、 学习过程1、 基因工程的概念 回答:什么是基因工程?2、科技探索之路(基因工程是如何发展起来的?阅读课本P23页)思考并回答:(1) 基因工程是在哪些学科的基础上发展起来的?(2) 哪些基础理论的突破催生了基因工程?(3) 哪些技术发明促进了基因工程的实
4、施?(4) 你觉得,基因工程的诞生和发展能否离不开理论研究和技术创新?3、 限制性核酸内切酶“分子手术刀”思考并回答:(1) 从噬菌体侵染细菌的实验来看,细菌等单细胞原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵,那么这类原核生物之所以长期进化而不绝灭,有什么保护机制?由此可知,限制酶可以从哪些生物中分离出来?(2)限制酶是如何切割DNA分子的?(3) 参考课本P4图12,指出限制酶能破坏那个磷酸二酯键。(4)以EcoRI为例,画出限制酶切割后形成的末端。4、 DNA连接酶“分子缝合针” 思考并回答:(1)DNA连接酶是怎么分类的?(2) DNA连接酶与DNA聚合酶是一回事儿吗?有哪些区别?(3)E&
5、#183;coliDNA连接酶和T4DNA连接酶作用效果一样大吗?为什么? 5、 基因进入受体细胞的载体“分子运输车”思考并回答: (1)载体的作用是什么?为什么需要载体?把单独的DNA片段导入受体细胞不行吗? (2)我们选用从霍乱弧菌中分离出来的质粒做载体,可以吗?为什么? (3)我们能不能用肉眼直接观察到载体进入受体细胞?那如何鉴定呢? (4)如果载体上没有限制酶切割位点,能否把目的基因运输进入受体细胞?6、 活动:模拟操作重组DNA分子 (分组进行;完成后小组之间进行交流) 3、 反思总结 工具名称种类作用限制酶DNA连接酶载体4、 当堂检测 1、下图是基因工程主要技术环节的一个基本步骤
6、,这一步需用到的工具是 ( ) ADNA连接酶和解旋酶 BDNA聚合酶和限制性核酸内切酶C限制性核酸内切酶和DNA连接酶 DDNA聚合酶和RNA聚合酶 2、依右图有关基因工程的工具酶功能的叙述,不正确的是 ( ) A.切断a处的酶为限制性核酸内切酶 B.连接a处的酶为DNA连接酶C.切断b处的酶为解旋酶 D.切断b处的酶为限制性核酸内切酶 3、以下说法正确的是 ( ) A所有的限制酶只能识别同一种特定的核苷酸序列 B质粒是基因工程中惟一的载体 C载体必备的条件之一是:具有一个或多个限制酶切点,以便与外源基因连接 D基因治疗主要是对有缺陷的细胞进行修复 4、不属于质粒被选为基因运载体的理由是 (
7、 ) A能复制 B有多个限制酶切点 C具有标记基因 D它是环状DNA 5、科学家选用的细菌质粒往往带有一个抗菌素抗性基因,该抗性基因的主要作用是 ( )A提高受体细胞在自然环境中的耐热性 B有利于检测目的基因否导入受体细胞C增加质粒分子的相对分子质量 D便于与外源基因连接课后练习与提高1、限制酶是一种核酸切割酶,可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI,EcoRI,Hind以及Bgl的辨识序列。箭头表示每一种限制酶的特定切割部位,其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端可以互补黏合?其正确的末端互补序列为何? ( ) A. BamHI和EcoRI;末端互补序列
8、AATTB. BamHI和Hind;末端互补序列GATCC. EcoRI和Hind;末端互补序列AATTD. BamHI和BglII;末端互补序列GATC2、在基因工程中,把选出的目的基因(共1000个脱氧核苷酸对,其中腺嘌呤脱氧核苷酸460 个),放入DNA扩增仪中扩增4代,那么,在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是 ( )A540 个 B7560个 C8100 个 D17280 个3、基因工程是DNA分子水平的操作,下列有关基因工程的叙述中,错误的是 ( ) A、限制酶只用于切割获取目的基因 B、载体与目的基因必须用同一种限制酶处理 C、基因工程所用的工具酶是限制酶,DNA连接酶 D、
9、带有目的基因的载体是否进入受体细胞需检测4、下列关于DNA连接酶的叙述中,正确的是 ( )A. DNA连接酶连接的是两条链碱基对之间的氢键B. DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和脱氧核糖C. DNA连接酶连接的是黏性末端两条链主链上的磷酸和核糖D. 同一种DNA连接酶可以切出不同的黏性末端5、与“限制性内切酶”作用部位完全相同的酶是: ( )A反转录酶 BRNA聚合酶 CDNA连接酶
10、0; D解旋酶6、下列有关质粒的叙述,正确的是 ( )A质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器B质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA分子C质粒只有在侵入宿主细胞后才能在宿主细胞内复制D细菌质粒的复制过程一定是在宿主细胞外独立进行的7、关于右图DNA分子片段的说法正确的是 ( )GCATATGCATAT15N14NA限制性内切酶可作用于部位,解旋酶作用于部位B处的碱基缺失导致染色体结构的变异C把此DNA放在含15N的培养液中复制2代,子代中含15N的DNA占3/4D该DNA的特异性表现在碱基种类和(A+T)/(G+C)的比例上8、下列有关基因工程
11、的叙述,正确的是: ( )ADNA连接酶的作用是将两个黏性末端的碱基连接起来B目的基因导入受体细胞后,受体细胞即发生基因突变C目的基因与运载体结合的过程发生在细胞外D常使用的运载体有大肠杆菌、噬菌体和动植物病毒等9、限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗?以下是四种不同限制酶切割形成的DNA片段:(1) CTGCA (2) AC (3) GC G TG&
12、#160; CG(4)G (5) G (6) GC CTTAA ACGTC CG (7) GT (8)AATTC CA
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