蔓九节中挥发油的化学成分研究 2007031198 谢俊鹏

1、 中药学院本科毕业论文（设计）题目：蔓九节中挥发油的化学成分研究 年级专业 2007级 中药学临床方向专业学 号 姓 名 谢俊鹏指导教师 张翠仙学历职称 博士、副教授教师单位 广州中医药大学填表日期 2011年 5 月 4 日广州中医药大学学位论文诚 信 声 明本人郑重声明：所呈交的学术论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人或集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。学位论文作者签名： 年 月 日目 录封面1诚信声明2中文摘

2、要4英文摘要5前言6概述6蔓九节化学成分6蔓九节药理作用6蔓九节鉴别7小结7研究部分. .8材料与方法.8GC-MS分析蔓九节挥发油. .8 蔓九节GC-MS分析结果9结果与结论.12参考文献 .12致谢 .13附图一 .14蔓九节中挥发油的化学成分研究作者：谢俊鹏（2007级中药学临床方向 ）指导老师：张翠仙 （天然药物化学实验室）【摘要】目的 初步分析蔓九节中挥发油成分进行分析，为蔓九节新药开发提供基础研究资料。方法 用水蒸汽蒸馏法提取蔓九节中的挥发油，通过GC-MS技术分析其主要成分。结果 通过GC-MS鉴定出蔓九节挥发油中含1,6-Octadien-3-ol,3,7-dimethyl-

3、、Bicyclo2.2.1heptan-2-ol,1,7,7-trimethyl-,(1S-endo)-、(+)-.alpha.-Terpineol (p-menth-1-en- 8-ol)、Methyl Salicylate、2,6-Octadien-1-ol, 3,7-dimethyl-, (Z)-等成分。结论 首次采用GC-MS对其挥发油进行成分分析，所得化合物Bicyclo2.2.1heptan-2 -ol,1,7,7-trimethyl-,(1S-endo)-、(+)-.alpha.-Terpineol (p-menth -1-en-8-ol)、Methyl Salicylate、2

4、,6-Octadien-1-ol,3,7-dimethyl-,(Z)-、3,7,11-Trimethyl-3-hydroxy-6,10-dodecadien-1- ylacetate、2,6-Octadien-1-ol,3,7-dimethyl-,(E)-、Tetradecanoic acid首次从此属植物中得到，化合物1,6-Octadien-3-ol, 3,7-dimethyl-、Naphthalene,2-methyl-、3-Buten-2-one,4-(2,6,6 -trimethyl-2-cyclohexen-1-yl)-, (E)-等首次从此植物中得到。 【关键词】蔓九节；挥发油；

5、GC-MS，化学成分The chemical constituents of volatile oil from Psychotria serpens L.Candidate: Jun-Peng Xie Supervisor: Cui-Xian Zhang【Abstract】 Objective: To analyze with Components of volatile oil from Psychotria serpens L. Methodology: Extract volatile oil Psychotria serpens L. respectively by steam di

6、stillation, and analyze their major ingredients by GC-MS .Results: Several constituents of the volatile oil of the Psychotria serpens L. were 1,6-Octadien-3-ol,3,7-dimethyl-、Bicyclo2.2.1heptan-2-ol,1,7,7-trimethyl-, (1S-endo)-、(+)-.alpha.-Terpineol (p-menth-1-en-8-ol)、Methyl Salicylate、2,6-Octadien-

7、1-ol, 3,7-dimethyl-, (Z)-, etc. Conclusion: It is the first time when GC-MS was applied in component analysis of essential oil of Psychotria serpens L., and it isolated a variety of different chemical composition from the Psychotria serpens L.【Keywords】 Psychotria serpens L.; Volatile Oil; GC-MS; ch

8、emical constituents前言九节属（Psychotria）植物是我国南方常用中草药。文献调研表明，我国境内本属植物少见其相关化学成分研究。为进一步深入研究我国此属植物现对目前国内外此属植物的化学成分及药理作用进行综述，有利于我国中草药的充分利用和天然药物深入开发。本课题在前期文献研究、预试验的基础上拟对市售的茜草科九节属的蔓九节（Psychotria serpens L.）挥发油进行化学成分研究。采用水蒸汽蒸馏法提取蔓九节的挥发油，通过GC-MS技术对其中的成分进行分析，为正确认识蔓九节的药用价值提供物质基础，从而更好阐述蔓九节的药效机制，对我国中草药资源深入开发具有指导性意义。

9、概述我国传统中草药历经数千年的临床验证，具有多靶点作用机制、毒副作用低、无耐药性等优点使它表现出诱人的应用前景。中药穿根藤为民间习用草药，用于治疗风湿关节痛、手足麻木、腰肌劳脶、坐骨神经痛、多发性痈肿、骨结核、跌打损伤、骨折、毒蛇咬伤等1。中药大辞典等文献记载中药穿根藤的的原植物为茜草科九节属蔓九节（又称匍匐九节）1，其别名众多，有春根藤2、木头疳3、石邦子3，味苦辛、性平，具祛风湿、舒筋活络、消肿止痛的作用，临床上用于治疗湿关节痛、手足麻木、腰肌劳脶、坐骨神经痛、多发性痈肿、骨结核、跌打损伤、骨折、毒蛇咬伤等症1。广东地区多作络石藤的习用药45，民间组方较多，多以水煎、捣汁或浸酒服用，亦有制

10、作中成药服用的例子6。1、蔓九节化学成分综述近几十年的文献，蔓九节除台湾对其化学成分及药理作用略有研究外，在内地鲜见文献报道7。通过查阅中药大辞典得知穿根藤的化学成分中含有熊果酸(ursolic acid)，豆甾醇(stigmasterol)，-谷甾醇(-sitosterol)，高级脂肪酮(higher aliphatic ketone)，乌楠醌(tectoquinone)等。2、蔓九节药理作用从穿根藤全草中提出的熊果酸在体外对人鼻咽癌(KB)细胞的ED50为6.6g/ml，对人肺癌A549ED50为4.0g/ml，对回盲肠癌HCT-8的ED50为4.5g/ml，对乳腺癌MCF-7的ED50为

11、4.9g/ml5。黄炜、黄济群、张东方等对熊果酸抗人肺癌细胞（PGCL3）侵袭作用进行研究，发现处理96h 均可降低PGCL3 细胞增殖能力并呈剂量依赖性, 均能抑制PGCL3 细胞的侵袭能力( P< 0101) 且有剂量依赖性。抗侵袭作用机理的分析结果显示上熊果酸对细胞的运动、粘附能力及组织蛋白酶B分泌均有明显的抑制作用( P < 0105 和P < 0101)，软琼脂集落形成率也显著降低( P < 0101)。8藤类药常用于治疗肢体经络、筋脉病变，临床上神经科应用较为广泛，治疗中风病用以缓解偏瘫、麻木、僵直等症，疗效显著。9周好田应用通络止痛汤治疗痹证32例，疗效显

12、著。10；窦立新的研究表明，应用含有祛风湿止痛的络石藤的组方对治疗类风湿有明显的疗效11；隋德翠也应用含络石藤组方成功治疗一例风湿顽痹。12刘明霞的研究表明，复方络石藤方对小儿急性扁桃体炎有显著疗效13。广州植物志：“煎服或浸酒饮，壮筋骨，消风湿。”13、蔓九节鉴别林颖、黄恩等以穿根藤和正品络石藤显微特征对比，总结了穿根藤的显微特征是： 茎横 切面内皮层明显，特化成石细胞状环带状的凯氏带。 茎皮层、叶肉组织的薄壁细胞中可见草酸钙针晶束。粉末中可观察到淀粉粒、非腺毛、针晶束、石细胞及平轴式气孔14；郑善荣应用外观性状区别，对正品络石藤和穿根藤等混淆品进行了鉴别15；张电光、罗集鹏利用紫外光谱法，

13、对络石、石血、蔓九节和薜荔不育枝的水提液和氯仿提液在零阶和一阶的吸收光谱中进行鉴别，结果发现零阶光谱特征较少，一阶光谱峰形尖锐，相似光谱的零交点和第一、二强谷的导数比值有较大差异，可作鉴别依据。164、小结目前对蔓九节（穿根藤）的研究中，多是其药效、药理作用，抑或是和正品络石藤之间的鉴别，较少涉及其化学成分的研究。而同属植物中，近年也只有山大颜（P. rubra）的化学成分分析研究获得了11-O-丁香酰矮地茶素、岩白菜素、没食子酸、没食子酸甲酯四个首次发现的新成分7。而挥发油多具有止咳、祛痰、驱风、镇痛、解痉等功效17，故对蔓九节中挥发油成分进行研究，对深入挖掘蔓九节价值、新药开发或增强药效的

14、研究有一定的意义。研究部分本研究工作共包含两部分工作：山大颜茎、叶的挥发油提取；挥发油成分分析。1 材料与方法1.1 实验仪器、试剂及药材药材：蔓九节，广东习称穿根藤化学试剂及仪器：石油醚、药材粉碎机，挥发油提取器，旋转蒸发仪，GC-MS联用仪，GC-MS检测仪。1.2 挥发油提取方法取200g蔓九节药材，用药材粉碎机粉碎至合适粒度，置圆底烧瓶中，加6倍量水，共1200ml，振摇，混合均匀后浸泡2h，连接挥发油测定器与回流冷凝管。自冷凝管上端加水使充满挥发油测定器的刻度部分，并溢流入烧瓶为止。置电热套上缓缓加热至沸，并保持微沸约6h，停止加热，放置冷却。将残留在挥发油测定器里的水用乙醚萃取，得

15、总挥发油。将所得挥发油用GC-MS仪器检测。2 GC-MS分析蔓九节挥发油： 图表2-1.挥发油GC-MS分析条件parametervalueparametervalueIonization Mode:EI+Ion Energy Ramp (mV/amu):0Emission Current (µA):100Interface Temperature ():230Repeller Voltage (V):0.5Source Temperature ():200Electron Energy (eV):70Low Mass Resolution:14Lens 1 (V):5High M

16、ass Resolution:13.2Lens 2 (V):45Detector Voltage (V):400Ion Energy (eV):3.2Standby Time:0.50 (min)Post-run Time:0.00 (min)Value:4.50 ml/minSplit Flow:20.02.1 蔓九节GC-MS分析结果：图1. 蔓九节挥发油总离子流图表2-2.蔓九节挥发油GC-MS检测结果（对应附图一）No.Apex RTHeightFormulaCompound120.0914386073C10H18O1,6-Octadien-3-ol, 3,7-dimethyl-224

17、.35212970120C10H18OBicyclo2.2.1heptan-2-ol,1,7,7-trimethyl-,(1S-endo)-325.9793111626C10H18O(+)-.alpha.-Terpineol (p-menth-1-en-8-ol)426.1332088483C8H8O3Methyl Salicylate528.789345747C10H18O2,6-Octadien-1-ol, 3,7-dimethyl-, (Z)-629.166539210C17H30O33,7,11-Trimethyl-3-hydroxy-6,10-dodecadien-1-yl acet

18、ate730.689308869C10H18O2,6-Octadien-1-ol, 3,7-dimethyl-, (E)-832.316272987C11H10Naphthalene, 2-methyl-941.074424665C13H20O3-Buten-2-one,4-(2,6,6-trimethyl-2-cyclohexen-1-yl)-, (E)-1042.936304257C13H22O5,9-Undecadien-2-one, 6,10-dimethyl-, (E)-1144.5961162482C13H20O3-Buten-2-one,4-(2,6,6-trimethyl-1-

19、cyclohexen-1-yl)-, (E)-1256.8581277605C17H36Heptadecane1361.067557009C14H28O2Tetradecanoic acid1464.1073349861C18H36O2-Pentadecanone, 6,10,14-trimethyl-1564.8124498515C16H22O41,2-Benzenedicarboxylic acid, bis(2-methylpropyl) ester1666.9961854817C16H22O4Dibutyl phthalate1767.51610802613C16H32O2n-Hexa

20、decanoic acid1869.27517955106C20H40OPhytol1969.7406101048C18H34O29-Octadecenoic acid, (E)-（1） （2）1,6-Octadien-3-ol, 3,7-dimethyl- Bicyclo2.2.1heptan-2-ol, 1,7,7-trimethyl-, (1S-endo)-（3） （4）(+)-.alpha.-Terpineol (p-menth-1-en-8-ol) Methyl Salicylate （5） （6）2,6-Octadien-1-ol, 3,7-dimethyl-, (Z)- 3,7,

21、11-Trimethyl-3-hydroxy-6,10-dodecadien-1-yl acetate（7） （8）2,6-Octadien-1-ol, 3,7-dimethyl-, (E)- Naphthalene, 2-methyl-（9） （10）3-Buten-2-one, 4-(2,6,6-trimethyl-2- 5,9-Undecadien-2-one, 6,10-dimethyl-, (E)-cyclohexen-1 -yl)-, (E)-（11） （12）3-Buten-2-one, 4-(2,6,6-trimethyl-1- Heptadecanecyclohexen-1

22、-yl)-, (E)-（13） （14）Tetradecanoic acid 2-Pentadecanone, 6,10,14-trimethyl-（15） （16）1,2-Benzenedicarboxylic acid, Dibutyl phthalatebis(2-methylpropyl) ester（17） （18）n-Hexadecanoic acid Phytol（19）9-Octadecenoic acid, (E)-4结果与结论：（1）从蔓九节挥发油中提取了1,6-Octadien-3-ol,3,7-dimethyl-、Bicyclo2.2.1 heptan-2-ol,1,7

23、,7-trimethyl-, (1S-endo)-、(+)-.alpha.-Terpineol (p-menth-1-en-8-ol)、Methyl Salicylate、2,6-Octadien-1-ol, 3,7-dimethyl-, (Z)-等19种成分，其中含芳樟醇（Linalool）、左旋冰片（L-borneol）、-松油醇（-Terpineol）、冬青油（Methyl Salicylate）、n-棕榈酸（n-Hexadecanoic acid）、植醇（Phytol）等常见成分，占挥发油总成分71.11%.。（2） 周本杰、谭永恒等的研究表明，芳樟醇对正常人体心、肺功能具明显抑制作用

24、19；冰片具消炎、抗菌等功效20；冬青油有消肿、消炎和镇痛作用。（3） 蔓九节的挥发油含多种化学成分，其药理上的作用以及在新药开发上的应用，有待进行进一步的研究。参考文献：1江苏新医学院.中药大辞典,下册M.上海:上海科学出版社.2003:17312广州市卫生局药品检验所,中国科学院华南植物研究所.广东中药M.广州:广东人民出版社.1963:138-1393国家中医药管理局中华本草编委会,中华本草M.上海:上海科技出版社.1998:23574罗景,冯耀南,刘明,刘俭.中药商品知识,中册M.广州：广东省医药联合总公司.1983:2835伍月红,刘柏英.广东习用中药材品种鉴定和质量分析J.时珍国医国药, 2005,16(9):941-9426南丽红.伤湿胶囊的药效学和毒理学实验研究D.福建:福建中医学院.20027张翠仙,彭光天,何细新,林朝展,熊天琴,邓洁薇,赵钟祥,祝晨蔯.九节属药用植物Psychotria sp.化学成分分析J.中山大学学报(自然科学版) ,2010,49(4):1488黄炜,黄济群,张东方,张瑞玲,廖兆全.甘草酸、18B- 甘草次酸、熊果酸和齐墩果酸抗人肺癌细胞侵袭作用及其机理的研究J.中国中医药科技,2003,10(6):349-3509祝时祥.藤类药治疗中风