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q掌握分光光度法1.取三支试管分两组,按下表操作试管编号 0 1 2牛血清白蛋白标准 - 1.0 -蒸馏水(mL) 1.0 - -待测蛋白质溶液(mL) - - 1.02. 各管加入试剂甲5ml混匀放置10分钟。3.各管加入试剂乙0.5ml后立即混匀,37 水浴30分钟后用500nm单色光比色测定。4.计算 样品蛋白质含量(ug/ml)各管加酚试剂时必须快速,并立即摇匀,不应出各管加酚试剂时必须快速,并立即摇匀,不应出现混浊。现混浊。q 移液管使用前要看清楚刻度和是否写着快、吹,移液管使用前要看清楚刻度和是否写着快、吹,如有则需要用洗耳球吹出剩余液体如有则需要用洗耳球吹出剩余液体q 进行测定时,加进行测定时,加F olinF olin酚试剂时要特别小心,因酚试剂时要特别小心,因为该试剂仅在酸性为该试剂仅在酸性pHpH条件下稳定,但上述还原反应只在条件下稳定,但上述还原反应只在pH=10pH=10的情况下发生,故当的情况下发生,故当FolinFolin一酚试剂加到碱性的一酚试剂加到碱性的铜铜蛋白质溶液中时,必须立即混匀,以便在磷钼酸蛋白质溶液中时,必须立即混匀,以便在磷钼酸磷钨酸试剂磷钨酸试剂 被破坏之前,还原反应即能发生。被破坏之前,还原反应即能发生。 q分光光度计使用前需预热,绝对调零和空白管调节分光光度计使用前需预
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