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文档简介
1、高考生物全国通用二轮专题突破课件:专题八现代生物科技专题1.基因工程的诞生基因工程的诞生()。2.基因工程的原理及技术基因工程的原理及技术()。3.基因工程的应用基因工程的应用()。4.蛋白质工程蛋白质工程()。5.植物的组织培养植物的组织培养()。6.动物的细胞培养与体细胞克隆动物的细胞培养与体细胞克隆()。7.细胞融合与单克隆抗体细胞融合与单克隆抗体()。考纲要求考纲要求基因工程和细胞工程基因工程和细胞工程第第 讲讲1构建网络构建网络栏目索引栏目索引 考点一考点一基因工程基因工程 考点二考点二细胞工程细胞工程考点一考点一基因工程基因工程u重点提炼重点提炼u命题视角命题视角 题组题组对基因工
2、程的操作工具与操作步骤综合考查对基因工程的操作工具与操作步骤综合考查重点提炼重点提炼1.基因工程的基本工具基因工程的基本工具限制酶限制酶DNA连接酶连接酶载体载体作用作用切割目的基切割目的基因和载体因和载体拼接拼接DNA片段,形片段,形成重组成重组DNA分子分子携带目的基因进携带目的基因进入受体细胞入受体细胞作用作用部位部位两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键成的磷酸二酯键作用特作用特点点(条件条件)(1)识别特定的识别特定的核苷酸序列;核苷酸序列;(2)在特定位点在特定位点上切割上切割DNA分分子子(1)EcoliDNA连连接酶只能连接黏接酶只能连接黏性末端
3、;性末端;(2)T4DNA连接酶连接酶能连接黏性末端能连接黏性末端和平末端和平末端(1)能在宿主细胞能在宿主细胞内稳定存在并大内稳定存在并大量复制;量复制;(2)有一个至多个有一个至多个限制酶切割位点;限制酶切割位点;(3)具有特殊的标具有特殊的标记基因记基因2.基因工程的操作程序基因工程的操作程序(1)目的基因的获取目的基因的获取从基因文库中获取。从基因文库中获取。利用利用PCR技术扩增:其实质是在体外对目的基因进行大技术扩增:其实质是在体外对目的基因进行大量复制。量复制。用化学方法人工合成用化学方法人工合成a.对于核苷酸序列已知的直接人工合成。对于核苷酸序列已知的直接人工合成。b.可通过反
4、转录法获取,即可通过反转录法获取,即mRNA逆转录酶逆转录酶单链单链DNADNA聚合酶聚合酶双链双链DNA。(2)基因表达载体的构建基因表达载体的构建基因表达载体的组成:目的基因启动子终止子标基因表达载体的组成:目的基因启动子终止子标记基因复制原点。记基因复制原点。基因表达载体的构建方法基因表达载体的构建方法(3)将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞生物种类生物种类植物细胞植物细胞动物细胞动物细胞微生物细胞微生物细胞常用方法常用方法农杆菌转化法、基农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通因枪法、花粉管通道法等道法等显微注射技术显微注射技术感受态细胞感受态细胞法法(Ca2处处理法理法)受体细胞受
5、体细胞体细胞体细胞受精卵受精卵原核细胞原核细胞(4)目的基因的检测与鉴定目的基因的检测与鉴定类型类型步骤步骤检测内容检测内容方法方法结果显示结果显示分子分子检测检测第一步第一步目的基因是否进目的基因是否进入受体细胞入受体细胞DNA分子杂交分子杂交(DNA和和DNA之间之间)是否成功显示是否成功显示出杂交带出杂交带第二步第二步目的基因是否转目的基因是否转录出录出mRNA分子杂交技术分子杂交技术(DNA和和mRNA之之间间)是否成功显示是否成功显示出杂交带出杂交带第三步第三步目的基因是否翻目的基因是否翻译出蛋白质译出蛋白质抗原抗原抗体杂交抗体杂交是否成功显示是否成功显示出杂交带出杂交带个体个体水平
6、水平鉴定鉴定做抗虫或抗病的接种实验,以确定是否有做抗虫或抗病的接种实验,以确定是否有抗性以及抗性的程度;基因工程产品与天抗性以及抗性的程度;基因工程产品与天然产品的功能进行活性比较,以确定功能然产品的功能进行活性比较,以确定功能是否相同是否相同1.携带链霉素抗性基因受体菌的筛选必须通过分子检携带链霉素抗性基因受体菌的筛选必须通过分子检测测(2014天津,天津,4A)( )2.转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定必须通过分子检转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定必须通过分子检测测(2014天津,天津,4C)( )3.一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核一种限制性核酸内切酶只能识别一种特定的脱氧核苷酸
7、序列苷酸序列(2007全国全国,4A)( )4.用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸(2010浙江,浙江,2A)( )错混诊断错混诊断5.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点(2011浙江,浙江,6B)( )6.自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整整合到细菌合到细菌DNA上,属于基因工程上,属于基因工程(2010大纲全国大纲全国,5D)( )7.转抗虫基因的植物,不会导致昆虫群体抗性基因频率转抗虫基因的植物,不会导致昆虫群体抗性基因频率增加增加
8、(2010江苏,江苏,18B)( )8.重组质粒与探针能进行分子杂交是因为重组质粒与探针能进行分子杂交是因为DNA分子脱氧分子脱氧核糖和磷酸交替连接核糖和磷酸交替连接(2013安徽,安徽,6C)( )9.应用应用DNA探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中探针技术,可以检测转基因抗冻番茄植株中目的基因的存在及其完全表达目的基因的存在及其完全表达(2011四川,四川,5D)( )10.动物的生长激素基因转入植物后不能表达动物的生长激素基因转入植物后不能表达(2010江苏,江苏,18C)( )命题视角命题视角题组题组对基因工程的操作工具与操作步骤综合考查对基因工程的操作工具与操作步骤综合考查1.(
9、2014重庆,重庆,4)下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述,正确的是图。以下相关叙述,正确的是()A.的构建需要限制性核酸内切酶和的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与聚合酶参与B.侵染植物细胞后,重组侵染植物细胞后,重组Ti质粒整合到质粒整合到的染色体上的染色体上C.的染色体上若含抗虫基因,则的染色体上若含抗虫基因,则就表现出抗虫性状就表现出抗虫性状D.只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异解析解析A项,项,为重组为重组Ti质粒,其构建需要限制性核质粒,其构建需要限制性核酸内切酶和酸
10、内切酶和DNA连接酶。连接酶。B项,含重组项,含重组Ti质粒的农杆菌侵染植物细胞后,重组质粒的农杆菌侵染植物细胞后,重组Ti质粒上的目的基因整合到受体细胞质粒上的目的基因整合到受体细胞()的染色体上,的染色体上,而并非整个重组而并非整个重组Ti质粒整合到质粒整合到的染色体上。的染色体上。C项,目的基因导入受体细胞后不一定能进行表达,项,目的基因导入受体细胞后不一定能进行表达,所以抗虫基因导入植物细胞后,培育成的植株也不一所以抗虫基因导入植物细胞后,培育成的植株也不一定具有抗虫性状。定具有抗虫性状。D项,转基因抗虫植株是否培育成功,可以从个体水项,转基因抗虫植株是否培育成功,可以从个体水平上进行
11、检测,即观察植株是否具有抗虫性状,如果平上进行检测,即观察植株是否具有抗虫性状,如果具有抗虫性状则说明发生了可遗传变异具有抗虫性状则说明发生了可遗传变异(基因重组基因重组)。答案答案D2.(2014海南,海南,31)下面是将某细菌的基因下面是将某细菌的基因A导入大肠杆导入大肠杆菌内,制备菌内,制备“工程菌工程菌”的示意图。的示意图。请据图回答:请据图回答:(1)获得获得A有两条途径:一是以有两条途径:一是以A的的mRNA为模板,在为模板,在_的催化下,合成互补的单链的催化下,合成互补的单链DNA,然后,然后在在_作用下合成双链作用下合成双链DNA,从而获得所,从而获得所需基因;二是根据目标蛋白
12、质的需基因;二是根据目标蛋白质的_序列,推序列,推测出相应的测出相应的mRNA序列,然后按照碱基互补配对原则,序列,然后按照碱基互补配对原则,推测其推测其DNA的的_序列,再通过化学方法序列,再通过化学方法合成所需基因。合成所需基因。(2)利用利用PCR技术扩增技术扩增DNA时,需要在反应体系中添加时,需要在反应体系中添加的有机物质有的有机物质有_、_、4种脱氧核苷酸和种脱氧核苷酸和耐热性的耐热性的DNA聚合酶,扩增过程可以在聚合酶,扩增过程可以在PCR扩增仪中扩增仪中完成。完成。(3)由由A和载体和载体B拼接形成的拼接形成的C通常称为通常称为_。(4)在基因工程中,常用在基因工程中,常用Ca
13、2处理处理D,其目的是,其目的是_。解析解析(1)利用反转录法合成目的基因的过程是:以利用反转录法合成目的基因的过程是:以mRNA为模板,在逆转录酶的催化作用下合成单链为模板,在逆转录酶的催化作用下合成单链DNA,然后在,然后在DNA聚合酶的作用下,合成双链聚合酶的作用下,合成双链DNA分子;根据蛋白质工程合成目的基因的过程是:根据分子;根据蛋白质工程合成目的基因的过程是:根据目标蛋白质的氨基酸序列,推测相应的目标蛋白质的氨基酸序列,推测相应的mRNA序列,序列,然后按照碱基互补配对原则,推测然后按照碱基互补配对原则,推测DNA中脱氧核苷酸中脱氧核苷酸的排列顺序,通过化学方法合成。的排列顺序,
14、通过化学方法合成。(2)PCR过程中需要酶、底物、模板、引物和能量等条过程中需要酶、底物、模板、引物和能量等条件。件。(3)目的基因和载体结合,形成基因表达载体。目的基因和载体结合,形成基因表达载体。(4)在利用大肠杆菌做受体细胞时,需要先用在利用大肠杆菌做受体细胞时,需要先用Ca2处理,处理,使之成为感受态细胞,有利于其吸收重组使之成为感受态细胞,有利于其吸收重组DNA分子。分子。答案答案(1)逆转录酶逆转录酶DNA聚合酶聚合酶氨基酸氨基酸脱氧核苷脱氧核苷酸酸(2)引物引物模板模板(A基因基因)(3)基因表达载体基因表达载体(4)使使其成为感受态细胞,有利于吸收重组其成为感受态细胞,有利于吸
15、收重组DNA分子分子总结提升总结提升比较限制酶、比较限制酶、DNA连接酶、连接酶、DNA聚合酶和解旋酶聚合酶和解旋酶项目项目限制酶限制酶DNA连接酶连接酶DNA聚合酶聚合酶解旋酶解旋酶作用作用底物底物DNA分子分子 DNA分子片段分子片段 脱氧核苷酸脱氧核苷酸DNA分子分子作用作用部位部位磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二磷酸二酯键酯键碱基对间碱基对间的氢键的氢键作用作用结果结果形成黏性末形成黏性末端或平末端端或平末端形成重组形成重组DNA分子分子形成新的形成新的DNA分子分子形成单链形成单链DNA分分子子考点二考点二细胞工程细胞工程u重点提炼重点提炼u命题视角命题视角 题组一题组
16、一从植物细胞工程进行命题从植物细胞工程进行命题 题组二题组二从动物细胞工程展开命题从动物细胞工程展开命题重点提炼重点提炼1.细胞工程的几个流程图比较细胞工程的几个流程图比较细胞工程技术细胞工程技术技术过程图示技术过程图示植物组织培养植物组织培养动物细动物细胞培养胞培养植物体细植物体细胞杂交胞杂交动物细胞动物细胞的融合的融合核移植核移植单克隆单克隆抗体的抗体的制备制备2.容易混淆的三种细胞容易混淆的三种细胞杂种细胞、重组细胞和杂杂种细胞、重组细胞和杂交细胞交细胞(1)杂种细胞:植物体细胞杂交过程中,两种细胞去掉杂种细胞:植物体细胞杂交过程中,两种细胞去掉细胞壁之后形成的原生质体融合,融合的原生质
17、体出细胞壁之后形成的原生质体融合,融合的原生质体出现细胞壁之后形成的细胞叫杂种细胞。现细胞壁之后形成的细胞叫杂种细胞。(2)重组细胞:体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞之重组细胞:体细胞的细胞核移植到去核卵母细胞之后形成的细胞叫重组细胞。后形成的细胞叫重组细胞。(3)杂交细胞:动物细胞融合形成的细胞常称为杂交细杂交细胞:动物细胞融合形成的细胞常称为杂交细胞。胞。3.从结果来分析原理从结果来分析原理(1)植物体细胞杂交:植物体细胞杂交包含两个过程,植物体细胞杂交:植物体细胞杂交包含两个过程,一是植物细胞融合,二是杂种细胞的植物组织培养。一是植物细胞融合,二是杂种细胞的植物组织培养。其最终结果是形成
18、杂种植株,产生了一个生物体,因其最终结果是形成杂种植株,产生了一个生物体,因此其原理是:细胞膜的流动性和细胞的全能性。此其原理是:细胞膜的流动性和细胞的全能性。(2)动物细胞融合:动物细胞融合形成杂交细胞,杂交动物细胞融合:动物细胞融合形成杂交细胞,杂交细胞进行细胞培养,获得大量的克隆细胞,但没有形细胞进行细胞培养,获得大量的克隆细胞,但没有形成生物体,因此动物细胞融合的原理是细胞增殖和细成生物体,因此动物细胞融合的原理是细胞增殖和细胞膜的流动性,不包含细胞全能性。胞膜的流动性,不包含细胞全能性。4.对细胞核移植技术的分析对细胞核移植技术的分析(1)细胞核移植技术形成重组细胞并发育成一个新个体
19、,细胞核移植技术形成重组细胞并发育成一个新个体,体现了细胞核的全能性而非动物细胞的全能性。体现了细胞核的全能性而非动物细胞的全能性。(2)克隆属于无性繁殖,产生新个体的性别、绝大多数性克隆属于无性繁殖,产生新个体的性别、绝大多数性状与供核亲本一致。状与供核亲本一致。(3)核移植技术获得的动物与供核动物性状不完全相同的核移植技术获得的动物与供核动物性状不完全相同的原因:原因:克隆动物绝大部分克隆动物绝大部分DNA来自于供体细胞核,但来自于供体细胞核,但其线粒体中的其线粒体中的DNA来自于去核卵细胞。来自于去核卵细胞。性状受基因与性状受基因与环境共同影响。环境共同影响。在个体发育过程中有可能发生基
20、因突在个体发育过程中有可能发生基因突变,产生供核动物没有的性状。变,产生供核动物没有的性状。1.产生抗人白细胞介素产生抗人白细胞介素8抗体的杂交瘤细胞的筛选必抗体的杂交瘤细胞的筛选必须通过分子检测须通过分子检测(2014天津,天津,4B)( )三体综合征的诊断必须通过分子检测三体综合征的诊断必须通过分子检测(2014天津,天津,4D)( )3.培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是组织培养培育草莓脱毒苗所采用的主要技术是组织培养(2012广东,广东,2A)( )4.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理胞均需酶处理(2008全国全国,5B
21、)( )错混诊断错混诊断5.培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞细胞(2010浙江,浙江,4A)( )6.动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体体现了细胞的全能动物杂交瘤细胞产生单克隆抗体体现了细胞的全能性性(2012江苏,江苏,22C)( )7.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体(2011江苏,江苏,14B)( )8.单克隆抗体技术可以用于治疗老年痴呆症单克隆抗体技术可以用于治疗老年痴呆症(2010江苏,江苏,17C)( )命题视角命题视角题组一题组一从植物细胞工程进行命题从植物细胞工程进行命
22、题(1)培育胚状体利用了培育胚状体利用了_这一项生物技术,这一项生物技术,胚状体再继续培养,则可培育出完整的植株,这体现了胚状体再继续培养,则可培育出完整的植株,这体现了_。培养基中除了含有一定的营养外,还必须。培养基中除了含有一定的营养外,还必须含有含有_等植物激素,还需要对培养基进行严格等植物激素,还需要对培养基进行严格的的_。(2)如果愈伤组织是三七叶肉细胞培养产生的,若为了获得三如果愈伤组织是三七叶肉细胞培养产生的,若为了获得三七的细胞产物,则只需要培养到七的细胞产物,则只需要培养到_;若为了获;若为了获得三七的人工种子,则需要培养到得三七的人工种子,则需要培养到_。如果愈。如果愈伤组
23、织是棉花叶肉细胞培养产生的,通过基因工程要获取抗虫伤组织是棉花叶肉细胞培养产生的,通过基因工程要获取抗虫棉,目的基因导入棉花愈伤组织细胞常用的方法是棉,目的基因导入棉花愈伤组织细胞常用的方法是_法。法。(3)从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中,必须要从叶片的叶肉细胞到获得胚状体的过程中,必须要经过经过_。无丝分裂无丝分裂有丝分裂有丝分裂减数分裂减数分裂原代培养原代培养传代培养传代培养植物体细胞杂交植物体细胞杂交细胞融合细胞融合脱脱分化分化再分化再分化解析解析(1)离体植物细胞通过脱分化形成愈伤组织,通离体植物细胞通过脱分化形成愈伤组织,通过再分化形成具有根和芽的胚状体,再通过细胞分裂、过再分
24、化形成具有根和芽的胚状体,再通过细胞分裂、分化发育成一个完整的植株。该技术称为植物组织培分化发育成一个完整的植株。该技术称为植物组织培养,其原理为植物细胞的全能性。培养基的成分为水、养,其原理为植物细胞的全能性。培养基的成分为水、无机盐、维生素、氨基酸、蔗糖、植物激素无机盐、维生素、氨基酸、蔗糖、植物激素(生长素和生长素和细胞分裂素等细胞分裂素等)等;培养基要求进行严格的灭菌。等;培养基要求进行严格的灭菌。(2)三七的细胞产物为细胞的代谢产物,将三七叶肉细三七的细胞产物为细胞的代谢产物,将三七叶肉细胞培养到愈伤组织即可;获得人工种子需培养至胚状胞培养到愈伤组织即可;获得人工种子需培养至胚状体;
25、棉花为双子叶植物,导入抗虫基因常用农杆菌转体;棉花为双子叶植物,导入抗虫基因常用农杆菌转化法。化法。(3)离体叶肉细胞培养到胚状体的过程中必须经过脱分离体叶肉细胞培养到胚状体的过程中必须经过脱分化和有丝分裂形成愈伤组织,再分化和有丝分裂形成化和有丝分裂形成愈伤组织,再分化和有丝分裂形成具有根和芽的胚状体。具有根和芽的胚状体。答案答案(1)植物组织培养植物组织培养植物细胞的全能性植物细胞的全能性细胞分细胞分裂素、生长素裂素、生长素灭菌灭菌(2)愈伤组织愈伤组织胚状体胚状体农杆菌农杆菌转化转化(3)2.下图是细胞融合示意图,请据图回答下列问题:下图是细胞融合示意图,请据图回答下列问题:(1)过程过
26、程应使用应使用_处理细处理细胞,以去除植物细胞壁。胞,以去除植物细胞壁。(2)如果将已去除细胞壁的植物细胞放入等渗溶液中,如果将已去除细胞壁的植物细胞放入等渗溶液中,细胞呈现什么形状?细胞呈现什么形状?_。(3)过程过程的诱导方法有的诱导方法有_和和_两大两大类。类。(4)过程过程是细胞壁的再生过程,与此过程密切相关的是细胞壁的再生过程,与此过程密切相关的细胞器是细胞器是_。(5)过程中进行的细胞分裂方式是过程中进行的细胞分裂方式是_,该过程,该过程先诱导细胞分裂形成先诱导细胞分裂形成_,再由它分化形成杂种植,再由它分化形成杂种植物幼苗。物幼苗。(6)融合的细胞需要在培养基上进行培养。人工合成
27、的融合的细胞需要在培养基上进行培养。人工合成的培养基中除水、蔗糖、维生素、有机添加物、无机物质培养基中除水、蔗糖、维生素、有机添加物、无机物质外,外,_是植物细胞培养成杂种植物幼苗不是植物细胞培养成杂种植物幼苗不能缺少的调节物质。能缺少的调节物质。解析解析(1)过程过程应使用纤维素酶和果胶酶去除细胞应使用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁获得原生质体。壁获得原生质体。(2)去除细胞壁的原生质体是球形的,在等渗溶液中,去除细胞壁的原生质体是球形的,在等渗溶液中,细胞形态不变。细胞形态不变。(3)用物理法和化学法可诱导过程用物理法和化学法可诱导过程完成原生质体融合。完成原生质体融合。(4)高尔基体与植物细
28、胞壁的形成有关。高尔基体与植物细胞壁的形成有关。(5)杂种植株形成杂种幼苗的过程中进行的是有丝分裂,杂种植株形成杂种幼苗的过程中进行的是有丝分裂,该过程先经过脱分化形成愈伤组织,再由它分化形成该过程先经过脱分化形成愈伤组织,再由它分化形成杂种植物幼苗。杂种植物幼苗。(6)植物组织培养基中除水、蔗糖、维生素、有机添加植物组织培养基中除水、蔗糖、维生素、有机添加物、无机物质外,还需要加入植物激素物、无机物质外,还需要加入植物激素(或生长调节物或生长调节物质质),诱导愈伤组织完成再分化过程,形成杂种植物幼,诱导愈伤组织完成再分化过程,形成杂种植物幼苗。苗。答案答案(1)纤维素酶、果胶酶纤维素酶、果胶
29、酶(2)球形球形(3)物理法物理法化学法化学法(4)高尔基体高尔基体(5)有丝分裂有丝分裂愈伤组织愈伤组织(6)植物激素植物激素(或生长调节物质或生长调节物质)易错警示易错警示1.杂种细胞形成的标志:新的细胞壁的生成。杂种细胞形成的标志:新的细胞壁的生成。2.杂种植株遗传物质的变化:杂种植株的变异类型属杂种植株遗传物质的变化:杂种植株的变异类型属于染色体变异,杂种植株的染色体数目通常是两亲本于染色体变异,杂种植株的染色体数目通常是两亲本细胞染色体数目之和,杂种植株属于异源多倍体。细胞染色体数目之和,杂种植株属于异源多倍体。命题视角命题视角题组二题组二从动物细胞工程展开命题从动物细胞工程展开命题
30、3.动物细胞体外培养时,通常要在培养基中补充一定浓度动物细胞体外培养时,通常要在培养基中补充一定浓度的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养的影响的某些物质。如图是血清对正常细胞和癌细胞培养的影响的实验结果。据图回答下列问题:的实验结果。据图回答下列问题:(1)与体细胞的增殖相比,癌细胞的细胞周期与体细胞的增殖相比,癌细胞的细胞周期_(填填“较长较长”“”“较短较短”或或“不变不变”)。(2)在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,在动物细胞培养时,通常在合成培养基中加入适量血清,其原因是其原因是_。(3)细胞培养应在含细胞培养应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,的恒温培养箱中进
31、行,CO2的作的作用是用是_。(4)在两种细胞生长过程中,正常细胞铺满瓶壁时,其生长在两种细胞生长过程中,正常细胞铺满瓶壁时,其生长_。药物实验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,。药物实验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,癌细胞比正常细胞可以传代的次数更癌细胞比正常细胞可以传代的次数更_。(5)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的入适量的_。解析解析(1)与体细胞相比较,癌细胞分裂速度更快,细胞周与体细胞相比较,癌细胞分裂速度更快,细胞周期较短。期较短。(2)动物细胞培养时通常要在培养基中加入血清等物质,血动物细胞培养时通常要在培
32、养基中加入血清等物质,血清含有多种未知的促细胞生长因子及其他活性物质,能促清含有多种未知的促细胞生长因子及其他活性物质,能促进细胞的生长、增殖。进细胞的生长、增殖。(3)向培养基中通入一定浓度的向培养基中通入一定浓度的CO2以维持培养液的以维持培养液的pH。(4)正常细胞铺满瓶壁时,会出现接触抑制现象,使其生长正常细胞铺满瓶壁时,会出现接触抑制现象,使其生长停止;因为癌细胞的遗传物质发生改变,能无限增殖,因停止;因为癌细胞的遗传物质发生改变,能无限增殖,因此传代次数更多。此传代次数更多。(5)动物细胞培养过程中,应向培养液中加入适量的动物细胞培养过程中,应向培养液中加入适量的抗生素以防止细胞培
33、养过程中细菌的污染。抗生素以防止细胞培养过程中细菌的污染。答案答案(1)较短较短(2)血清可以补充合成培养基中缺乏血清可以补充合成培养基中缺乏的物质的物质(3)维持培养液的维持培养液的pH(4)停止停止多多(5)抗生抗生素素4.(2014新课标新课标,40)某研究者用抗原某研究者用抗原(A)分别免疫分别免疫3只同种小鼠只同种小鼠(X、Y和和Z),每只小鼠免疫,每只小鼠免疫5次,每次免次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数抗体反应的血清最大稀释倍数),结果如下图所示。,结果如下图所示。若要制备杂交瘤细胞,需取
34、免疫后小鼠的若要制备杂交瘤细胞,需取免疫后小鼠的B淋巴细胞淋巴细胞(染色体数目为染色体数目为40条条),并将该细胞与体外培养的小鼠,并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞(染色体数目为染色体数目为60条条)按一定比例加入试管按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗体检测,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题:回答下列问题:(1)制备融合所需的制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到抗体效价需达到16000以上,则小鼠最
35、少需要经过以上,则小鼠最少需要经过_次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这这3只免疫小鼠中,最适合用于制备只免疫小鼠中,最适合用于制备B淋巴细胞的淋巴细胞的是是_小鼠,理由是小鼠,理由是_。(2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有细胞和杂交瘤细胞外,可能还有_,体系中出现多种,体系中出现多种类型细胞的原因是类型细胞的原因是_。(3)杂交瘤细胞中有杂交瘤细胞中有_个细胞核,染色体数目个细胞核,染色体数目最多是最多是_条。条。(4)未融合的未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原因是原因是_。解析解析(1)据图分析可知,第四次注射后据图分析可知,第四次注射后X、Y、Z小小鼠的血清抗体效价几乎都达到鼠的血清抗体效价几乎都达到16000以上,小鼠以上,小鼠Y的的血清抗体效价最高,最适合用于制备单克隆抗体。血清抗体效价最高,最适合用于制备单克隆抗体。(2)融合体系中除了未融合的细胞和杂交瘤细胞之外,融合体系中除了未融合的细胞和杂交瘤细胞之外,还有骨髓瘤细胞的自身融合细胞和还有骨髓瘤细
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