肝细胞癌三维彩色直方图血流定量分析参数与肿瘤微血管密度的相关性研究

1、肝细胞癌三维彩色直方图血流定量分析参数与肿瘤微血管密度的相关性研究 【摘要】 目的：研究肝细胞癌三维彩色直方图血流定量分析参数与肿瘤微血管密度的相关性。方法：应用GE voluson 730三维彩色超声仪对29例肝细胞癌进行检查，采用三维彩色直方图技术定量测量血管指数（Vascularization index,VI）、血流指数（Flow index,FI）和血管血流指数（Vascularization-flow,VFI），术后测定标本的肿瘤微血管密度(microvessel density, MVD)。结果：肝细胞癌VI、FI、VFI与MVD呈线性正相关。结论：三维彩色直方图血流定量分析参数

2、可用于肝细胞癌肿瘤血管生成的术前评估。 【关键词】 肝细胞癌 直方图 肿瘤微血管密度The Investigation of the Correlation Between the Parameters of Threedimensional Color Histogram and MVD in Hepatocellular CarcinomaXIE Limei，LIU Dandan1.The Affiliated Shengjing Hospital of China Medical University,Shenyang, Liaoning 110004, China;2.The Red

3、Cross Hospital of Shenyang, Shenyang, Liaoning 110004, ChinaAbstract： Objective To investigate the correlation between the parameters of three-dimensional color histogram and microvessel density(MVD)in hepatocellular carcinoma.Methtods 29 patients with HCC was examind by GE voluson 730 three-dimensi

4、onal color ultrasound system, VI、FI and VFI was measured by using three-dimensional color histogram technique and MVD was measured postoperation.Results There was significant positive linear correlation between VI、FI、VFI and MVD.Conclusion The parameters of three-dimensional color histogram can be u

5、sed to evaluate the angiogenesis in hepatocellular carcinoma. Key words:Hepatocellular carcinoma; Threedimensional color histogran; Microvessel density 目前肿瘤微血管密度( microvessel density ,MVD) 被认为是反映血管生成的金标准，但需要在术后取得肿瘤组织标本的基础上进行，本研究探讨肝细胞癌三维彩色直方图血流定量分析参数与MVD的相关性，术前对肿瘤血管生成进行评估。1 资料与方法1.1 研究对象选取我院住院拟手术的肝细胞

6、癌患者29例，其中男26例，女3例，年龄36岁78岁，所有病例均经手术及病理证实。1.2 仪器与方法采用GE Voluson 730三维超声成像系统，选用3 MHz5 MHz腹部容积探头，首先对病灶进行二维彩色血管能量成像，启动3D程序，调整取样框，进行三维彩色血管能量成像，选择虚拟组织计算机辅助分析程序，以6步进描记肿物轮廓，选择三维彩色直方图程序，系统自动计算血管指数(VI)、血流指数(FI)、血管血流指数(VFI)等指标。 术后标本行CD34单克隆抗体免疫组织化学染色，采用常规SP法。微血管密度采用Weidner报告方法：在40倍光镜下扫查整个切片，寻找血管高密度区，再在400倍视野下记

7、数三个视野被染成棕色的血管数，取其平均值作为微血管密度。 应用SPSS 11.0进行统计学分析，各组间比较采用t检验，VI、FI、VFI分别与MVD进行直线相关分析。2 结果2.1 三维彩色血管能量成像显示肝细胞癌血流特征肝细胞癌高分化10例，中分化11例，低分化8例，三维彩色血管能量成像能够立体显示肿瘤血管分支及分布状况，可表现无血流信号；肿瘤周边或内部星点状血流；抱球样血流信号包绕肿瘤；肿瘤内部血流信号丰富。2.2 肝细胞癌VI、FI、VFI与MVD相关性CD34阳性染色为细胞膜线状棕黄色着色。各组VI、FI、VFI及MVD比较均有统计学差异（P0.05）,VI、FI、VFI与MVD呈线性

8、正相关，相关系数分别为：0.61、0.59、0.51（P0.05），见表1。表1 肝细胞癌VI、FI、VFI、MVD比较(略)注：与高分化组比较P0.05,与中分化组比较P0.05。 3 讨论 Folkman1提出肿瘤生长依赖于新生血管的形成的概念,肿瘤的生长分为无血管期和血管期,在无血管期由于肿瘤主要依赖周围组织的弥散来获取营养物质和排泄代谢物2，肿瘤直径一般不超过1 mm2 mm3，而至血管期,肿瘤内出现大量新生肿瘤血管，肿瘤新生血管形态不完整，功能不完善，从而肿瘤迅速生长并发生转移。 运用特异性抗体标记肿瘤组织血管内皮细胞,在显微镜下计数单位面积中的微血管数目,即微血管密度(microv

9、ascular density ,MVD)，是目前被认为最能反映肿瘤新生血管增生情况的直观方法。CD34抗原是一种糖磷脂蛋白，在造血干细胞表面高度表达，随其分化成熟而逐渐减弱至消失，但可在恶性肿瘤新生微血管内皮细胞表达，是较特异和敏感的肿瘤生长中血管内皮细胞表面标志，通过CD34染色可计算肿瘤微血管密度。 肝细胞癌是富血供的肿瘤,新生血管生成是肝癌发生、生长过程中最重要的现象，并影响患者的预后4。肿瘤微血管密度需在术后取得肿瘤组织标本的基础上进行，术前应用影像学方法准确评价肿瘤血供状态具有重要意义。国内外一些文献报道了二维超声肿瘤彩色血管平均密度测定的研究5，6，但需要特殊计算机软件支持，而且

10、肿瘤切面的选择存在很大的主观性，可重复性差。近年三维彩色血管能量成像技术能够直观、全面显示肿瘤血管形态，基于虚拟组织计算机辅助分析的三维彩色直方图技术提供了一种客观的、定量分析新生血管的新方法，用于测量感兴趣体积内的彩色百分比和血流振幅，使组织内的血管及血流得到量化7。应用的主要指标有VI:代表组织内的血管；FI:代表在三维扫描时间内的血流强度;VFI:代表血流和血管的总和。 本研究结果表明肝细胞癌VI、FI、VFI与MVD呈线性正相关，其中VI与MVD的相关性最好，应用三维彩色直方图使定量分析肿瘤血供成为可能，对术前判断肿瘤血供状况提供重要参考，同时应用三维彩色直方图也有利于动态观察肿瘤血管

11、变化，为非手术治疗疗效判定提供帮助。【参考文献】 1Folkman J.Tumor angiogenesis:therapeutic implicationsJ.N Engl J Med,1971，285(21):11821186.2Luiten RM, Fleuren GJ, Warnaar SO, et al. Targetspecific activationof mast cells by immunoglobulin E reactive with a renal cell carcinomaassociated antigenJ. Lab Invest,1996,74(2):467

12、475.3Potgens AJ, Westphal HR, de waal RM, et al. The role of vascularpermeability factor and basic fibroblast growth factor in tumor angiogenesisJ. Biol Chem Hoppe Seyler,1995，376(2):5770.4Barinaga M. Designing therapies that target tumor blood vesselsJ.Science，1997，275(5299):482484.5Edwin F, Walter E, Dennis E. Quantified power Doppler US of tumor blood flow correlates with microscopic quantification of tumor blood vesselsJ.Radiology,2001，219(1):166170.6赵玉珍，曾燕荣，王小玲，等.肝癌彩色血管平均密度与病理免疫组化对比分析J.中国超声医学杂志，2002