黄连饮片分级方法研究刘承凯

1、分类 炮制 年 级 2010级 成 都 中 医 药 大 学药学院学士学位论文黄连饮片分级方法研究 刘承恺指 导 教 师： 黄勤挽（副教授） 申请学位级别： 学 士 专业名称： 中药资源2010级 论文提交时间：2014 年 5 月 论文答辩时间：2014 年 6 月 学位授予单位：成都中医药大学 答辩委员会主席： 评阅人： 成都中医药大学药学院2014年 5 月目录摘要IIIABSTRACTIV前言1一、材料11.黄连饮片的收集12.仪器2二、试验方法和结果21.黄连饮片外观物性特征-大小测量22.黄连饮片外观物性特征-颜色测量33.黄连饮片外观物性特征-药屑杂质测定54.黄连饮片内在品质评价

2、75.黄连饮片分等研究13综述：中药黄连综合利用概况14 1.中药黄连的研究概述14 2.黄连须研究概述15 3.黄连叶研究概述15 4.黄连渣的研究概述16参考文献16致 谢17 黄连饮片分级方法研究 刘成恺摘要目的：研究黄连饮片等级划分的方法。方法：采用外观物性特征量化和内在品质评价的综合方法研究18批黄连饮片的质量。其中外观物性特征量化研究黄连饮片的大小、颜色、药屑杂质；内在品质评价对黄连饮片的水分、总灰分、浸出物、薄层鉴别、含量测定进行了研究。结果：18批饮片长度为18.3739.22mm，宽度为5.267.35mm，厚度为1.963.46mm，重量为0.140.47g；其外部颜色和内

3、部颜色可计算出总色值；药屑杂质为0.43%3.23%，水分为7.34%10.51%，总灰分为1.70%2.82%，浸出物为24.43%32.59%，其中长度、宽度、厚度、重量、药屑杂质、总灰分、浸出物可作为分级依据；黄连饮片供试品色谱中，在与黄连对照药材色谱相应的位置上，显4个以上相同颜色的荧光斑点（Rf由大到小分别是黄连碱、表小檗碱、小檗碱、巴马汀和药根碱），18批黄连饮片薄层色谱指纹信息一致，不作为分级依据；按干燥品计算，以盐酸小檗碱计，18批黄连饮片含小檗碱为4.40%6.33%，含表小檗碱、黄连碱和巴马汀的总量为2.89%4.18%，其中4批样品不合格，通过聚类分析可分为2类，可作为黄

4、连饮片分级依据。结论：黄连饮片可以划分为2种等级，其中一级饮片呈不规则的薄片（片长不得少于2.0cm、片宽不得少于0.5cm、片厚0.10.3cm），外表皮灰黄色或黄褐色，切面或碎断面鲜黄色或红黄色，药屑杂质不得过1.0%，水分不得过12.0%，总灰分不得过2.5%，浸出物不得少于25.0%，在紫外光灯（365nm）下检视，在与黄连对照药材色谱相应的位置上，显4个以上相同颜色的荧光斑点，与盐酸小檗碱对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，按干燥品计算，以盐酸小檗碱计，含小檗碱不得少于6.5%，含表小檗碱、黄连碱和巴马汀的总量不得少于4.0%；二级饮片呈不规则的片或碎块（对长、宽、片厚不做

5、规定），外表皮灰黄色或黄褐色，切面或碎断面鲜黄色或红黄色，药屑杂质不得过4.0%，水分不得过12.0%，总灰分不得过3.5%，浸出物不得少于15.0%，在紫外光灯（365nm）下检视，在与黄连对照药材色谱相应的位置上，显4个以上相同颜色的荧光斑点，与盐酸小檗碱对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，按干燥品计算，以盐酸小檗碱计，含小檗碱不得少于5.0%，含表小檗碱、黄连碱和巴马汀的总量不得少于3.3%。 关键词：黄连饮片 等级 一级饮片 二级饮片Research classification method berberine PiecesLiuChengkai ABSTRACTObjec

6、tive: Research berberine Pieces grading method.Methods: And integrated approach to the evaluation of the intrinsic quality of the quality of research grant berberine 18 Pieces quantified using physical characteristic appearance. Physical appearance characteristics which quantitative research berberi

7、ne Pieces size, color, drug crumbs impurities; intrinsic quality evaluation of water berberine Pieces, total ash, extract, TLC, assay studied.Results: 18 Pieces batch length 18.3739.22mm, width of 5.267.35mm, thickness 1.963.46mm, weighs 0.140.47g; its exterior color and interior color color calcula

8、te the total value; drug crumbs impurities 0.43%3.23%, a water content of 7.34%10.51%, total ash 1.70%2.82%, extract of 32.59%24.43%, wherein the length, width, thickness, weight, drug debris impurities, total ash extract as classification based; berberine tablets test products for chromatography, c

9、hromatography with the reference drug berberine corresponding position, which was four more of the same color fluorescent spots (Rf descending coptisine respectively, table berberine, berberine , THP and jatrorrhizine), 18 batches berberine tablets TLC fingerprint information is consistent, not as a

10、 basis for classification; calculated on dry goods, berberine meter, 18 batches berberine tablets containing 4.40% berberine 6.33%, with the total amount of berberine table, coptisine and THP is 2.89%4.18%, of which four batches of samples failed, cluster analysis can be divided into two categories,

11、 as berberine Pieces graded basis. Conclusion: Berberine Pieces can be divided into two kinds of levels, including an irregular flakes Pieces ( Duration of not less than 2.0cm, sheet width of not less than 0.5cm, slice thickness 0.1 0.3cm), pale yellow or brown outer skin , cut or broken section of

12、bright yellow or red and yellow , medicine crumbs impurities not more than 1.0 %, moisture not more than 12.0% of the total ash content not more than 2.5% extract of not less than 25.0% , in UV light (365nm) , under review berberine reference drug chromatography with the corresponding position , whi

13、ch was four more of the same color fluorescent spots , and berberine hydrochloride reference chromatogram corresponding position was the same color fluorescent spots , dry goods , hydrochloric acid Berberis meter base , containing not less than 6.5% berberine , berberine -containing sheet total THP

14、coptisine and not less than 4.0% ; secondary pieces irregular pieces or fragments ( of length, width , slice thickness makes provisions ) , pale yellow or brown outer skin , cut or broken section of bright yellow or red and yellow , the drug should not exceed 4.0% of impurities crumbs , water not mo

15、re than 12.0% , not more than 3.5% total ash , extract not less than 15.0% , in UV light (365nm) , under review , the reference drug chromatography with berberine corresponding position , which was four more of the same color fluorescent spots , and berberine hydrochloride reference substance corres

16、ponding position on the chromatogram , which was the same color fluorescent spots, dry goods , berberine dollars, with not less than 5.0% berberine , berberine -containing sheet total coptisine and THP shall not be less than 3.3%.Keywords: Berberine Pieces；Grade；A pieces；Two pieces前言自古以来，中药材有商品等级划分，

17、而中药饮片规格缺乏科学合理的分类分级方法及其质量评价标准。本课题来源于国家中医药管理局中医药科研行业专项，以黄连饮片为研究对象，拟采用外观物性特征量化和内在品质评价结合的方法综合评价，结合聚类分析建模，开展黄连饮片分级的探索性研究。在饮片传统分级方法（片形大小、水分和杂质的含量）的基础上，分类对饮片进行规格分级研究，并在各级饮片的质量评价标准中充实现代科学评价内容（有效成分含量、浸出物重量及TLC特征图谱等），使饮片分级方法更为科学、实用。一、材料1.黄连饮片的收集黄连饮片收集由课题组前期完成，共制备和收集18批，每批次25kg，经成都中医药大学中药标本中心卢先明教授鉴定为毛茛科植物黄连Cop

18、tis chinensis Franch 的干燥根茎加工品（切片）。饮片厂主要分布在四川省、安徽省、北京市、广东省，兼顾黄连的道地产区和非道地主产区，详见表1。表1 黄连饮片一览表饮片编号等级生产厂家批号样品量(kg)YP-1统货四川新荷花中药饮片股份有限公司（委托加工）重庆市石柱县黄水镇枫木乡石印组（A级）药材加工120111017.24YP-2统货四川新荷花中药饮片股份有限公司（委托加工）重庆市石柱县黄水镇枫木乡石印组（B级）药材加工120111028.35YP-3统货四川新荷花中药饮片股份有限公司（委托加工）重庆市石柱县冷水乡八龙村双坝组（A级）药材加工120111037.39YP-4统

19、货四川新荷花中药饮片股份有限公司（委托加工）重庆市石柱县冷水乡八龙村双坝组（B级）药材加工120111047.74YP-5统货四川新荷花中药饮片股份有限公司（委托加工）湖北省利川市汪营镇王家寨村八组药材加工120111056.46YP-6统货四川新荷花中药饮片股份有限公司（委托加工）四川省彭州市白鹿镇红花村十组药材加工120111066.98YP-7统货四川新荷花中药饮片股份有限公司11051145YP-8统货四川新荷花中药饮片股份有限公司11060675YP-9统货四川省中药饮片有限责任公司1106215YP-10统货成都真龙百信堂药业有限公司1110012YP-11统货洪雅县瓦屋山药业有限

20、公司1205012YP-12统货广安福鼎中药饮片有限公司1207012YP-13统货成都中医大惠康药业有限公司1207012YP-14统货康美药业股份有限公司1206022212YP-15统货北京盛世龙药业有限公司12070742YP-16统货亳州市老益堂中药材销售有限公司/2YP-17统货北京同仁堂（亳州）饮片有限责任公司2010091022YP-18统货成都中医大惠康药业有限公司1211012注：YP-1YP-6系委托加工饮片；YP-7YP-18系购买饮片。2.仪器游标卡尺（量程0150 mm，精度0.02 mm）（成都成量工具有限公司），BS200S型精密电子天平（北京赛多利斯天平有限公

21、司，d=0.001g，max 200g），CR-410色彩色差计（日本柯尼卡美能达有限公司），FW135型中草药粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司），DRZ-4型电阻炉温度控制器（沈阳市电炉厂），DZKW-4型水浴锅（北京中兴伟业仪器有限公司），ZF-90型紫外分析仪（温州奥利生物医学仪器厂），Agilent 1200高效液相色谱仪（含四元泵、DAD检测器、柱温箱、自动进样器），PHS-3C型酸度计（上海日岛科学仪器有限公司），UPH-10T超纯水器（成都超纯科技有限公司）。二、试验方法和结果1.黄连饮片外观物性特征-大小测量1.1试验方法 从每批黄连饮片中，随机抽取50个样本，用游标卡尺测量样

22、本的总长度、总宽度（样本平放投影至平面最宽处）、片厚（饮片最厚处），并称取每1片片重。对总长度、总宽度、片厚数据进行标准化处理后聚类分析。1.2试验结果 计算平均值，数据用±s形式表示，结果见表2和图1。表2 黄连饮片外观物性特征-大小测量(±s，n=50)饮片编号大小长度（mm）宽度（mm）厚度（mm）重量（g）YP-123.90±7.476.54±1.412.37±0.550.23±0.12YP-221.86±8.115.87±1.302.57±0.680.18±0.09YP-324.86&

23、#177;8.335.52±1.242.87±0.750.25±0.12YP-420.84±6.455.26±0.762.85±0.900.19±0.11YP-523.77±7.125.90±1.153.46±0.810.30±0.15YP-624.21±7.707.13±1.242.24±0.780.24±0.12YP-734.87±10.376.88±1.592.74±0.730.39±0.23YP-8

24、27.62±7.476.41±2.462.62±0.890.29±0.22YP-925.61±8.056.76±1.973.19±0.780.35±0.22YP-1039.22±14.616.56±1.732.29±0.490.47±0.30YP-1119.36±6.695.98±1.992.69±0.610.19±0.08YP-1235.93±11.686.85±1.853.19±0.760.35

25、7;0.22YP-1328.25±10.437.35±2.682.64±0.710.30±0.23YP-1421.79±6.855.81±1.291.96±0.380.21±0.09YP-1524.75±6.496.54±1.442.13±0.330.24±0.11YP-1628.56±8.306.46±1.402.38±0.410.34±0.21YP-1718.37±4.495.52±1.322.38±0

26、.550.14±0.06YP-1830.06±9.777.15±1.952.45±0.660.32±0.17图1 黄连饮片长、宽、厚数据聚类分析图由图1可见，若将18批黄连饮片按大小聚类成2类，则YP-2、YP-11、YP-17、YP-3、YP-4、YP-14、YP-5、YP-9是第1类；YP-13、YP-18、YP-8、YP-16、YP-1、YP-15、YP-6、YP-7、YP-12、YP-10是第2类。结合聚类分析数据和生产实际，黄连饮片片厚、片型的均匀性是影响外观物性特征的最大因素，暂定如下：【黄连一级饮片】 本品呈不规则的薄片（片长不得

27、少于2.0cm、片宽不得少于0.5cm、片厚0.10.3cm）。【黄连二级饮片】 本品呈不规则的片或碎块（对长、宽、片厚不做规定）。2.黄连饮片外观物性特征-颜色测量2.1试验方法 从每批黄连饮片中，随机抽取干燥样品数个，直接测定外部的色度值；内部颜色是粉碎后90%以上过30目筛，未过筛的与已过筛的粉末合并，混合均匀，测定。仪器参数：光源D65，标准观察角度2°，照明口径Ø50 mm；大于光源口径的烧杯装盛样品，样品装盛厚度不低于2cm，室温下测定。数据用L*a*b*色空间法表示，其中L*为亮度值，a* 红绿色度坐标，b*为黄蓝色度坐标，E*ab为总色值，计算。以a*值为X

28、轴、b*值为Y轴、L*值为Z轴，进行Lab色空间三维投影；并对L*a*b*值进行聚类分析。2.2试验结果 结果见表3和图2。表3 黄连饮片外观物性特征-颜色测量饮片编号外部颜色内部颜色L*a*b*总色值（E*ab）L*a*b*总色值（E*ab）YP-140.4511.0932.5553.091450.159.5832.3960.4641YP-248.6513.1336.1962.039850.659.3632.9561.1452YP-349.6413.4238.9364.496348.579.7929.1857.5010YP-444.0515.1335.0958.314949.90 10.07

29、31.9860.1177YP-544.1711.5534.2857.092153.619.6138.1966.5196YP-641.9810.7432.8054.346252.449.7635.9264.3075YP-741.419.9233.1453.957949.209.5429.9558.3837YP-843.679.3431.3754.574548.347.4227.8456.2750YP-935.746.8322.6742.871046.446.6724.4452.9006YP-1048.4710.3737.8562.365949.609.0130.7659.0552YP-1147.

30、799.9532.0158.374047.106.6625.2753.8641YP-1233.057.3122.4940.639148.099.1028.9856.8797YP-1335.718.1826.6645.308652.129.8335.1363.6179YP-1460.9216.5957.3385.283150.6310.0633.3761.4667YP-1535.798.4326.4245.277052.129.8335.1363.6179YP-1661.9513.4052.2182.117349.519.3831.8159.5911YP-1741.1510.7529.1451.

31、556044.888.5423.5751.4071YP-1838.5110.1430.5750.203247.889.2328.3656.4090图2 黄连饮片外部、内部颜色总色值数据聚类分析图由图2可见，若将18批黄连饮片按颜色聚类成2类，则YP-14、YP-16是第1类；YP-8、YP-9、YP-11、YP-12、YP-17、YP-18、YP-1、YP-2、YP-3、YP-4、YP-5、YP-6、YP-7、YP-10、YP-13、YP-15是第2类。结合聚类分析数据和黄连饮片饮片生产实际，黄连饮片的颜色有一定的差异，主要集中在饮片的干燥环节，如果干燥时间过长，则颜色加深偏于棕褐色，总色值数

32、值将减少。因颜色大多仍是以描述性语言为主，本身存在一定的差异，故暂不从颜色上对黄连饮片2个等级进行区别：【黄连一级饮片】【黄连二级饮片】外表皮灰黄色或黄褐色；切面或碎断面鲜黄色或红黄色。3.黄连饮片外观物性特征-药屑杂质测定黄连饮片杂质的主要有4种类型：外源性杂质：泥沙、异物等；非药用部位：脱落的残留须根；加工过程产生：碎屑（药材粉末）；存贮过程产生：霉烂品、虫蛀品。必须对其饮片中混有的灰屑、药渣及可见异物进行测定。3.1试验方法 每批次黄连饮片均匀取样，每次取样100g，测定6次。通过捡选、过二号筛后杂质称重方法，测定其中所含杂质量，进行聚类分析。3.2试验结果 结果见表4和图3。表4 黄连

33、饮片外观物性特征-灰屑、药渣及可见异物测定饮片编号药屑杂质(%)(n=6)YP-10.47YP-20.43YP-30.59YP-42.26YP-53.23YP-60.39YP-70.53YP-81.47YP-91.97YP-101.20YP-111.24YP-121.50YP-130.84YP-140.68YP-150.45YP-161.39YP-171.06YP-180.51由表4可见，黄连饮片中药屑杂质（可见异物+通过一号筛灰屑）量在0.43%3.23%。图3 黄连饮片药屑杂质量聚类分析图由图3可见，若将18批黄连饮片按药屑杂质量聚类成2类，则YP-4、YP-5、YP-9是第1类；YP-1

34、、YP-2、YP-3、YP-6、YP-7、YP-13、YP-14、YP-15、YP-18、YP-8、YP-10、YP-11、YP-12、YP-16、YP-17是第2类。结合聚类分析数据和生产实际，制定如下：【黄连一级饮片】取样100g拣出杂质，过一号筛筛出药屑，合并称重计算。不得过1.0%。【黄连二级饮片】取样100g拣出杂质，过一号筛筛出药屑，合并称重计算。不得过4.0%。4.黄连饮片内在品质评价4.1水分测定4.1.1试验方法 参照2010版中国药典一部附录 H第一法的测定方法：取供试品3g；将扁形称瓶干燥至恒重。厚度不超过5mm，疏松供试品不超过10mm，精密称定，打开瓶盖在105干燥5

35、小时，将瓶盖盖好,移置干燥器中，冷却30分钟，精密称定重量。再在上述温度干燥1小时，冷却，称重。至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量。4.1.2试验结果 数据进行聚类分析，结果见表5和图4。4.2总灰分测定4.2.1试验方法 参照2010版中国药典一部附录 K项下总灰分的测定方法：测定用的供试品需粉碎，使能通过二号筛，混合均匀后， 取供试品3g，置恒重坩埚中，称定重量（精确至0.01g）， 缓缓炽热，注意避免燃烧，至完全炭化时，逐渐升高温度至580，使完全灰化并至恒重。根据残渣重量，计算供试品中总灰分含量。4.2.2试验结果 数据进行聚类分析，结果

36、见表5和图5。4.3浸出物测定4.3.1试验方法 参照2010版中国药典一部附录A项下醇溶性浸出物的热浸法测定方法：供试品需粉碎，使能通过二号筛，并混合均匀。取供试品约3g，精密称定，置250ml的锥形瓶中，精密加稀乙醇100ml，密塞，称定重量，静置1小时后，连接回流冷凝管，加热至沸腾，并保持微沸1小时。放冷后，取下锥形瓶，密塞，再称定重量，用稀乙醇补足减失重量，摇匀，冷浸，用干燥滤器迅速滤过，精密量取滤液25ml，置已干燥恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105干燥3h后，置于干燥器中冷却30分钟，迅速精密称定重量，计算浸出物的含量。4.3.2试验结果 数据进行聚类分析，结果见表5和图6。

37、表5 黄连饮片水分、总灰分、浸出物的测定(，n=3)饮片编号水分（%）总灰分（%）浸出物（%）YP-18.712.2729.14YP-29.412.1228.77YP-38.962.2030.94YP-49.411.9728.71YP-59.512.3732.02YP-610.151.7727.27YP-79.462.3728.53YP-89.252.3024.43YP-99.262.5327.33YP-1010.342.5729.56YP-117.342.8232.59YP-1210.542.5024.59YP-1310.122.5725.70YP-149.682.2028.66YP-151

38、0.292.4027.90YP-168.872.3026.26YP-1710.511.7028.33YP-1810.282.4229.59从表5可知，18批黄连饮片水分为7.34%10.51%，总灰分为1.70%2.82%，浸出物为24.43%32.59%。均符合中国药典2010年版一部增补版对黄连饮片的规定。图4 黄连饮片水分含量聚类分析图由图4可见，若将6批黄连饮片按水分含量聚类成2类，则YP-11是第1类；YP-6、YP-10、YP-12、YP-13、YP-15、YP-17、YP-18、YP-1、YP-2、YP-3、YP-4、YP-5、YP-7、YP-8、YP-9、YP-14、YP-16

39、是第2类。图5 黄连饮片总灰分聚类分析图由图5可见，若将18批黄连饮片按总灰分聚类成2类，则YP-6、YP-4、YP-17是第1类；YP-1、YP-11、YP-2、YP-3、YP-5、YP-7、YP-8、YP-9、YP-10、YP-12、YP-13、YP-14、YP-15、YP-16、YP-18是第2类。图6 黄连饮片浸出物聚类分析图由图6可见，若将18批黄连饮片按浸出物聚类成2类，则YP-3、YP-5、YP-11是第1类；YP-8、YP-12、YP-13、YP-16、YP-1、YP-2、YP-4、YP-6、YP-7、YP-9、YP-10、YP-14、YP-15、YP-17、YP-18是第2类

40、。结合聚类分析数据和生产实际，考虑到水分能通过干燥而控制，总灰分、浸出物可反映黄连饮片内在性质，对2个等级区别如下：【黄连一级饮片】水分不得过12.0%；总灰分不得过3.5%；用稀乙醇作溶剂，热浸法测定醇溶性浸出物不得少于25.0%。【黄连二级饮片】水分不得过12.0%；总灰分不得过3.5%；用稀乙醇作溶剂，热浸法测定醇溶性浸出物不得少于15.0%。4.4薄层色谱鉴别参考中国药典2010年版一部增补版黄连饮片项下规定，进行供试品溶液、对照药材溶液和对照品溶液的制备。4.4.1供试品溶液制备 取黄连饮片粉末（过二号筛）0.25g，加甲醇25ml，超声处理30分钟，滤过，取滤液作为供试品溶液。4.

41、4.2对照药材溶液配制 取黄连对照药材0.25g，同供试品溶液制备方法制成对照药材溶液。4.4.3对照品溶液配制 取盐酸小檗碱对照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。4.4.4固定相 高效硅胶G薄层板。4.4.5展开溶剂系统的选择 展开系统（中国药典2010年版）：环己烷-乙酸乙酯-异丙醇-甲醇-水-三乙胺（3:3.5:1:1.5:0.5:1) (对槽加等量氨水，预饱和20min)。展开系统（参考文献）：甲苯醋酸乙酯异丙醇甲醇水(631.51.50.3) (对槽加等量氨水，预饱和20min)。4.4.6黄连饮片薄层色谱鉴别 结果见图7。展开系统 118.黄连饮片YP-1Y

42、P-1819.黄连对照药材20.盐酸小檗碱对照品展开系统 118.黄连饮片YP-1YP-1819.黄连对照药材20.盐酸小檗碱对照品图7 18批黄连饮片薄层色谱图由图7可知，在紫外光灯（365nm）下检视，18批黄连饮片供试品色谱中，在与黄连对照药材色谱相应的位置上，显4个以上相同颜色的荧光斑点（Rf由大到小分别是a.黄连碱、b.表小檗碱、c.小檗碱、d.巴马汀、e.药根碱，其中药根碱由于含量低，斑点e非常模糊）；与盐酸小檗碱对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。说明18批黄连饮片薄层色谱指纹信息一致。4.5含量测定参考中国药典2010年版一部增补版黄连项下规定，采用一测多评法测定各批

43、次药材中表小檗碱、黄连碱、巴马汀和小檗碱的含量。4.5.1色谱条件及系统适应性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-0.05mol/L磷酸二氢钾溶液（50:50）（每100ml中加十二烷基硫酸钠0.4g，再以磷酸调节pH值为4.0）为流动相；检测波长为345nm。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于5000。结果见图8图11。图8 盐酸小檗碱对照品紫外吸收光谱图图9 盐酸小檗碱对照品液相色谱图图10 阴性样品液相色谱图图11 黄连饮片液相色谱图4.5.2对照品溶液的制备 取盐酸小檗碱对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含125g的溶液，即得。4.5.3供试品溶液的制备 精密称定黄连饮

44、片的粉末（过二号筛），置具塞锥形瓶中，分别精密加入甲醇-盐酸（100:1）的混合溶液50ml，密塞，称定重量，超声处理（功率250W，频率40kHz）30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液2ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，取续滤液，即得。黄连饮片含量测定 取18批黄连饮片粉末（过二号筛），照4.5.3供试品溶液制备项下制备，精密吸取供试品溶液10l，注入液相色谱仪，测定，并进行聚类分析，结果见表6和图12。表6 黄连饮片含量测定结果(，n=3)饮片编号含量(%)表小檗碱黄连碱巴马汀前三者总量小檗碱YP-10.861.531.493.885.88

45、YP-20.861.541.493.895.79YP-30.721.341.523.575.70YP-40.871.531.403.805.89YP-50.871.541.423.836.07YP-60.851.461.403.725.57YP-70.831.401.473.705.92YP-80.711.411.313.435.16YP-90.651.291.413.355.10YP-100.971.481.604.066.15YP-110.901.711.574.186.33YP-120.761.171.313.244.83YP-130.611.111.172.894.74YP-140.8

46、01.261.383.445.13YP-150.961.571.484.015.83YP-160.691.161.142.994.40YP-170.801.261.343.405.20YP-180.851.201.313.154.65从表6可见，按干燥品计算，以盐酸小檗碱（C20H18ClNO4）计，18批黄连饮片含小檗碱（C20H17NO4）为4.40%6.33%，含表小檗碱（C20H17NO4）、黄连碱（C19H13NO4）和巴马汀的总量为2.89%4.18%。其中YP-12、YP-13、YP-16、YP-18为不合格样品。图12 黄连饮片中小檗碱及三种生物碱含量聚类分析图由图34可见，若

47、将18批黄连饮片按小檗碱及三种生物碱含量聚类成2类，则YP-5、YP-10、YP-11、YP-1、YP-2、YP-3、YP-4、YP-6、YP-7、YP-15是第1类；YP-8、YP-9、YP-12、YP-13、YP-14、YP-16、YP-17、YP-18是第2类。结合聚类分析数据和生产实际，考虑到生物碱含量是反映黄连饮片内在性质的重要指标，对2个等级区别如下：【黄连一级饮片】按干燥品计算，以盐酸小檗碱计，含小檗碱不得少于5.5%，含表小檗碱、黄连碱和巴马汀的总量不得少于3.6%。【黄连二级饮片】按干燥品计算，以盐酸小檗碱计，含小檗碱不得少于5.0%，含表小檗碱、黄连碱和巴马汀的总量不得少于

48、3.3%。5.黄连饮片分等研究将黄连饮片质量标准研究中所有数据进行汇总，按照定性、定量描述指标归类，按照等级划分指标逐个分类，将具有等级区分度的定量描述指标列表，详见表7。表7 黄连饮片具有等级区分度的定量描述指标饮片编号长度（mm）(n=50)宽度（mm）(n=50)厚度（mm）(n=50)药屑杂质(%)(n=6)总灰分（%）(n=3)浸出物（%）(n=3)表+黄+巴总量(%)(n=3)小檗碱含量(%)(n=3)确定等级YP-123.906.542.370.472.2729.143.885.88一级YP-221.865.872.570.432.1228.773.895.79一级YP-324.

49、865.522.870.592.2030.943.575.70二级YP-420.845.262.852.261.9728.713.805.89二级YP-523.775.903.463.232.3732.023.836.07二级YP-624.217.132.240.391.7727.273.725.57一级YP-734.876.882.740.532.3728.533.705.92一级YP-827.626.412.621.472.3024.433.435.16二级YP-925.616.763.191.972.5327.333.355.10二级YP-1039.226.562.291.202.572

50、9.564.066.15二级YP-1119.365.982.691.242.8232.594.186.33二级YP-1235.936.853.191.502.5024.593.244.83不合格YP-1328.257.352.640.842.5725.702.894.74不合格YP-1421.795.811.960.682.2028.663.445.13二级YP-1524.756.542.130.452.4027.904.015.83一级YP-1628.566.462.381.392.3026.262.994.40不合格YP-1718.375.522.381.061.7028.333.405.

51、20二级YP-1830.067.152.450.512.4229.593.154.65不合格 一级饮片：YP-1、YP-2、YP-6、YP-7、YP-15 二级饮片：YP-3YP-5、YP-8YP-11、YP-14、YP-17 不合格饮片：YP-12、YP-13、YP-16、YP-18 一级饮片与道地药材、精湛的加工技术两者密不可分；YP-16、YP-18等外观好、片型大，但成分含量低，属于“先天不足”；YP-5、YP-11等外观差、片型较小、杂屑多，成分含量很高，属于“后天不足”。综述：中药黄连综合利用概况1.中药黄连的研究概述黄连为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franc

52、h.、三角叶黄连Coptis deltoidea C.Y.Cheng et Hsiao或云连Coptis teeta wall.的干燥根茎，分别习称“味连”、“雅连”和“云连”1。 多年生草本，喜生长在高山阴湿冷凉的山区，在海拔1000至1800m之间，主要为栽培品，主要分布于我国的四川、重庆、湖北、陕西、云南、贵州等省。崔学军2综述了黄连的有效化学成分，表明黄连根茎均含多种异喹啉类生物碱，小檗碱为黄连的主要成分，含量约为5%8%。不同的黄连的有效成分也不同，迄今已得数十种生物碱类成分。黄连根茎含小檗碱，表小檗碱，黄连碱，甲基黄连碱，小檗红碱，掌叶防己碱，非洲防己碱，药根碱，木兰花碱，阿魏酸，

53、黄柏酮、黄柏内酯；三角叶黄连根茎含小檗碱，表小檗碱，黄连碱，甲基小檗碱，药根碱，木兰花碱；云南黄连根茎含小檗碱，掌叶防己碱，药根碱，黄连碱，甲基黄连碱，木兰花碱。徐锦堂等3综述了黄连的药理作用，表明黄连具有抗菌作用、抗病毒作用、抗心律失常作用、治疗充血性心力衰竭作用、对于消化系统具有利胆作用、抗腹泻作用、对胃粘膜损伤和溃疡的保护作用、降血糖的作用、抗炎与免疫调节作用、抗肿瘤作用。2.黄连须研究概述黄连为毛茛科植物，其根茎供药用，附着于黄连上的细根，称为黄连须。黄连须过去则多弃去不用，近代研究人员陆续开始研究。在化学成分及含量方面，赵忠敬4经过测定其水溶性浸出物，发现净黄连须与黄连仅相差25%，并同时发