化学发光常见问题集锦107问

1、 Beckman Coulter ACCESSâ系列全自动微粒子化学发光免疫分析系统常见问题及答疑目录第一部分：化学发光基础知识 第1-17问第二部分：仪器应用部分 第18-74问第三部分：项目应用部分 第75107问第一部分：化学发光基础知识1 什么是化学发光，与放免、酶免比较有何不同？化学发光免疫分析（Chemiluminescence Immunoassay，CLIA）是将化学发光与免疫反应相结合，用于检测微量抗原或抗体的一种新型标记免疫测定技术。化学发光免疫分析比放射免疫，酶联免疫具有更高灵敏度，具备操作简便、快速的特点，易于标准化操作。且测试中不使用有害的试剂，试剂保存期长

2、，应用于生物学、医学研究和临床实验诊断工作，成为非放射性免疫分析法中最有前途的方法之一。（1）与放免（RIA）产品比较 与放射免疫试剂（RIA）比较，化学发光避免了放射性核素的污染以及对操作人员的伤害，大大缩短了反应时间，同时兼具高灵敏度的优势。 （2）与酶免（ELISA）产品比较 灵敏度与可测范围远远高于酶免产品，兼具ELISA法简便的操作方法与较短的反应时间。2 什么是标记免疫技术，它的三大要素是什么？ 将Ag或Ab用标记物(如荧光素、酶、放射性同位素、化学发光物质等)进行标记，在与标本中的相应Ab或Ag反应后，可以不必测定Ag-Ab复合物本身，而测定复合物中的标记物，通过标记物的放大作用

3、，进一步提高了免疫技术的敏感性。 三要素：通常在检测系统中会使用到一种叫标记物（labeling）的物质,常标记在抗体上通常会有一个分离（separation）的过程在最后读取信号前需要去仔细关注一下分析的模式（format） 3 标记免疫技术主要有哪几种？ 主要经历了四种标记免疫技术的发展：荧光素(Fluorophores) FIA放射性同位素(Radioisotopes) RIA酶(Enzymes) EIA化学发光物质 - CLIA4 ACCESS化学发光原理？分析方法及过程 ACCESS系统采用磁性微粒作为固相载体，以AMPPD作为发光剂，固相载体的应用扩大了测定的范围。以竞争法、夹心法

4、等免疫测定方法为基础。试剂包装采用特殊的设计，每个试剂包有5个小室分别把不同的试剂分开，减少了交叉污染，保证了检测质量。 、抗原抗体结合：将包被单克隆抗体的顺磁性微粒和待测标本加入反应管中，标本中的抗原与微粒子表面的抗体结合，再加入碱性磷酸酶标记的抗体，经温育后形成固相包被抗体-抗原-酶标记抗体复合物。 、洗涤、分离：在电磁场中进行3次洗涤，很快将未结合的多余抗原和酶标记抗体洗去。 、加入底物AMPPD发光剂：AMPPD被结合在磁性粒子表面的碱性磷酸酶的催化下迅速去磷酸基因，生成不稳定的中介体 AMPD。AMPD很快分解，从高能激发态回到低能量的稳定态，同时发射出光子，这种化学发光持续而稳定，

5、可达数小时之久。通过 光量子阅读系统记录发光强度，并从标准曲线上计算出待测抗原的浓度。 3 化学发光项目的免疫学原理？· 抗原、抗体特异性结合· 小分子采用(一步、二步)竞争结合法：一步竟争法：Total T4, Cortisol, T Uptake, Digoxin, Theophylline, Total T3二步竟争法: FT4, B12, Folate, FT3 大分子采用(一步、二步)夹心法：ßhCG， hTSH ，Ferritin， Prolactin ，PSA ， CEA， hFSH hLH IgE4 一步和二步分析法是怎么回事？同步和分步是按照：试

6、剂/样品加入的顺序，孵育的次数(步骤)，清洗分离的次数(步骤)来区分的，像一步分析法是试剂和样品同步加入，进行一次孵育一次清洗。像二步分析法是先加入样品进行孵育和清洗后再加入试剂，进行第二次孵育和清洗。5 什么是钩状效应（hook effect），如何判断及解决？免疫测定的实质是抗原抗体反应，抗原抗体反应是按一定的分子比例结合，当二者比例适中时，形成的免疫反应最强烈，形成复合物或检测的信号与所测的抗原或抗体成比例关系，但当抗原或抗体其中一者过量时，免疫反应将减弱，测定值呈现假性低值。 在化学发光中像二步分析法一般都能避免钩状效应，对于一步夹心法项目说明书中都提到了产生钩状效应的上限如人绒毛膜促

7、性腺激素的钩状效应值是100万mIU/ml.在实际工作中如遇到测定值与临床严重不符的结果要考虑到钩状效应，解决办法是稀释此样本。磁性微相载体，为抗原提高发光强度、快速达到稳定、持续发光。6 什么是嗜异性抗体？病人样品中可能自然产生一些针对动物免疫球蛋白的抗体(通常是鼠或羊)，一般来源于暴露于这些动物或接受过动物血清的治疗，分析的干扰：可以在双单克隆夹心法分析模式中引起假阳性，可以在单克隆/多克隆分析模式中出现假阴性。厂家在试剂生产中会加入封闭剂，封闭剂可以加在反应基质中或整合在试剂盒内：鼠 (鼠科类), 鸟 (鸟科类) 和羊蛋白，各个厂家生产的分析试剂都有可能会不同程度的受到任何一个病人血清的

8、影响！当遇到与临床不符的结果时要询问病史看是否有嗜异性抗体的干扰。7 什么是基质效应？基质是指的是样品中被分析物以外的组分。基质常常对分析物的分析过程有显著的干扰，并影响分析结果的准确性。目前最常用的去除基质效应的方法是，通过已知分析物浓度的标准样品，同时尽可能保持样品中基质不变，建立一个校正曲线（calibration curve）。8 稀释样品时稀释物不对为何有基质效应？我们在稀释样品时要考虑到基质效应的影响，稀释必须在适当的基质中进行，对于大多数测定而言，适当的基质就是零校准品，如果分析物稀释基质效应中所含成分浓度不正确，稀释回收率就不能对它们进行准确的测定，因为它们稀释后会与Bing

9、agent形成新的平衡。9 什么是AMPDD，化学结构，如何发光？AMPPD是一种金刚基二螺4，4二氧己烷的磷酸酯。经ALP水解生成一种不稳定的阴离子，该阴离子分解时持续发光。发光强度稳定，与ALP量成比例。化学式是4-甲氧基-4-（3-苯磷酸盐）螺-（1，2-二螺4，4二氧己烷-3，2-金刚烷10 试剂盒中有哪几种试剂，作用都是什么？有五个仓，以FRT4为例：R1a: 包被着链霉亲和素的Dynabeads* 顺磁性微粒溶于TRIS 缓冲液含有蛋白质( 鸟类)、表面活性剂、0.125% NaN3和0.125% ProClin* 300。R1b: 含蛋白质( 鸟类)、表面活性剂、< 0.1

10、% NaN3和0.1% ProClin 300 的TRIS 缓冲盐水。R1c: 含蛋白质( 鸟类)、表面活性剂、0.125% NaN3和0.125% ProClin 300 的TRIS 缓冲盐水。R1d: 三碘甲状腺原氨酸- 碱性磷酸酶( 牛) 结合物溶于TRIS 缓冲液 含蛋白质( 鸟类)、表面活性剂、< 0.1% NaN3和0.1% ProClin 300。R1e: 结合了生物素的小鼠单克隆抗甲状腺素(T4) 溶于TRIS 缓冲液含蛋白质( 鸟类和鼠类)、表面活性剂、0.125% NaN3和0.125% ProClin 300。以该测试项目反应原理说明：Access Free T4

11、测定是两步酶免法测定。将结合了生物素的单克隆抗甲状腺素(T4)抗体、样本、缓冲蛋白溶液以及包被着链霉亲和素的固相加至反应管中。在这首次温育过程中，结合了生物素的抗T4 抗体与固相及样本内的游离T4 相结合。在反应管内温育完成后，结合在固相上的物质将置于一个磁场内被吸住，而未结合的物质被冲洗除去。然后，将缓冲蛋白溶液及三碘甲状腺原氨酸(T3)- 碱性磷酸酶结合物添加至反应管中。T3- 碱性磷酸酶结合物与空缺的抗T4 抗体结合位点结合。在反应管内温育完成后，结合在固相上的物质将置于一个磁场内被吸住，而未结合的物质被冲洗除去。然后，将化学发光底物Lumi-Phos* 530 添加到反应管内，由照度计

12、对反应中所产生的光进行测量。所产生光的量与样本内游离T4 的浓度成反比。样本内分析物的量由所储存的多点校准曲线来确定。11 如何看待说明书中的方法局限性？此章节的内容极为重要，实验室工作人员必须对其进行理解，因为它关系到实验室能否对样本分析结果进行正确的解释。在解释结果时，需参照该病人的整体临床情况，包括：症状、临床病史以及其它测试所得的数据和其它相应的信息。12 如何理解最高可报告值？当样品浓度高时，可以报告大于最高校准品值的结果，有些试剂生产商的的测定系统通常用亮点调整来代替完全校准，这样的话他们可报告范围是一个拟合而出的最高水平（而非实际测定值）。而在ACCESS检测系统中，用户自己创建

13、了标准曲线，当该标准曲线意境通过并且质控检测被接受时，就可以证实其可报告的上限。当样本分析所得的RLU值高于最高校准品时，以样本结果大于最高校准品值的形式报告，多数实验室对大多数测定项目的分析结果使用这种直接报告模式，如果需要获得确切的测定值，则需要进行机外人工稀释并重新分析样本。13 如何理解最低可报告值？所有的定量测定在曲线的下端通常都有一个零标准，该标准允许计算结果低至零，当测定结果越接近零时，测定结果就越不那么精确。在说明书中给出了项目的检测最低下限，建议以低于该下限来报告结果。14 什么是分析灵敏度？分析零敏度通常是对标准曲线上的零点校准品距零值的2SD值范围来进行测定计算的（而SD

14、值是将零校准品作为未知浓度样品经多管检测后计算均值所得）15 什么是功能灵敏度？ 功能灵敏度(Functional sensitivity)为<20%CV时所能检测到的最低极限浓度，它反映在实际样品检测时所能达到精确定量的检测极限。16 如何理解说明书中的稀释回收率？稀释回收率与稀释线性不不完全是一回事，但是二者可用同一个研究方式来检验，要进行稀释回收率测定首先用户需要选取一个已知浓度的病人样本，在分析项目的线性范围内对其进行多点稀释后进行检测，如果所测得结果与最初的样本稀释系数结果相匹配，那么就验证了稀释回收率与检测线性范围。稀释线性与回收率的区别在于，将一组分析物校准品当未知样品进行

15、分析，来对其检测线性范围进行验证。17 现在ACCESS检测系统在市场上有哪几种机型？化学发光仪系列：ACCESS、ACCESS2、DXI600（速度200速，50试剂位）、DXI800（速度最快达400速）生化免疫一体机系列：DXC00i（DXC600+CTA+ACCESS2）、DXC880i(DXC800+UCTA+DXI800)第二部分：仪器应用部分18 我想开展一个新项目如IL-6，详细程序是什么？首先在发光项目速查手册（或说明书）中查到该项目订货信息：试剂A16369定标液A16370质控品A16371稀释液*S0或样品稀释液 A（81909）Ø 激活IL-6：主菜单下按F

16、8-系统设置；按F2-项目；在项目列表中找到IL-6（210）在Enabled打上对勾选择打开按F2-单位选择；将光标点到所需设置样本类型处，按下拉框后出现单位列表；选择所需单位，按F1确认；将光标右移到有效位数处，可输入“1”、“2”、“3” 表示小数点后的位数；按Back-主菜单注意：在仪器和中文电脑上选择的项目单位必须一致，才能保证结果准确Ø 在主菜单按F5定标再按F5定标设置按F1增加定标液当出现对话框后，扫描定标液的条形码（或手工输字符）按OK确认。Ø 然后加载试剂，定标即可。19 反应管最多加入多少？在ACCESS与ACCESS2上一次最多加入3盒，共294只试

17、管，切记放RV管架之前要检查是否有松动的RV管。DXI800一次最多可加入2袋（2000只），注意将管均匀分散。20 装载基质液注意什么，有何影响？ 提前18小时将需更换的新基质置室温预温，否则会造成光量子值偏低，进而影响有些结果（夹心法）值偏低而有些结果（竞争法）偏高。21 装载试剂注意什么,有何影响？ 装载试剂前须将试剂轻轻倒转混匀，使灰色仓均匀浑浊后（尤其注意粘附在壁上的试剂）装载，否则使结果偏低，但一旦开瓶使用后不可再混匀22 试剂可以在运行中装载吗？试剂可以在仪器运行中加载，选择试剂加载申请后，仪器会有提示剩余多长时间可进行加载，这时仪器会将正做测试的试剂处理完后允许加载。23 仪器

18、在运行的时候，为什么有些试剂盒上面有一个小锁的标志？这表明仪器正在使用这盒试剂，不能更换该盒试剂24 我想知道某个项目在不同单位之间的换算系数，如何查找？更换该项目的单位后，定标曲线里面的浓度值相应会发生变化，可以记录不同单位下高浓度定标点（如S4,S5点）的数值进行换算。25 主探针上的超声发射装置有什么作用？超声装置的作用：混匀试剂、混匀RV内容物、检测样本液面、清洁主探针26 为什么在装载新试剂包前需上下颠倒混匀？在装载新的试剂包前应轻轻地上下颠倒混匀，这样可去除试剂包顶部粘附的磁性粒子。27 基质液更换的注意事项？注意避免污染基质液 - 不要让基质液瓶中的管道及基质液瓶盖的内表面接触到

19、任何物体的表面避免使用有滑石粉的手套基质液装上机器前，必须放置在室温平衡18个小时.基质液开瓶后效期为14天28 为什么在打开ACCESS2的仪器外盖前需要先关闭效用检测功能？即使ACCESS2仪器的外盖打开后，效用检测功能 (如果被打开) 也可自动运行。在检查系统液路模块时，这将导致危险。任何时候，在打开仪器外盖时，应先关闭效用检测功能.29 什么时候需要清除病人结果？如果您的实验室要重复使用同一样号或您发现您的系统软件反应明显变慢，您可以从数据库中清除病人的测试结果。您可把软件设置成自动完成这项工作。30 为什么在装载新试剂包前需上下颠倒混匀？在装载新的试剂包前应轻轻地上下颠倒混匀，这样可

20、去除试剂包顶部粘附的磁性粒子。31 有些项目定标液有时里有两张卡（白卡和黄卡），应该用那一张？ 这种情况是有些项目在升级初期时，定标液里配两张卡可以用于定标未升级项目和已升级项目，以雌二醇为例说明：批号>800000的试剂名称改为E2;批号为722861以上的定标液里面有两张卡，黄卡用于E2（243）,白卡用于Estrdl（203）以下项目也属于此情况：游离T3、游离T4、生长激素、甲状腺球蛋白抗体、癌胚抗原。详细说明请参阅试剂盒中的说明。32 hTSH 定标液里有三张卡，如何使用，有何区别？ 该测定能提供第三代( 超敏hTSH) 和/ 或第二代(快速hTSH) 的结果。l Fast h

21、TSH测定的一个APF修改新的检测ID为246测试名为fTSH2，修改后的两种版本的ACCESS FasthTSH protocol协议都将提供校准卡.测试名测试名检测号所用校准卡颜色AccessFasthTSH（modified） fTSH2246蓝Fasth TSH Fast hTSH206黄HYPER hTSH TSH183白快速hTSH与hTSH区别： 快速hTSH hTSH 样本量l 55 110 反应时间（分钟） 20 45 分析灵敏度uIU/ml 0.01 0.00333 PSA和fPSA定标液里有两张卡，如何选择，有何区别？Access PSA 校准品 对PSA 可以提供Hyb

22、ritech （白卡）和 WHO（黄卡） 两种溯源定标，供用户自由选择。Hybritech 校准：Access Hybritech PSA Calibrators 内的分析物可溯源至生产商的工作用校准品。WHO校准：通过与一组标准化为PSA (WHO 96/670)第一国际标准品(1st IS)进行比较，对原参考校准品Access Hybritech PSA Calibrators 内的分析物进行溯源。Hybritech PSA 检测范围： 0.008-150ng/ml 参考范围0-4ng/mlWHO PSA 检测范围： 0.008-121ng/ml 参考范围0-3.1ng/ml34 TnI定

23、标都应该注意什么？ 注意收到TnI定标液后即冷冻在-20或-20以下环境中，使用前要轻轻倒转以彻底混匀成分，防止形成气泡，每次使用完后放在2-8（稳定期可维持60天），不要再冷冻已打开的小瓶。请注意计算TnI定标液使用量，S0与S1点定标液都要重复四次，所以计算定标量： 死腔量+样本量×4 其他S0与S1都要重复4次的项目还有：E2及Prog定标液S0 重复4次，S1重复3次。35 样本值如果超出线性范围，该如何稀释样本？具体请查阅“发光项目速查”，“稀释液”部分，样本稀释分为5种：冲洗缓冲液（如TBhCG2，DHE-S）, S0或样本稀释液 A（81908）,S0（有货号），S0,

24、样品稀释液A（81908）,请按照说明使用正确的稀释液，否则因基质效应会造成实际结果偏差。36 结果后的异常信息注释如何看？ 详细请参阅SOP中异常结果信息注释部分，现就几种常见错误信息代码进行解释：（1）UNR 和 IND 是因为该样本光量子值超出S0或S5（定标液最高点）的光量子值Access Classic Access 2, SYNCHRONLXi, or UniCel DxI 800 UNR: For sandwichassays, which use positive slope curves, the result is at the low dose end of the cu

25、rve (S0) and cannot be distinguished from a system failure because the relative light unit (RLU) reading is too low. For competitiveassays, which use negative slope curves, the result is at low end of the dose curve (S0) and cannot be distinguished from a system failure because the RLU reading is to

26、o high. IND: For sandwichassays, which use positive slope curves, the result is at the low dose end of the curve (S0) and cannot be distinguished from a system failure because the RLU reading is too low. For competitiveassays, which use negative slope curves, the result is at either: The highend of

27、the dose curve and cannot be distinguished from a system failure because the RLU reading is too low or The lowend of the dose curve and cannot be IND: For competitiveassays only, which use negative distinguished from a system failure because slope curves, the result is at highend of the dose the RLU

28、 reading is too high. curve (S5 or highest calibrator) and cannot be distinguished from a system failure because the RLU reading is too low. ACCESSACCESS2、DXI800UNR：对于夹心法，样本RLU结果太低在S0RLU值边缘以致仪器不能与系统错误区分。 对于竞争法：样本RLU结果太高在S0RLU值边缘以致仪器不能与系统错误区分。对于夹心法，样本RLU结果太低在S0RLU值边缘以致仪器不能与系统错误区分。 对于竞争法：(1)样本RLU结果太高在

29、S0RLU值边缘以致仪器不能与系统错误区分。 （2）样本RLU结果太低在S5（定标液最高点）RLU值边缘以致仪器不能与系统错误区分。IND：只对于夹心法，样本RLU结果太低在S0RLU值边缘以致仪器不能与系统错误区分。37 如何计算ACCESS、ACCESS2样本量尤其是定标液的量？总样本量=A样本检测量+B样本容器死腔量+C样本主探针多吸量A样本检测量是指每一个请求测试所需的样本吸取量的总和。要找到每一个检测项目相应的样本吸取量，请查阅化学发光项目速查 吸样量部分。B样本容器死液量是指在容器中的不能被仪器分样吸取的样本量。2ml样品杯死液量为150ul 0.5ml样品杯死液量为80ulC样本

30、主探针多吸量为 20 µL 或者 5% 的检测样本量，哪一个数值较大就以哪一个进行计算。总定标液量= A样本检测量×重复次数+B样本容器死腔量+C样本主探针多吸量请注意：一般项目重复次数为2，计算TnI、E2定标液使用量，S0与S1点定标液都要重复四次， Prog定标液S0 重复4次，S1重复3次。38 如何计算DXI800样本量尤其是定标液的量？计算足够的样本量总样本量=A样本检测量+B反应管死液量+样本主探针多吸量+样本容器死液量 A样本检测量是指每一个请求测试所需的样本吸取量的总和。要找到每一个检测项目相应的样本吸取量，请查阅化学发光项目速查 吸样量部分。B反应管死液

31、量是指在反应管中的不能被仪器使用的样本量。对于每 500 µL 样本检测量，其反应管死液量是 60 µL。C样本主探针多吸量为 20 µL 或者 5% 的检测样本量，哪一个数值较大就以哪一个进行计算。D样本容器死液量是指在容器中的不能被仪器分样吸取的样本量。2ml样品杯死液量为150ul 0.5ml样品杯死液量为80ul 举例肌钙蛋白检测的样本吸取量是 40 µL，CK-MB 检测的样本吸取量是 55 µL。以下举例说明如果您使用 2 mL 样本杯对上述两个项目进行检测，应该如何计算总的所需样本量。A请求测试的总的样本吸取量(40 µ

32、L + 55 µL) 95 µLB对 A 中数字，每 500 µL 需要 60 µL 60 µLC20 µL 或 5% 的 A 中样本量数字(5.5 µL)，使用较大的一个数字进行计算20 µLD 2 mL 样本杯的死液量 (见表 A-2)150 µL总的所需样本量325 µL总定标液量= A样本检测量×重复次数+ B反应管死液量+样本主探针多吸量+样本容器死液量请注意：一般项目重复次数为2，计算TnI、E2定标液使用量，S0与S1点定标液都要重复四次， Prog定标液S0 重复4次，

33、S1重复3次。39 、ACCESS2 和DXI800 架号设置，规格不同为什么不能混用？n 对于ACCESS2 样品架n 为了容纳大小不同的样品容器，仪器使用三种不同类型的样品架： 13 mm(用于12 mm 和13 mm 样品试管) 16 mm 抬升( 用于16x75 mm 样品试管) 16 mm(用于16x100 mm 样品试管)系统扫描样品架条形码标签，确认样品架上样品容器的类型，然后系统可以此确定吸入样品时使用合适的移液器插入深度。注意事项：仅可将样品容器安装在贴有正确条形码编号的样品架上。Access 2.0 mL/13 mm 样品杯 边缘：暗绿色 样品架编号：1 - 99 or 4

34、00 -499 (仅400 - 499 带有此图标) 死体积：150 µL 样品架：13 mmn 对于DXI800应按如下程序进行管类型设置。主菜单下按F8-系统设置；选择F1系统设置 选择F8架子号设置 选择F2 Add Racks 选择相应架子号和相应规格样品杯、试管。40 定标液储存条件注意事项？ HCG：-20度保存，每次使用间复溶 Folate/RBC Folate：开瓶前-20度保存 Free T3：开瓶前-20度保存 Progesterone：开瓶前-20度保存 Prolactin：开瓶前-20度保存 注意：在定标液盒外表有一温度计标志，提示保存条件。41 定标液为冻干

35、粉的一些注意事项？ 如 CK-MB Insulin T Uptake冻干粉定标液复溶：复溶水的水质 加样容器的准确度 加样的技术 混匀/旋转复溶后定标液保存： 使用合适的冷冻保存试管 正确标签 无霜冰箱保存42 有些项目定标失败后如何处理？Ø 当定标失败时，有以下几种常见的错误代码：（1） Insuff Data 由于定标液不够或仪器错误导致某一点浓度定标测试被取消；（2） Not Fit测得足够数据，但软件不能将其拟合为曲线；（3） Max Iter软件能拟合曲线，但不能得出最佳拟合；（4） Bad Fit软件拟合到最佳曲线，但曲线未通过软件的精密度协议文件；（5） CV std

36、0重复测试的CV%超出范围；（仅用于TU）Ø 错误原因分析原则及步骤（1 ） 检查错误信号的内容，看是否有“QNS”，或系统错误而 导致定标失败；（2 ） 观察各点结果精密度；如果精密度良好，错误有可能来自 某些操作失误；再观察RLU值是否接近上一次对应的值；（3 ） 检查是否作了每日保养及每周保养；（4 ） 观察定标得到的目标值浓度是否接近印在定标卡上的值， 如果不是，则可通过系统设置来修改对应的值；（5 观察RLU值是否随曲线平滑上升（夹心法）或下降（竞争法）， 如果不是，须检查是否把定标液位置摆错，或者某一浓度的定 标液受到污染；（6） 如果定标曲线非常平坦，而且RLU值很低（

37、夹心法）或RLU 值很高（竞争法），表明使用了错误的定标液或试剂盒；（7） 如果定标曲线平坦，且不论夹心法或竞争法，RLU值均很低， 则须检查发光剂是否用完或发光剂液路是否正常；（8） 如果定标结果精密度较差，原因可能是： 缓冲液或发光剂液路内混入气泡； 采样针太脏； 清洗转盘混匀功能故障； 超声系统故障； 与排液或吸液有关的泵或阀门故障。43 化学发光项目是否可以使用血浆等其他样本类型，有无影响并不是所有的免疫项目都可以使用血浆，具体请参阅项目说明书或项目速查表，样本类型：描述，如FT3可以使用血清、血浆（H）肝素抗凝，对同一患者必须使用同一样本类型监测。44 样本溶血、脂血对化学发光结果项

38、目有影响吗？样本溶血、脂血、黄疸对化学发光项目同样是有影响的，不过影响机制与影响比色等项目不同。如溶血对胰岛素影响是因为样本溶血后红细胞释放一种胰岛素灭活酶而使样本中胰岛素浓度减少。不同项目对样本禁忌要求不同，具体请查阅“化学发光项目速查 样本禁忌内容”。45 样本分析前处理都应该注意什么?有以下几点需特别注意：一、 采血管质量，有无失效，添加剂是否适当，采血员专业水平二、 采血量是否适当，是否及时进行混匀，血浆应该8-10次，血清应该5次。三、 血清凝固时间是否充足，离心是否彻底，离心机是否定期校正。四、 贮存条件是否适当。46 对于一些测试发生错误如何分析？ 不同项目发生错误应该按照相应方

39、法去重点分析原因。 l 2步分析法 对传送位置/调整非常敏感l 需预处理的项目，如： 衣原体(Chlamydia) 红细胞叶酸盐(RBC Folate) 尿可的松(Urine Cortisol)l 需要稀释的项目， 对精密泵较敏感。如： AFP (1/20) Cortisol (1/9.6) Dil-TotBHCG(1/200) Myoglobin (1/50) Rubella IgG (1/10) Toxo IgG (1/40) Most ID/BV assaysl 高光量子值的测试，如： CK-MB Myoglobin Troponin-I 所有感染性疾病项目l 对磁性微粒子粘度敏感的项目

40、，与试剂盒混匀/调整有关。如： Vit B12 Chlamydia RBC Folate/Folate47 结果差异处理流程？（1） 是否仅发生于病人标本结果？ 是否同时发生于病人标本与质控标本？（2） 只发生于病人标本时 ：检查病人标本处理过程（3） 同时发生于病人标本/质控标本时：检查其它项目结果是否差异？ 如果是，检查仪器性能状态（4）如果只发生于1种项目，首先须排除该项目敏感的仪器因素（5）如果排除仪器因素后，进入该特定项目故障排除流程48 为何有的项目定标通过后试剂盒处仍显示红色未定标？ 这种情况一般发生在TSH、PTH、PSA等有两种测定模式的项目，下面以PSA为例说明：在PSA定

41、标液盒中有Hybritech （白卡）和 WHO（黄卡） 两种溯源定标，供用户自由选择。如选择白卡进行定标，请将PSA-Hybritech （Test 170）测试激活，将PSA-WHO（Test 231）项目关闭，如两种测试均激活，即使定标通过后试剂盒仍显示红色。49 ACCESS、ACCESS2的耗材能在仪器运行中加载吗？对于清洗缓冲液、废液、RV管、试剂可以在运行中随时加载，而底物、RV废物袋只有在处于Ready时才能更换，在运行前请检查并加足耗材。50 如何查阅仪器的报警信息？ 对于ACCESS，请按eventlog键按钮查询仪器的所有报警信息。 对于ACCESS2、DXI800 事件

42、日志（Event log）选择来显示事件日志屏幕以获得关于Access 2、DXI800系统所中发生事件的信息。l 黄色 系统产生了一个注意事项事件。l 红色 系统产生了一个警告事件，提示一个严重的故障或错误情况的发生这些信息包括： 可能引起事件的原因 故障排除指示的要点 与详细步骤的连接。51 暂停（Pause）和停止（Stop）键有何区别？u 暂停选择该按钮来暂停仪器，系统在完成对当前样品的移液后会停止移液。已在进行中的样品将继续处理。u 停止选择该按钮停止仪器。系统停止运行并取消任何进行中的检测。50 在保养中何时运行特殊清洁例行程序？如果使用Access 2、ACCESS、DXI800

43、系统来处理维生素B12（因试剂粘度较高）分析，那么在每日工作结束后或者仪器在八小时或更长时间内不处理样品时，都应运行特殊清洁例行程序。51 样品针通过什么原理检测样本中的凝块？装有压力检测器的仪器通过监测吸取样品所需的压力，能够在吸取样品时探测主探头内的凝块。若吸取样品所需的压力超出了可接受的限度，那么检测将被取消并标记CLT( 凝块) 重大标记，且会记录下此事件。若同一个样品连续发生了两次该错误，任何该样品未完成的检测将被取消。若同一个样品连续发生了五次该错误，那么当正在运行的检测分析完成时，系统将中止预定任何其它检测并进入未就绪模式。操作人员此时必须初始化系统并且检查，清洁或必要时，替换探

44、头。52 如何使用Reflex（追加测试）？ 以Dil-hCG2为例说明方法： 主屏幕下F8设置F5追加测试F4添加测试Reflext Test ：选择需追加测试如Dil-hCG2，在Condition中编辑： ThCG2=OVR，点F1，在Enable处打勾即可。对于DXI800须进行保留体积设置或反射体积设置。53 对于妇产医院经常对hCG经常先做152+,如测定值小于1000再自动进行15+这时如何设置条件?这时条件设置公式为:Dil-hCG<=100054 如何设置双重条件，如PSA在4-10灰区时自动进行FPSA的反射测试？Reflex Test 为 free PSA 条件设置

45、为：PSA-Hyb>=4 AND PSA-Hyb<1055 DXI800中保留体积“Reserve Volume Setup”和Reflex Volume Setup 是怎么回事？系统可以设置为吸取患者的额外体积和 QC 样品，以便系统产生反射检测、LIS 下载反射检测、再次检测或以后的 LIS 请求。 额外的体积被称为保留体积。 当系统设定为吸取保留体积时，将从所有患者和QC 样品中吸取标准的保留体积并放入保留体积样品架中。您可以在“Reserve Volume Setup”（保留体积设置）窗口中激活保留体积功能并设置吸取的样品数量。系统计算死体积和过量吸取，并吸取足够的样品以确

46、保全部保留体积足够检测使用。 如果检测要求的体积加保留体积之和不能满足一个反应容器，则所有的保留体积被注入一个或多个反应容器中。系统仅从用于保留体积的样品架上的样品容器中吸取保留体积。 您可以在“Rack ID Setup”（样品架编号设置）窗口中指定保留体积的样品架。 未指定为保留体积的样品架应该标注“非保留体积”标签。对于新版本（XP操作系统）的DXI800可以单独进行Reflex Volume Setup。56 DXI800的样品处理顺序？UniCel DxI 800 系统根据下列标准确定最佳处理顺序。系统首先处理优先级最高的样品。分装样品时指定优先级。在所有样品集分装后，校准品和保养样

47、品将被指定优先级。如果两个或更多的样品集拥有相同优先级，系统将先处理首先分装的样品。如果由于系统资源（如：试剂盒）不可用而导致高优先级的检测无法开始，那么低优先级的检测将先行处理。处理顺序标准：（1） STAT 样品（2） 校准品样品（3） 质控样品（4） 患者样品（5） 保养57 ThCG2（151+）与Dil-hCG2（152+）是怎么回事，如何选择？对于样本含量< 1000 mIU/mL 总hCG 的样本进行测定, 选择ThCG2（151）作为测试名。对于含> 1000 mIU/mL 总hCG 的样本进行测定，选择Dil-hCG2（152） 作为测试名。两种测定可用同一试剂盒

48、和同一定标曲线，定量测定含1000200000 mIU/mL的样本，选择Dil-hCG2测试。此测试使用ThCG2试剂盒。 当需要Dil-hCG2，系统自动用缓冲液稀释样本并从ThCG2 校准曲线上读取相应的剂量。这一系统通过乘以软件定义的稀释系数(200) 来计算最终测试结果。 AFP 与Dil-AFP也属此情况。58 如果遇到 ThCG2（151+）做出来结果提示> 1000 mIU/mL的标本，我使用Dil-hCG2（152+）重做，结果又提示< 1000 mIU/mL ，怎么办？答：手工稀释该样本（可按5倍、10倍、20倍等倍数）后上机使用ThCG2（151+）测试，然后换

49、算成原浓度结果。59 仪器上有哪些项目具有自动稀释功能？各自的稀释倍数是多少？答：有甲胎蛋白AFP（17倍），铁蛋白Fer（10倍），hCG（200倍）60 为什么其他项目无仪器自动稀释功能？主要有两方面的原因：一是大多数项目的检测范围很宽已能满足多数项目的临床诊断阈值。二是因为稀释基质效应的影响，并不是所有项目都适合用缓冲液稀释。61 有些项目升级时应该注意什么？为了使项目达到更好的性能，有些项目会升级，在升级后请注意：（1）对应最低软件、APF版本（2）测试代码的改变（3）对应定标液正确条码卡使用（4）参考范围的改变（5）样本量的改变。下面以甲状腺球蛋白抗体升级为例说明：甲状腺球蛋白抗体旧

50、新名称TgAbThgAb测试代号198227传送代号A68A93试剂货号33890A32898定标液货号33895A36920最低软件版本ACCESS（3.29） ACCESS2 （2.1） DXI800（2.01）最低APF版本ACCESS（） ACCESS2 （） DXI800（）参考值< 4.9 IU/mL<4 IU/mL标本用量（ul）201062 如何查看仪器系统版本及APF版本信息，有何用处？主屏幕下按F8F1F1 Assay Protocol File 如 1.10.5，对于较低版本就有可能找不到一些新升级的项目，这时需要多APF进行升级。63 能否经常改系统设定时间

51、，有无影响？这是不对的，如频繁的修改系统时间会导致系统软件文件的丢失，造成项目错误。64 为何有的仪器不能编程一些样本号，如101 、102 报占用？这有可能是因为这些样本号被用于maintenance 请求，要在仪器处于stanby时，无其他申请，仪器与LIS通讯关闭，做好数据库备份后清除该号，具体请咨询工程师。65 如何运行系统检测？系统检测作为每周保养内容，运行系统检测(system check)可以检查仪器的清洗、混匀、底物分配、稀释等功能，在质控结果不好时也应不定期运行系统检测。 在一个样品架上装载4个2毫升样品杯，分别加入以下液体： 1号杯：未稀释系统检测液 2号杯：清洗缓冲液 3

52、号杯：空样品杯 4号杯：1：501稀释系统检测液（20ul系统检测液加10ml 清洗缓冲液） 操作步骤如下： 在主菜单下选择F6-保养程序 选择F1-装载/卸载样品架 输入样品架号 把样品架放入转盘 选择F1-完成 选择F3-系统检测 选择F1-系统 选择F1-开始（运行过程需32分钟） 清洗程序完成后，选择F1-装载/卸载样品架，取出样品架， 选择F1-完成66 如何查看、分析系统检测数据？ 查看F6Maintenance-F2System Checks-F2 System Check Data 进行查看相应数据。系统检测结果范围： 1号杯：CV of Washed RLUs must be

53、 £12% Mean of RLUs 5000-20000 3号杯：CV of Substrate RLUs must be £5% Mean of RLUs 5000-9000 4号杯：CV of Unwashed RLUs must be £2% Mean of RLUs 4000000-8000000 Mean Washed RLUs must be ³mean Substrate RLUs Wash Efficiency must be £5PPM系统检测结果分析清洗检测（washed）方法：主采样针向10个RV中各加入150ul系统检

54、测液，对各RV进行3次清洗循环。然后在各RV加入200ul发光底物，最后检测其发光值。如果检测结果超出范围，需检查RV的清洗与混匀系统功能清洁检测（clean）方法：主采样针向5个RV中各加入150ul清洗缓冲液，对各RV进行3次清洗循环。然后在各RV加入200ul发光底物，最后检测其发光值。检测结果RLU值不能有明显衰减。如果有衰减则说明由于吸液针清洗不足导致交叉污染。发光底物检测方法：在10个RV中不加入任何样本，也不作清洗。直接向各RV加入200ul发光底物，然后测定其发光值。检测结果的mean，SD，CV%由后6个RV 计算得出。检测结果超出范围说明需检查发光底物分配系统或发光检测计。未清洗检测（unwashed）方法：主采样针向10个RV中各加入50ul 1：501倍稀释的系统检测液，该RV不作清洗。然后向各RV加入200ul发光底物。检测结果超出范围，说明系统检测液稀释比例不当或主采样针精密度需做检查。清洗效率由Unwashed，Washed，Subst