液相色谱-串联质谱法快速测定人血浆中利培酮的浓度

1、液相色谱-串联质谱法快速测定人血浆中利培酮的浓度                            作者：温预关，廖日房，曾转萍，张明  【摘要】  目的 建立测定人血浆中利培酮浓度的反相高效液相串联质谱电喷雾检测法。方法 以迪马C18反      

2、60;  作者：温预关，廖日房，曾转萍，张明;【摘要】; 目的 建立测定人血浆中利培酮浓度的反相高效液相串联质谱电喷雾检测法。方法 以迪马C18反相柱（ 4.6 mm×150 mm，5 m）为色谱柱，流动相为甲醇5 mmol·L-1甲酸铵（体积比9010），流速为1 mL·min-1，柱温：25 ，以醋酸乙酯二氯甲烷（体积比41）为提取剂。样品经电喷雾离子源正离子化后，通过三重四级杆串联质谱仪，采用选择反应监测对利培酮（m/z 411191）和内标拉莫三嗪（m/z 256145）进行测定。结果 利培酮的高（50 g·L-1）、中（25 g

3、83;L-1）、低（1 g·L-1）3个浓度的方法回收率均大于96%，提取回收率均大于85%，日内（n=5）、日间（n=3）RSD均小于10%；最低检测浓度为0.5 g·L-1；线性范围为：0.5100 g·L-1,回归方程为F=55.9562-0.3423，r=0.999（n=8）。结论 该方法灵敏、准确、简单、快速，可用于临床血药浓度监测和药动学研究。 【关键词】; 利培酮；血药浓度；拉莫三嗪；反相高效液相串联质谱电喷雾法Abstract:Objective To set up a rapid analysis method of risperidone in

4、 plasma by liquid chromatographyelectrospray ionizationtandem mass spectrometry (LCESIMS/MS).Methods Risperidone was extracted from plasma with ethyl acetatedichiloromethane (41).The residues were analyzed on a Dikma diamonsil C18 column (4.6 mm×150 mm，5 m) with the mobile phase consisted of me

5、thanol and 5 mmol·L-1 of ammonium formate (9010).The flow rate was 1 mL·min-1 and column temperature 25 .An Agilent 6410 triple quad mass spectrometer system equipped with an electrospray ionization iontrap source was used as the detector.The system was operated in the selected reaction mo

6、nitoring mode transmitting m/z 411191 transitions for both the analyte and the lamotrigine internal standard.Results The average recovery and extraction recovery for risperidone were more than 99.6% and 85%，respectively.The values for withinday and betweenday precision and accuracy were less than 10

7、%.The calibration curves were linear over a concentration range of 0.5-100 g·L-1(r = 0.998,n=8）.The limits of detection for risperidone was 0.5 g·L-1 . Conclusion The method provides a sensitive,accurate,precise and reliable analytical procedure for clinical monitoring of plasma risperidon

8、e.Keywords:risperidone；plasma concentration；lamotrigine;LCESIMS/MS利培酮(risperidone)是一种选择性的单胺能拮抗剂，对5HT2受体、D2受体、1及2受体和H1受体亲和力高，临床上广泛用于治疗精神分裂症。其检测方法文献报道采用高效液相色谱法1-3和LCMS检测法4-6。为便于进行血药浓度监测和药动学研究，本文参照文献6建立一种以醋酸乙酯和二氯甲烷为混合萃取剂、拉莫三嗪为内标的测定人血浆中利培酮浓度的反相高效液相串联质谱电喷雾检测法（LCESIMS/MS）。1; 材料1.1; 仪器 ; Agilent 1200 HPLC仪

9、，Agilent 6410 Triple Quad LC/MS，Agilent色谱化学工作站（软件版本编号B.01.00）；旋涡混合器（原上海医科大学仪器厂）；SARTORIUS电子天平（瑞士）；MICRO1224高速离心机（美国）；MMMGROUP真空干燥箱（德国）。1.2; 药品与试剂; 利培酮对照品(西安杨森制药有限公司，批号：050705，质量分数>99.5%)，内标物为拉莫三嗪（葛兰素史克制药有限公司，批号：051130，质量分数>99.5%）。甲醇（色谱纯，Agilent公司），水为超纯水，甲酸铵（质谱纯，Agilent公司），其余试剂均为分析纯。1.3; 对照品溶液;

10、 精密称取利培酮10.0 mg加甲醇溶解并定容至10 mL，于冰箱4 避光保存，临用时用甲醇稀释成所需的浓度。1.4; 内标溶液; 精密称取拉莫三嗪适量，用甲醇制成质量浓度为10 mg·L-1的溶液，即得。2; 方法和结果2.1; 色谱条件; 迪马公司diamonsilTM C18反相色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 m），流动相为甲醇5 mmol·L-1甲酸铵（体积比9010），流速1 mL·min-1，柱温25 。质谱条件：采用电喷雾离子源（ESI），正离子模式，干燥气流速10 L·min-1，干燥气温度350 ，雾化气压力344.7

11、5 Pa，毛细管电压4 000 V，采用选择反应监测（SRM），利培酮检测离子对为m/z 411191，四级杆停留时间200 ms，裂解电压180 V，裂解能量28单位，信号放大400 EMV；内标物拉莫三嗪检测离子对为m/z 256145，四级杆停留时间200 ms，裂解电压130 V,裂解能量40单位，信号放大400 EMV。利培酮和拉莫三嗪的保留时间分别为2.227 min和1.789 min。LCMS/MS图谱见图1。2.2; 样品处理; 量取0.2 mL含药血浆加至2.0 mL锥形离心管中，加入 500 g·L-1的拉莫三嗪甲醇溶液50 L快速振荡5 s，加入0.1 mol·L-1的氢氧化钠溶液50 L，振荡5 s。加入1 mL醋酸乙酯二氯甲烷（体积比41），密塞，旋转振荡30 s，16 000 r·min-1离心5 min，吸取有机层转入1.5 mL锥形离心管内，37 真空干燥至干