生物选修1复习提纲

1、选修1 生物技术实践微生物培养与利用考纲解读知识内容要求5-1  微生物的培养与利用 （1）微生物的分离和培养（2）某种微生物数量的测定（3）培养基对微生物的选择利用（4）利用微生物发酵来生产特定的产物（5）发酵过程中亚硝酸盐含量的测定掌握程度参考本考试大纲中的：一、考试的能力要求2、实验与探究能力微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养第一部分 微生物的利用（是重点）锁定知识：要点1培养基细菌放线菌蓝藻支原体衣原体等原核生物真核生物真菌：霉菌、酵母菌、食用真菌原生生物：藻类、原生动物微生物有细胞结构 无细胞结构：病毒（1）知道微生物的种类：微生物是结构都相当简单,个体多

2、数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到生物 芽孢：某些细菌在其生命活动中的某个阶段可以从营养细胞内形成一个圆形或卵圆形的内生孢子，称为芽孢。芽孢是细菌的休眠体，含水量低，壁厚而致密，对热、干燥和化学物质的伤害的抵抗能力很强。芽孢的作用：能够使细菌度过不良的环境菌落：单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。不同细菌的菌落具有不同特征，表现在菌落的大小、形状、光泽度、颜色、硬度透明度等方面。 大肠杆菌在伊红美蓝培养基上形成深紫色，并带有金属光泽的菌落。 菌落主要用于微生物的分离、纯化、鉴定、记数和

3、选种、育种等实际工作微生物的营养（5要素）、微生物的代谢类型。（一）培养基：不同的微生物需要采用不同的培养基配方，尽管培养基的配方各不相同，但是其基本成分都包括水、碳源、氮源和无机盐。营养要素来源最适来源功能碳源自养型微生物无机碳源（CO2、NaHCO3等 合成微生物的细胞物质和一些代谢产物；（异养生物：兼有能源功能）异型微生物有机碳源：糖、脂、蛋白质等糖类氮源自养、异型型微生物无机氮：NH3、NH4+、NO3-、N2NH4+、NO3-用于微生物合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物异型微生物有机氮：蛋白质、核酸、尿素、氨基酸（也是能源）蛋白质、核酸、生长因子不需要外界提供生长因子自行合

4、成所需的生长因子  需要外界提供生长因子酵母膏、蛋白胨、动植物组织提取液等天然物质（维生素、氨基酸、碱基） 一般是酶和核酸的组成成分说明：不同种类的微生物对碳源的需求差别很大，可从微生物的代谢角度来考虑。见下表：代谢类型代表碳源光能自养型蓝细菌，藻类CO2化能自养型硝化细菌，铁细菌，硫细菌CO2化能异养型全部真菌和绝大多数细菌有机物1  碳源: 凡是能为微生物提供生长繁殖所需碳元素的营养物质。2氮源：凡是能为微生物提供所需氮元素的营养物质。说明：对于异养微生物来说，含C，H，O，N的化合物既是碳源，也是氮源，还是能源。大多数的微生物主要利用无机氮化合物作

5、为氮源，也可利用有机氮化合物作为氮源。只有少数固氮微生物可以利用N2作为氮源，如：根瘤菌，固氮菌，蓝藻。对于硝化细菌而言，铵盐和硝酸盐既是氮源又是能源。3生长因子（1）概念：微生物生长不可缺少的微量有机物。（2）种类：维生素，氨基酸，碱基等。（3）功能：一般是酶和核酸的组成成分。4无机盐5水【例1】下列关于微生物营养的说法，正确的是( ) A同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B凡是碳源都能提供能量 c除水以外的无机物仅提供无机盐 D无机氮源也能提供能量 解析：此题考查学生对微生物的营养和能源的理解。对异养微生物来说，含C、H、O、N的化合物既是碳源，又是氮源。CO2是光能自养细菌的碳源，但不能

6、提供能量。CO2和N。是无机物，也是微生物的碳源和氮源。硝化细菌所利用的氮源是无机氮源氨，同时氨也为硝化细菌提供用以化能合成作用的能源。 答案：D启示：含C、H、o、N的化合物既是微生物的碳源，又是微生物的氮源；有机碳源能提供能量，无机碳源不能提供能量；无机物也可提供碳源、氮源和能源。经典例题剖析例题2下列可以作为自养微生物氮源的是（）A N2、尿素 B 牛肉膏、蛋白胨 C 尿素、酵母粉 D铵盐、硝酸盐解析：明确自养微生物从外面吸收的是无机物，包括无机碳源和无机氮源。固氮微生物虽能直接利用N2还原为NH3、但是它属于异养生物。答案（D）例题3 下列说法正确的是（）A同一种物质不可能既作碳源又作

7、氮源。 B凡是碳源都能提供能量。C除水以外的无机物仅提供无机盐。 D无机氮源也能提供能量。解析：自养微生物以CO2或碳酸盐为唯一碳源进行代谢生长，但是CO2不能作为能源。铵盐、硝酸盐等既可作为微生物最常用的氮源，也可作为某些化能自养微生物的能源物质。答案（D）培养基以及配制培养基的原则（二）培养基的种类按培养基物理性质划分:名称特征功能固体培养基外观显固体状态的培养基主要用于微生物的分离、鉴定液体培养基呈液体状态的培养基主要用于工业生产按培养基的化学成分划分种类特征用途天然培养基用化学成分不明确的天然物质配成主要用于工业生产合成培养基用化学成分已知的化学物质配成主要用于微生物的分类、鉴定按培养

8、基的功能分种类制备方法原理用途例选择培养基培养基中加如某种化学成分根据某种微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌鉴别培养基加如某种试剂或化学药品依据微生物产生的某种代谢产物与培养基中特定试剂或化学药品反应，产生明显的特征变化而设计鉴别和区分菌落相似的微生物伊红和美蓝培养基可以鉴别大肠杆菌培养基的配置原则1目的要明确：根据所培养的微生物种类，培养的目的等，选择原料来配置。2营养要协调：必须要注意各种营养物质的浓度和比例。3pH要适宜：细菌的最适PH：6.57.5；放线菌的最适PH：7.58.5；酵母菌的

9、最适PH：3.86.0要点2无菌技术无菌操作的要求和灭菌相关技术 （1）获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面：对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。（2）消毒与灭菌的区别消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、红外线消毒。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体

10、内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。高压蒸气灭菌法 高压蒸气灭菌法又称湿热灭菌，它的原理是利用高压来提高蒸汽的温度，达到灭菌的目的。【例】细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌( ) A接种针、手、培养基 B高压锅、手、接种针 C培养基、手、接种针 D接种针、手、高压锅 解析：此题考查学生对无菌技术的掌握。高压蒸气灭菌锅是灭菌的一个设备，通常用于培养基的灭菌。用酒精擦拭双手是消毒的一种方法。火焰灼烧，可以迅速彻底地灭菌，适用于微生物的接种工具，如接种环。 答案：C 启示：微生物培养过程中的无

11、菌操作包括消毒和灭菌两大类，分别又有各种不同的方法。对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。要点3制作牛肉膏蛋白胨固体培养基（1）方法步骤：计算称量熔化 调PH 灭菌 倒平板（2）倒平板操作的步骤：将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰。用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基（约1020mL）倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。等待平板冷却凝固，大约需510min。然后，将平板倒过来放置，使培养皿盖在下、皿底在上。 【例

12、】以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是( ) A操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 B将称好的牛肉膏连同称量纸一同放人烧杯 C待培养基冷却至50左右时进行倒平板 D待平板冷却凝固约510 min后将平板倒过来放置 解析：制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是计算、称量、溶化、灭菌、倒平板，不能颠倒。牛肉膏容易吸潮，所以当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸。待培养基冷却至50，用手触摸锥形瓶刚刚不烫手，并且培养基处于溶化状态。平板冷却几分钟后还需倒置。答案：A 启示：固体培养基的制作步骤是：“计算称量溶化灭菌倒平板” 顺序不能颠倒。并且在制作过程特别是倒平板时彻底做到“无

13、菌”。要点4纯化大肠杆菌（接种之平板划线操作）微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便于纯化菌种。1、平板划线法：操作简单，但是单菌落不易分离平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作。平板划线法操作步骤：将接种环放在火焰上灼烧，直到接种环烧红（为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物）。在火焰旁冷却（以免接种环温度太高，杀死菌种）接种环，并打开棉塞。将试管口通过火焰(防止瓶口的微生物污染培养基)。将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液。将试管通过火

14、焰，并塞上棉塞。左手将皿盖打开一条缝隙，右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内，划三至五条平行线，盖上皿盖。注意不要划破培养皿。灼烧接种环（为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落），待其冷却后，从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线（能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落）。重复以上操作，在三、四、五区域内划线。注意不要将最后一区的划线与第一区相连。（划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操

15、作者）。将平板倒置放入培养箱中培养（平板冷凝后皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染）。2.稀释涂布平板法：操作复杂，但是单菌落易分离涂布平板操作的步骤：（无菌操作：涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。应从操作的各个细节保证“无菌”。例对涂布器等接种器具进行消毒和灭菌、酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围；每一个稀释度下涂布三个平板作为重复组，不同稀释度下涂布的平板形成对照组，且每个平板所用的样液不超过0.1毫升。）。将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。

16、取少量菌液，滴加到培养基表面。将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，冷却810s。用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。思考与讨论如何评价和分析培养基的制作是否合格？提示：如果未接种的培养基在恒温箱中保温12 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。如何评价和分析接种操作是否符合无菌要求？提示：如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的；如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。如何评价和分析是否进行了及时细致的观察与记录？提示：培养12 h与24 h后

17、的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。3、 微生物培养的条件一般置于恒温箱中培养培养温度与时间：25°C，培养57d 370C，培养12h和24h.4、微生物分离的原理用平板划线法和稀释涂布平板法接种的目的是：使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，以便于纯化菌种。5、菌落观察 不同细菌的菌落具有不同特征，表现在菌落的大小、形状、光泽度、颜色、硬度透明度等方面。统计实验结果时注意选取菌落数介于30300个之间的平板进行计数，且重复组结果要有相近性观察大肠杆菌菌落特征并记录大肠杆菌(普通琼脂)形 态

18、突 起边 缘颜 色     要点5：实验操作: 实验流程微生物 接种培养基的灭菌器具的灭菌大肠杆菌液配制培养基样品稀释灭菌菌种的保存恒温箱培养、观察涂布平板 倒平板能根据所培养微生物生长特点配制培养基能完成对培养基灭菌的操作过程能完成微生物接种操作能设计记录表并统计，记录微生物培养中的相关数据能分离微生物菌落，描述分离获得的菌落特征2测定某种微生物的数量 技能性独立操作水平（）实验：土壤中分解尿素的细菌的分离与计数锁定：要点1筛选菌株（1）土壤选取的要求 土壤微生物主要分布在距地表38cm的近中性土壤中，约7080为细菌。取土样用的小铁铲和盛土

19、样的的信封在使用前都要灭菌。应在火焰旁称取土壤 10 g。将称好的土样倒入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，塞好棉塞。尿素是一种重要的氮肥，农作物不能（能，不能）直接吸收利用，而是首先通过土壤中的细菌将尿素分解为 氨和CO2 ，这是因为细菌能合成 脲酶 。科学家能从热泉中把耐热细菌筛选出来是因为 热泉的高温条件淘汰了绝大多数微生物 . 生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用。所以通过配制选择培养基、控制培养条件等选择目的微生物。（2）实验室中微生物的筛选应用的原理人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养、温度、pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。（3）选择性培养基在微生物学中，将允许特定种

20、类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。（4）配制选择培养基的依据根据选择培养的菌种的生理代谢特点加入某种物质以达到选择的目的。该培养基对微，其选择机制是 只有能够以尿素作为氮源的微生物才能在该培养基上生长 。在以 尿素 为唯一氮源的培养基中加入 酚红 指示剂。培养某种细菌后，如果PH升高，指示剂将变 红 ，说明该细菌能够 分解尿素 。 【例1】分析下面培养基的配方：KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4·7H20、葡萄糖、尿素、琼脂。请回答： (1)在该培养基的配方中，为微生物的生长提供碳源和氮源的分别是 和 。 (2)想一想这种培养基对微生物是

21、否具有选择作用?如果具有，又是如何进行选择的? 解析：碳源是提供碳元素的物质，氮源是提供氮元素的物质。所以碳源是葡萄糖，氮源是尿素。绝大多数生物都能利用葡萄糖，但是，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，所以这种培养基对微生物有选择作用。选择的原则是只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 答案：(1)葡萄糖 尿素 (2)有选择作用。因为此配方中尿素是唯一氮源，因此，只有能够利用尿素的微生物才能够生长。 启示：选择培养基筛选微生物的原理：人为提供有利于目的茵株生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。例题2 通过选择培养基可以从混杂的微生物群体中分离出所需的微生物。在缺乏氮

22、源的培养基上大部分微生物无法生长；在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌；在培养基中加入10酚可以抑制细菌和霉菌。利用下述方法能从混杂的微生物群体中分别分离出 （ ）A大肠杆菌 B霉菌 C放线菌 D固氮细菌解析：围绕选择培养基对微生物的选择作用原理进行问题思考。答案：.B、C、D例题3 尿素分解菌能分解尿素是因为可以合成A尿素酶 B 脲酶 C 蛋白酶 D 细菌酶解析：尿素分解菌能分解尿素的原理是可以合成脲酶。答案：（B）例题4为什么选择培养能够“浓缩”所需的微生物？答案：在选择培养的条件下，可以使那些能够适应这种营养条件的微生物得到迅速繁殖，而那些不适应这种营养条件的微生物的繁殖被

23、抑制，因此可以起到“浓缩”的作用。要点2统计菌落数目（1）测定微生物数量的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数。（2）稀释涂布平板法统计样品中活菌的数目的原理(测定细菌数量的原理)当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活细菌。为了保证结果准确，一般设置35个平板，选择菌落数在30300的平板进行计数，并取平均值。在菌落计数时，每隔24h统计一次菌落数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结果，以防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目。(菌种中有些菌体增殖快，有些菌体增值慢，所以培养时间要充足，使得每个菌

24、体都能形成肉眼可观察到的菌落。)3）测定细菌数量的方法：显微镜直接计数是测定微生物的方法。菌落计数法（公式） 采用稀释涂布平板法统计菌落数目时，培养基表面生长的一个菌落，来源于 样品稀释液中一个活菌 。通过统计 平板上的菌落数 ，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般选择菌落数在 30300 的平板进行计数统计某一稀释度下平板上的菌落数，最好能统计3个平板，计算出平板菌落数的平均值，然后下公式进行计算。从平板上的菌落数推测出每克样品中的菌落数的计算方法是 （平均菌落数÷涂布的稀释液体积）×稀释倍数在105稀释度下求出3个平板上菌落数的平均值是63，那么每克

25、样品中的菌落数是多少?答案：6.3×107。利用稀释涂布平板法成功统计菌落数目的关键是 恰当的稀释度统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，因此，统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示。【例】用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数，在对应稀释倍数为106的培养基中得到以下几种统计结果，正确的是( ) A涂布了一个平板，统计的菌落数是230 B涂布了两个平板，统计的菌落数是215和260，取平均值238 C涂布了三个平板，统计的菌落数分别是21、212和2墨6，取平均值163 D涂布了三个平板，统计的菌落数分别是2l0、240和250，取平均值233 解析：在设计实验时，一定要涂布至少

26、3个平板作为重复组，才能增强实验的说服力与准确性，所以 A、B不正确。C项虽涂布了3个平板，但是，其中1个平板的计数结果与另两个相差太远，说明在操作过程中可能出现了错误，因此，不能简单地将3个平板的计数值用来求平均值。 答案：D启示：在设计实验时，一定要涂布至少3个平板作为重复组；在分析实验结果时，一定要考虑所设置的重复组的结果是否一致，结果不一致，意味着操作有误，需重新实验。 类型三 设置对照要点3设置对照设置对照的主要目的是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。例如为了排除培养基是否被杂菌污染了，需以培养无杂菌污染的培养基作为空白对照。【例3】用来判断选择培养基是否

27、起到了选择作用需要设置的对照是 A未接种的选择培养基 B未接种的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基 c接种了的牛肉膏蛋白胨(全营养)培养基 D接种了的选择培养基 解析：将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培养基作为对照。对照遵循的原则是单一变量，所以与选择培养基一样接种、培养。 答案：C 启示：对照实验是指除了被测试的条件以外，其他条件都相同的实验，其作用是比照实验组，排除任何其他可能原因的干扰，证明确实是所测试的条件引起相应的结果。要点4实验设计关于土壤中某样品细菌的分离与计数实验操作步骤如下： 1土壤取样：从肥沃、湿润的土壤中

28、取样。先铲去表层土3 cm左右，再取样，将样品装入事先准备好的 中。 2制备培养基：准备牛肉膏蛋白胨培养基和选择培养基 将菌液稀释相同的倍数，在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此，牛肉膏蛋白胨培养基可以作为对照，用来判断选择培养基是否起到了选择作用。 3微生物的.培养与观察 将10g土样加入盛有90 mL无菌生理盐水的锥形瓶中(体积为250 mL)，充分摇匀，吸取上清液1ml，转移至盛有9ml的生理盐水的无菌大试管中，依次等比稀释至107稀释度，并按照由107103稀释度的顺序分别吸取0.1mL进行平板涂布操作。每个稀释度下需要3个选择培养基、1个牛肉膏蛋白胨

29、培养基。 将涂布好的培养皿放在30温度下培养，及时观察和记录。 挑选选择培养基中不同形态的菌落接入含酚酞培养基的斜面中，观察能否产生如教材中图2-lO的颜色反应。 4细菌的计数 当菌落数目稳定时，选取菌落数在30-300的平板进行计数。在同一稀释度下，至少对3个平板进行重复计数，然后求出平均数，并根据平板所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。3培养基对微生物的选择作用 知识性应用水平（）实验：分解纤维素的微生物的分离要点1简述纤维素酶分解纤维素生化原理 纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖

30、。纤维素最终被水解成葡萄糖，为微生物的生长提供营养。纤维素纤维二糖葡萄糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶知道具有纤维素酶的微生物的应用价值土壤中某些微生物能够产生纤维素酶，分解纤维素。对这些微生物的研究与应用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精、用纤维素酶处理服装面料等。例题：下列关于纤维素酶的说法，错误的是（ ）A、纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种 B、纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C、纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁 D、葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖解析：纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种即 C1酶、Cx酶和葡萄糖苷酶，纤维素酶把高分子的纤维素分解为小分子的葡萄糖。植物细胞壁的成分是纤维素和果

31、胶，因此，纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁。葡萄糖苷酶虽然是纤维素复合酶中一种，但它只能将纤维二糖分解为葡萄糖。答案：D要点2纤维素分解菌的筛选本实验通过微生物富集培养的方法可以增加这类纤维素分解菌的浓度并达到初步分离的目的。（1）筛选方法刚果红染色法。能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选。方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应。方法二：在倒平板时就加入刚果红。染色法优点缺点方法一颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用操作繁琐刚果红会使菌落之间发生混杂方法二操作简便不存在菌落混杂问题产生淀粉酶的微生物可能出现假阳性反应有些微生物能降解色素，形成明显的透明圈。（2）刚果红染色法筛选纤维素分解菌

32、的原理刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当我们在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。这样，我们就可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。（3）简述选择培养基的特点与利用，区别选择培养与鉴别培养概念 此“选择培养”的培养基是液体选择培养基。是使纤维素分解菌增殖，含量增多。选择培养是使纤维素分解菌增殖，含量增多。目的是从众多微生物中分离所需要的微生物。鉴别培养：加如某种试剂或化学药

33、品，鉴别和区分菌落相似的微生物。要点3分离分解纤维素的微生物的实验流程操作：能根据微生物的特点设计微生物选择方案能配制选择培养基，培养、选择所需微生物能分离、培养土壤中具有纤维素酶的微生物，并观察对纤维素的分解作用实验方案流程图选择培养梯度稀释涂布到鉴别纤维素分解菌培养基上微生物培养土壤取样挑选产生透明圈的菌落纯化培养1土壤取样采集土样时，应选择富含纤维素的环境。2选择培养 (1)目的：增加纤维素分解菌的 浓度 ，以确保能够从样品中分离到所需要的微生物。(2)制备选择培养基：参照课本旁栏中的比例配制。 (3)选择培养：称取土样20 g，在无菌条件下加入装有30mL培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定

34、在 摇床上，在一定温度下振荡培养12 d，直至培养液变混浊 。也可重复选择培养。3梯度稀释 参照专题1的稀释操作，依次将培养液稀释101107倍。4将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 (1)制备培养基：参照课本旁栏中的比例。 (2)倒平板操作。 (3)涂布平板：将稀释度为104106的菌悬液各取01 mL涂布在平板培养基上，30倒置培养。每个稀释度下需涂布3个平板，并注意设置对照。 5挑选产生透明圈的菌落 参照课本刚果红染色法，挑选产生透明圈的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。例题：在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合下列哪一生物学观点？（ ）A、生物结构与功能相适应的观点 B、生物结

35、构与功能整体性观点C、生物与环境相适应的观点 D、生物发展进化的观点解析：生物适应一定环境，环境对生物具有选择作用，只有在纤维素含量丰富的环境中纤维素分解菌的含量才会高于其它普通环境，从而提高获得目的微生物的几率。答案：C例题：有关选择培养正确的叙述是（ ）A、可以增加纤维素分解菌的浓度 B、可以减少纤维素分解菌的浓度C、所用培养基是固体培养基 D、所用培养基是平板培养基解析：选择培养的目的是增加纤维素分解菌的浓度，所用的培养基是液体培养基。答案：A例题：刚果红染色时，加入刚果红可在( )制备培养基时 梯度稀释时 倒平板时 涂布时 培养基上长出菌落时 A B C D解析：刚果红染色时，可以先培

36、养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；也可以在倒平板时就加入刚果红。答案：C知识框架纤维素分解微生物的分离纤维素酶种类、作用、最适pH、催化活力刚果红染色筛选原理实验设计土壤取样选择培养涂布培养纯化培养前置染色法后置染色法富含纤维素土壤增大分解菌含量染色鉴别分离出分解菌尝试利用微生物进行发酵来生产特定的产物利用微生物进行发酵来生产特定的产物 技能性独立操作水平（）要点1实验：（1）果酒和果醋的制作（易行） （1） 果酒制作的原理 ：酵母菌的兼性厌氧生活方式酶在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。C6H12O66O26H2O 6CO212H2O能量酶在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。C6H12O6 2C2H5OH6CO2（2）发酵需要适宜的条件在缺氧、20左右（一般将温度控制在1825）、呈酸性的发酵液中，酵母菌大量繁殖，进行酒精发酵。而绝大多数其它微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。（3）传统发酵技术所使用的酵母菌的来源传统的葡萄酒酿造，都是采用自然发酵的工艺。所谓自然发酵，就是葡萄破碎入罐以后，不人为地添加任何菌种，靠葡萄本身携带的自然界的酵母菌，在葡萄浆或分离后的葡萄汁里自发地繁殖，最终发酵成葡萄酒。要点2果醋制作的原理（1）酒变醋的原理当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；