《病原生物学和免疫学》实验教学大纲

1、病原生物学和免疫学实验教学大纲课程编号：40921105课程类别：专业基础课实验学时：26学时学 分：1.5适用专业：护理学本科一、实验教学目的和任务病原生物学和免疫学实验是为了使学生牢固掌握病原生物学和免疫学的基本方法与实验技术；加深学生对病原生物学和免疫学基本理论的理解；同时通过实验，培养学生观察问题、提出问题、分析问题和解决问题的能力；培养学生实事求是、严谨踏实的科学态度和良好作风，以及敢于创新的开拓精神；也为学生进一步深入学习其他医学相关学科奠定基础。二、实验教学基本要求1、每次实验前必须充分预习实验内容，明确实验目的、原理、方法以及操作中的注意事项，保持思路清晰。2、在实验过程中，应

2、持严肃认真的科学态度，并要注意合理地分配和利用时间。3、认真及时做好实验记录，对于当时不能得到结果而需要连续观察的实验，则需要记下每次观察的现象和结果，以便分析。4、在微生物学的整个实验过程中，应严格加强“无菌观念”的培养和训练。5、每次的实验结果，应以实是求实的科学态度填入实验报告，力求简明准确，并及时汇交教师批阅。如实验结果与理论不符，应分析原因，训练科学思维的能力。三、实验教学内容实验项目一1、实验项目名称：溶菌酶的溶菌试验2、实验内容提要：（1）制备含溶壁微球菌的琼脂平板。（2）打孔 凝固后，用打孔器打孔，孔间距1.52cm。（3）加样 周围四孔分别加入5、25、100、500g溶菌酶

3、标准品。（4）结果 观察各孔周围溶菌情况，测量溶菌环直径。实验项目二1、实验项目名称：白细胞吞噬试验2、实验内容提要：（1）吸取肝素加于凹玻片内。（2）取耳垂血0.04ml，放在有肝素的凹玻片内，摇匀。（3）取葡萄球菌培养液0.02ml加于有抗凝血的凹玻片内，摇匀。（4）将凹玻片直于湿盒中，3730分钟，每10分钟摇匀一次。（5）取一滴全血菌液混合液，置载玻片上，推片，待干。（6）滴加甲醇固定3分钟，水洗。（7）再加瑞氏染液染色1-2分钟，水洗、印干。（8）置显微镜下观察吞噬和未吞噬细菌的白细胞数。实验项目三1、实验项目名称：凝集反应妊娠乳胶试验2、实验内容提要：（1）分别用毛细管吸取生理盐水

4、和待检尿滴于玻璃板的左右两侧。（2）在两侧内各加一滴抗HCG血清，轻轻摇晃约2min。（3）在两侧内各加一滴HCG乳胶抗原试剂，摇匀，约5min观察结果。实验项目四1、实验项目名称：沉淀反应双向琼脂扩散试验2、实验内容提要：（1）将1%生理盐水琼脂糖加热融化（100ml生理盐水中加1%琼脂糖粉）。（2）将已融化的琼脂3-4毫升趁热倾注在玻片上，制成厚薄均匀的琼脂糖凝胶板。（3）待琼脂糖凝固后，用打孔器在凝胶板上打三孔。（4）孔内分别注入20微升的生理盐水、血清、抗人IgG的血清。（5）将琼脂糖凝胶板放入湿盒中，置于37的温箱中，24小时后，取出观察结果。实验项目五1、实验项目名称：显微镜的使用

5、及细菌基本形态结构的观察2、实验内容提要：（1）将显微镜平放在实验台上。（2）用低倍镜对光，使光线集中于集光器。（3）标本片放在载物台上。（4）低倍镜找出标本所在位置的范围，再换高倍镜或油镜观察。（5）观察细菌的基本形态标本片：球菌、杆菌、弧菌。实验项目六1、实验项目名称：细菌特殊结构的观察2、实验内容提要：（1）将显微镜平放在实验台上。（2）用低倍镜对光，使光线集中于集光器。（3）标本片放在载物台上。（4）低倍镜找出标本所在位置的范围，再换高倍镜或油镜观察。（5）观察细菌的特殊结构标本片：荚膜、鞭毛、芽胞。实验项目七1、实验项目名称：培养基的制备与灭菌2、实验内容提要：（1）培养基配制的大体

6、流程如下：原料称量 加热溶解 调节PH 过滤 分装 塞棉塞包扎 灭菌（2）高压蒸汽锅的使用a、锅内加入适量的水。b、将灭菌物体放在搁架上，不要放的过满，盖好锅盖。c、加热排气。d、保温保压，压力达到1.05kg/cm2，温度达到121，维持20min，切断电源。 e、出锅，当压力表降到0时，打开排气阀，旋开固定螺旋，开盖，取出灭菌物品。实验项目八1、实验项目名称：革兰染色法 2、实验内容提要：（1）细菌染色片的制作（涂片-干燥-固定）（2）革兰氏染色法a、初染：将结晶紫染液滴加到已固定的标本片上，染色1min，水洗。b、媒染：滴加碘液媒染1min，水洗。c、脱色：滴加95%的酒精脱色，使无紫色

7、为止，一般30s，水洗。d、复染：滴加复红复染1min，水洗，用洗水纸吸干，用油镜观察。实验项目九1、实验项目名称：细菌的人工培养及现象观察2、实验内容提要：（1）平板划线接种法（2）液体培养基接种法（3）半固体穿刺接种法（4）斜面培养基接种法实验项目十1、实验项目名称：外界因素对细菌的影响2、实验内容提要：（1）紫外线杀菌实验（2）药敏实验（纸片法）（3）单糖发酵实验实验项目十一1、实验项目名称：常见病原微生物的观察2、实验内容提要：（1）将显微镜平放在实验台上。（2）用低倍镜对光，使光线集中于集光器。（3）标本片放在载物台上。（4）低倍镜找出标本所在位置的范围，再换高倍镜或油镜观察。（5）

8、观察破伤风杆菌、肉毒杆菌、白喉杆菌、结核杆菌、大分生孢子等标本片。实验项目十二1、实验项目名称：肠道寄生线虫、绦虫和吸虫的观察2、实验内容提要：（1）识别蛔虫受精卵与未受精卵，了解受精卵发育过程。（2）认识鞭虫卵的形态特征。（3）掌握蛲虫卵的形态特征。（4）掌握十二指肠钩虫及美洲钩虫的形态鉴别和钩虫卵的形态特征。（5）掌握带绦虫卵的特征。（6）掌握布氏姜片吸虫（姜片虫）虫卵形态特点。实验项目十三1、实验项目名称：组织内及血液与淋巴系统寄生虫的形态观察2、实验内容提要：（1）掌握华枝睾吸虫（肝吸虫）虫卵形态特点。（2）掌握卫氏并殖吸虫（肺吸虫）虫卵形态特点。（3）掌握日本血吸虫的成熟虫卵和毛蚴的

9、形态特征。（4）熟悉疟原虫各期形态特征。四、实验项目与学时分配实验项目与学时分配表序号实验项目名称学时实验类型实验主要仪器设备备注1溶菌酶的溶菌试验2验证性培养箱、打孔器必做2白细胞吞噬试验2验证性显微镜必做3凝集反应2验证性移液器必做4沉淀反应2验证性水浴箱、打孔器必做5油镜的使用及细菌的基本形态的观察2验证性显微镜、标本片必做6细菌特殊结构的观察2验证性显微镜、标本片必做7培养基的制备及灭菌2综合性培养箱、灭菌锅必做8革兰染色法2验证性显微镜必做9细菌的人工培养及生长现象的观察2演示性培养箱必做10外界因素对细菌的影响2验证性培养箱必做11常见病原微生物的观察2验证性显微镜、标本片必做12肠道寄生线虫、绦虫和吸虫的观察2验证性显微镜、标本片必做13组织内及血液与淋巴系统寄生虫的形