植物病害标本采集制作和鉴定

1、实训十、植物病害标本采集、制作和鉴定一、目的要求通过采集和制作标本，了解植物病害标本采集要求，学会标本的采集与记录，掌握植物 病害标本的制作方法，进一步巩固病害知识，每人抽签完成1份病害标本。二、材料和用具 标本夹、吸水纸、塑料袋、纸袋、标签、铅笔、记号笔、小刀、枝剪、 手锯、标本缸、酵酸铜、硫酸铜、95%乙醇、甲醛溶液、亚硫酸、甘油、蒸馅水等。三、内容与方法（-）病害标本的采集1标本采集基本要求采集完整的标本，最好是先摄影然后再压制或浸渍保存，拍照越淸晰越好，要求拍正常 植株和病害部位。每号标本，样本数量应至少采集2-3份。2取样部位（1）标本上有子实体的应尽量在老叶上采集因为它比较成熟，许

2、多真菌有性阶段的子实体都在枯死的枝叶上出现，而无性阶段子实 体大多在活体上可以找到。（2）柔软多汁的子实体或果实材料，则应采集新发病的幼果。（3）病毒病应尽量采集顶梢与新叶。（4）线虫病害标本应采病变组织，为害根部的线虫病害标本除采集病根外还应采集根用上（5）表现焉萎的植株要连根挖出，有时还要连同根际的上壤等一同采集。（6）对于粗大的树枝和植株，则宜削取一片或割取一截。（7）如果病害在叶、果实和枝干上都有表现时，尽疑采集全而。（8）寄生类应和寄主一起采集。病害症状很特殊病害，要连同植株的枝叶或花一起采集， 以便鉴、定其寄主名称。3标本数据记录和标本编号要求记录准确、简要、完整。完整的记录与标签

3、同样十分重要，要有寄主冬称、采集日期与地点、采集者姓名、生态条件和土壤条件等。4标本采集方法（1）枝于类、根部病害标本的采集取苴得病部位，用锯、枝剪或髙枝剪采取，切勿用手折断，影响标本的美观，对纤维长而强韧的枝干等，尤应注意。（2）叶部病害标本的采集大型叶植物，它们的叶子和花序均很大，采集标本时可采一部分或分段采集，以同株上幼小叶加上花果组成一份标本（同时标明叶实际大小）；或把叶、叶柄各自分段取其一部分:对于像菟丝子、列当这样的寄生植物应连同寄主一起采集，并记录寄主的冬称。（3）肉质或多汁植物（花、果实）病害标本的采集应将艮纵切或横切，有时需将其内部的组织挖岀，还要考虑是否将一半的材料浸泡在保

4、 存液中保存。在野外干燥时，要在切开的茎表面洒大量食盐，用盐包裹的材料应宜于夹有多 层报纸的标本夹中，24小时后要把浸有盐水的报纸移去，或者用开水将材料烫死，然后放 置在薄纸板一铝板的三明治层中烘干。（二）病害标本的制作从田间采回的标本，除一部分用作分离鉴泄外，对于典型的病害症状最好是先摄影然后 再压制或浸渍保存。压制或浸渍的标本尽可能保持其原有性状，微小的标本可以制成玻片， 如双层玻片、凹穴玻片或用其它小玻管小袋收藏。（三）病害标本的保存1干燥法 适用于一般含水较少的茎、叶等病害标本的制作，最简单、最经济、应用最广。将采集的标本夹在吸水纸中，同时放入写有采集地点、日期和寄主爼称的标签，再用标

5、 本夹压紧后日晒或加温烘烤，使其干燥，干燥愈快愈能保持原有的色泽，标本质量亦愈高。 夏季采的标本在温湿度髙的情况下，容易发靈变色，换纸宜勒，通常在压制的最初三、四天 每天换纸1一2次（视标本含水多少，及温湿度情况而左），以后每二、三天换一次，至完全 干燥为I匕。在第一次换纸的同时，应将标本加以整理，因经初步干燥，标本变软易于铺展。 烟草、蚕豆、梨、马铃薯的茎叶等很易发黑变色，都是很难保存颜色的标本，在制作过程中 特別要注意快速干燥。需要保持绿色的干制标本，可先将标本在2-4%硫酸铜溶液中浸24 小时，或经过醋酸铜溶液（配方及方法见浸渍法中醋酸铜的浸渍法）处理后再压制。也可以 在叶而抹一层液体石

6、蜡后再压，可以保持鲜绿色2-3天。2浸渍法适用于多汁的病害标本，如果实、块根或担子菌的子实体等，必须用浸渍法保存。浸渍液体种类很多，有纯属防腐性 的，亦兼有保持标本原色的，现介绍数种常用及效果较好的方法。（1）防腐浸渍法：此类浸渍法仅能防腐而没有保色作用，如萝卜、甘薯等，不要求保色的 标本，洗净后直接浸于以下溶液中。 5%福尔马林浸渍液。 亚硫酸浸渍液：1000ml水中加5%-6%'IE硫酸15ml （般市售的亚硫酸含量为5 6% ）或用亚硫酸钠10.5g,浓硫酸8ml,水500ml配成混合液。（2）保持绿色标本的浸渍液及浸泡法： 醋酸铜保（绿）色浸渍法：往50%的醋酸中逐渐加入醋酸铜

7、结晶溶解至饱和作为母液（大约1000ml50%的醋酸中加入15g醋酸铜即可达饱和），使用时兑水稀释1一4倍（稀 释倍数视标本颜色而异，色深者稀释倍数可小些）。将此液加热煮沸，投入标本，开始时标 本的绿色被漂去，再经数分钟后标本又恢复绿色，此时立即将标本取出，用淸水洗净，保存 于5%的福尔马林溶液中，此法称为热处理。冷处理的办法是将标本置于上述稀释液中浸3 小时后标本退色，再经72小时后标本恢复绿色，此时将标本取岀，取水冲净，保存于5% 的福尔马林溶液中。此法保持色泽时间较长，苴保色原理大致是铜离子与叶绿素中的镁离子 发生程换作用。所以，溶液经多次处理标本后，铜离子会逐渐减少。如要继续使用，应补

8、入 适量的醋酸铜。此法保存标本往往略带蓝色，与植物标本原色稍有出入。 硫酸铜保（绿）色浸渍法：用淸水冲洗标本，直接浸泡在5%的硫酸铜溶液中17天， 待标本略带褐色时取出用淸水漂洗，去除标本表而多余的硫酸铜溶液，然后保存在亚硫酸浸 渍液中。 保存黃色和桔红色标本的浸渍液：保存杏、梨、柿、红辣椒等果实标本用亚硫酸浸 渍液，亚硫酸浸渍液有漂白作用，因此使用时要注意浓度，一般用1 %即可（浸杏时浓度可 再稀些），因浓度太小，防腐力不够，可加入适量酒精。为了防止果实崩裂，可加入少许甘 油。 保存红色标本的浸渍液：保存标本红色较难，因为红色是水溶性的花青素，很难保存。常 用Hesler浸渍液保存，成分是：

9、氯化锌50g,福尔马林25ml,甘油25ml,水1000ml。将氯化锌溶于热水中，加入福尔马林，如有沉淀，用英澄清液。此溶液适用于由于花青素 而显红色的标本，如苹果、番茄等。（四）标本的保存制成的标本，经过整理和登记，然后依一定的系统排列和保藏。菌类标本一般按分类系统排列，要有两套索引卡片，一套是寄主索引，一套是菌类索引，以 便于寻拽和整理。标本室（柜）要保持干燥、潸浩，并要定期施药以防虫蛀与霊变。1标本盒保藏教学和示范用的干制病害标本，采用玻而纸盒保藏比较方便，玻而纸盒，的适 宜大小为20X28X2cnio纸盒中先铺一层棉花，并在棉花中加少许樟脑粉以驱虫。最后在 棉花上放上标本和标签。2标本

10、瓶保藏浸渍的标本放在标本瓶内保藏，为了防止标本下沉和上浮，可绑在玻璃条上然 后再放入标本瓶。标本瓶的口盖好后滴加石蜡封口，然后贴上标签。3纸套内保藏用牛皮纸叠成15X33cm的纸套，大量保存的干制标本，大多采用纸套保藏， 将标本装入纸套内，并在纸套上贴好标签，放在标本柜中即可。四、作业：制作标本及详细资料。植物病害标本野外采集记录卡片标本号96 采集日期采集地点生态环境 阳光充足，上壤深厚肥沃，光热条件较好，地形为坡地，排水条件较好。寄主名称（通用名及学名）芍药病名或学名芍药红斑病发病部位吐21症状描述叶背岀现针尖大小的凹陷斑点，不规则形的病斑，直径约5-24mm,叶边缘的病斑多为半圆形。叶片

11、正面病斑上有淡褐色的轮纹，不太明显。采集人奎值 鉴定人张绍兵芍药红斑病【分布与危害】又称芍药褐斑病，是芍药最常见的病害。国内芍药栽植均有发生。红斑病使芍药叶片早枯， 连年发生则削弱植株的生长势，植株坯小，花少，乃至全株枯死，严重影响了切花产量和“白 芍”的产量。该病害还危害牡丹。【症状识别】红斑病主要危害叶片，也侵染枝条、花、果壳等。早春叶片展开即可受到侵染，叶背出现针 尖大小的凹陷斑点，逐渐扩大成近圆形或不规则形的病斑，直径约5-24nun，叶边缘的病斑 多为半圆形。叶片正而病斑上有淡褐色的轮纹，不太明显。病斑相互连接成片，使整个叶片 皱缩、枯焦，叶片常破碎。幼茎及枝条上的病斑长椭圆形,红褐

12、色,病斑长叶柄 基部或枝干分叉处发病呈黑褐色的溃疡斑，病部容易折断。叶柄上的病斑和茎上的相似；呼 片、花瓣上的病斑均为紫红色小斑点。【病原】红斑病的病原菌是牡丹枝泡霉，属半知菌亚门，丝抱菌纲，丛梗泡目，枝泡菌属。【发病规律】病原菌主要以菌丝体在病叶、病枝条、果壳等残体上越冬；在南京地区，由于叶片的腐烂， 病原菌不能在叶片上越冬。病原菌自伤口侵入或直接侵入，但伤口侵入发病率更高。在自然 界，下雨时泥浆的反溅使茎基部产生微伤口，也有利于该病原菌的侵入，叶片等处茸毛的脱 落，也可以造成微伤口。潜ff期短，一般6天左右，但病斑上子实层的形成时间则很长，大 约病斑岀现1.5-2个月左右才产生子实层，因此

13、再侵染次数极少。在生长季节该病均可发生。 在南京地区，3月下旬开始发病，6-7月份为发病盛期：北京地区则4月底至5月初才开始 发病，7-8月份为发病盛期。【防治措施】1、减少侵染来源。秋季割除芍药的地上部分，残茬越短越好，并及时处理病残体。休眠期 发病重的地块喷洒波美3度的石硫合剂，或在早春展叶前喷洒50%多菌灵可湿性粉剂600 倍液。2、加强栽培管理，控制病害的发生。株丛过大要及时分株移栽，栽植密度不要过大，以利 通风透光，降低田间小气候的湿度：肥水管理要好：及时淸除田间杂草；种植圃早春覆盖塑 料薄膜，对病残体上越冬菌源的传播起到隔离作用，能大幅度地降低发病率。3、化学防治。在芍药展叶后、开花前，喷洒50%多菌灵可湿性粉剂1000倍液；落花后可 交替喷洒65%代森锌可湿性粉剂500倍液和1%波尔多液与0多菌灵。7-10天喷