葡萄内酯和马尔敏的合成及活性研究

1、葡萄内酯和马尔敏的合成及活性研究         11-04-26 14:19:00     编辑：studa20           作者：张普照 黎艳刚 涂明珠 张亚梅 陈海芳 杨武亮【摘要】  目的研究葡萄内酯和马尔敏的合成方法及生物活性。方法以香叶醇和伞形酮为起始原料，通过氯代、成醚反应合成葡萄内酯，再经Sharpless不对称烯烃羟基化反应合成马尔敏，采用1H-NMR

2、对化合物进行结构鉴定;通过体外药理实验测定葡萄内酯对小鼠胃肠蠕动和大鼠脑组织匀浆中乙酰胆碱酯酶的影响。结果葡萄内酯和马尔敏的合成产率分别为50.67%，20.5%;葡萄内酯促进胃肠动力作用强度为44%，低、中、高3个剂量组均能明显抑制大鼠大脑组织匀浆乙酰胆碱酯酶的活性。结论该合成路线简单、产率高，能实现工业化生产;葡萄内酯在促进胃肠动力和治疗老年痴呆新药研究具有潜在价值。 【关键词】  葡萄内酯; 马尔敏; 合成; 胃肠动力; 乙酰胆碱酯酶Abstract：Objective To study the synthesis and activity of auraptene and m

3、armin.MethodsAuraptene was prepared by chlorinenation and etherification with geraniol and umbelliferone as starting material.Marmin was synthesized by sharpless aymmetric dhydroxylation with auraptene as material. The structures of products were identified by 1H-NMR spectra. The gastrointestinal pr

4、opulsive motivity and acetylcholinesterase inhibition of auraptene were determined in vitro.ResultsTheir yield reached 50.67%, 20.5%,respectively.The bioactivity results indicated that auraptene showed similar gastrointestinal propulsive motivity with domperidone and the propulsive rate was higher t

5、han 44%.The low, middle and high doses of auraptene had the inhibitory effects on acetylcholinesterase in rat brain(P<0.5).ConclusionThis synthetic route has advantages of convenience,simple operation and high yield and is suitable for industrial manufacture.It has the potentiality in the study o

6、n medicine of the gastrointestinal propulsive motivity and Alzheimer's disease.Key words：Auraptene; Marmin; Gastrointestinal Motility; Synthesis; Acetylcholinesterase葡萄内酯和马尔敏是从葡萄皮和柑桔属植物中分离得到的，其生物活性近年来引起了研究人员的关注，文献报道马尔敏和葡萄内酯具有显著的抗肿瘤、神经保护、抗炎和自由基清除等活性16。我们通过动物模型实验研究发现葡萄内酯具有促进胃肠动力作用，两者很可能成为新药候选化合物，然

7、而在植物中的含量均较低，影响对其的开发利用。我们对提取工艺进行优化后，虽能从枳壳等柑桔属植物中提取分离到千克级的葡萄内酯，然而提取费用较高;与葡萄内酯相比，马尔敏的植物来源更少，在植物中的含量更低。所以，开发葡萄内酯和马尔敏的化学合成方法既满足现实的迫切需要，又有着潜在的经济利益和学术价值。据文献与专利检索得知，目前尚无有关葡萄内酯化学合成方法的报道，马尔敏的化学合成方法虽多有报道，但合成路线较复杂，收率较低，无法实现工业化生产7，8。本文结合手性合成的新研究成果，提出了全新的合成路线，合成路线如图1所示，以香叶醇和伞形酮为初始原料，通过氯代、成醚反应合成出葡萄内酯(3)，再经Sharples

8、s不对称烯烃羟基化反应，合成马尔敏(4)，步骤少，目标化合物收率较高，适合工业化生产。图1 葡萄内酯和马尔敏合成路线1 仪器与材料Bruker-Avance-400核磁共振仪(TMS为内标)，722可见分光光度计(上海欣茂仪器有限公司制造)，DY89-1型电动玻璃匀浆器(宁波新芝生物科技股份有限公司);氢溴酸加兰他敏注射液(上海旭东海普药业有限公司)，乙酰胆碱酯酶测定试剂盒(南京建成生物工程研究所第一分所)，蛋白定量测定盒(南京建成生物工程研究所第一分所)，香叶醇(sigma试剂)，三溴化磷(国药集团化学试剂有限公司)，7-羟基香豆素(AR，上海晶纯试剂有限公司)，AD-mix-(sigma试

9、剂)，其余试剂均为分析纯。动物：清洁级KM小鼠80只(雌雄各半，体质量2022 g，江西省实验大小鼠生产基地提供);吗丁啉(西安杨森制药有限公司)。2 方法2.1 葡萄内酯和马尔敏的合成取香叶醇5.0 g(0.032 mol)溶于100 ml无水石油醚中，加热溶解后，冰盐浴下加入吡啶2.6 ml，搅拌下缓慢滴加含有PBr3 3.5 g(0.013 mol)的石油醚溶液26 ml，冰盐浴下反应3 h后，向其中加入10 ml水和80 ml甲醇的混合液，继续搅拌5 min，分出有机层(上层)，用饱和NaHCO3溶液洗至pH=7，然后水洗，无水Na2SO4干燥，减压浓缩得无色油状液体5.5 g，粗产率

10、为78%。2.2 葡萄内酯的活性测试啉组(6 mg/kg)，葡萄内酯低剂量组(0.6 mg/kg)，中剂量组(1.2 mg/kg)，高剂量组(2.4 mg/kg)。各组小鼠禁食不禁水12 h，次日灌胃给药一次(0.4 ml/20 g)，过60 min后灌服阿拉伯胶活性炭粉混合物(0.3 mL/只)，20 min后处死小鼠，立即取出胃肠，平铺，测定碳末前端至幽门的距离和小肠全长，以两者之比计算推进百分率。用于观察小鼠胃肠推进功能的指示剂为阿拉伯胶活性炭粉混合物 (2.5 g纤维钠加水62.5 ml，加入奶粉4 g、糖2 g、淀粉2 g、活性炭0.75 g，搅拌混匀，配成75 ml的糊状物)。小肠推进率(%)=(碳糊移动距离/幽盲全长)×100%蛋白标含量=测定管OD值-空白