HPLC法测定注射用头孢唑肟钠中主药的含量

1、HPLC法测定注射用头孢唑肟钠中主药的含量于和1*,陈双璐1,林澜2,吴崧2(11天津市儿童医院,天津市300074;21天津新丰制药有限公司,天津市300457)中图分类号R92712;R978111+文献标识码A文章编号1001-0408(2007)25-1981-02摘要目的:建立以高效液相色谱法测定注射用头孢唑肟钠中主药含量的方法。方法:色谱柱为C18,流动相为磷酸盐缓-1冲液-乙腈(91),检测波长为254nm,流速为1mLmin,进样量为:L,-11624mL(r=019996);平均回收率10016%,精密度为0145%,1、灵敏度高、结g果准确,可用于该制剂的含量测定。关键词高

2、效液相色谱法;注射用头孢唑肟钠;DeterminationofMainforInjectionbyHPLCYUHe,CHEN(pChildrensHospital,Tianjin300074,China)LINLan,WUjingPharmaceuticalCo1Ltd1,Tianjin300457,China)ABSTRACTOBJECTIVE:ToestablishaHPLCmethodforthecontentdeterminationofceftizoximeinceftizoximesodiumforinjection1METHODS:ThecolumnwasODS-AC18with

3、columntemperatureof40,andthemobilephasewasphosphateacidbuffersolution-acetonitrile(91)1Thedetectionwavelengthwas254nmandthesamplesizewas20L1RESULTS:The-1standardcurveofceftizoximesodiumwaslinerintherangeof1624gmL(r=019996)withaveragerecoveryrateat10016%andprecisionat0145%1Thelowestdetectablelimitwas

4、1ng1CONCLUSION:Themethodissimple,sensitiveandaccurate1Itcanbeappliedtothecontentdeterminationofceftizoximesodiumforinjection1KEYWORDSHPLC;Ceftizoximesodiumforinjection;Ceftizoxime;Contentdetermination头孢唑肟钠(Ceftizoximesodium)是第3代头孢菌素类抗生素,对部分革兰阳性菌及多数革兰阴性菌都有很强的杀菌能力,对多种细菌产生的-内酰胺酶具有很高的稳定性,具有广谱、高效、低毒、耐酶的特

5、点,临床广泛用于肾盂肾炎、输尿管炎、支气管炎、慢性呼吸系统疾病的继发感染等。注射用头孢唑1肟钠收载于部颁标准,其含量测定方法采用微生物检定法。但该方法存在专属性不强,不能准确反映有效成分含量2的弊病,且该方法操作繁琐、费时、不能及时检测出产品含量,不适3合大生产检验。本文参考美国药典以高效液相色谱(HPLC)法代替微生物检定法测定该制剂的含量,并对其方法学进行了系统研究4。1仪器与试药结果,峰面积RSD=0126%。215稳定性试验精密量取供试品溶液1mL,置于100mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,分别于0、1、2、4、6、8、12h按“211”项下色谱条件进样测定。结果,酮洛芬峰面积RSD=

6、0138%,表明该溶液在12h内稳定。216回收率试验精密吸取对照品溶液适量,加甲醇稀释成浓度为10184、-121168、32152、43136、54120mL的溶液,按处方比例加g入适量的辅料。按“211”项下色谱条件进样测定,并照回归方程计算回收率。结果详见表1。表1回收率试验结果Tab1加入量测得量-1-110.8421.6832.5243.3610.8021.6432.3443.47样品含量测定取供试品溶液1mL,置于100mL容量瓶中,加甲醇稀释至刻度,按“211”项下色谱条件进样测定,按外标法以峰面积计算含量,并与中和滴定法含量测定结果进行比较。结果见表2。表2样品含量测定结果(

7、n=3)Tab2Resultsofcontentdeterminationofsamples(n=3)批号050902051013051106217高效液相色谱法/%981098149917中和滴定法/%971898169914Resultsofrecoverytest回收率9916399182991451001253RSD讨论本方法不但与中和滴定法测得酮洛芬结果基本一致,甚至更加准确,而且避免了因终点不明确造成的结果误差。参考文献99191014112*副主任药师。研究方向:临床药学。电话87113。E-mail:fishriver20031631com国家药典委

8、员会编1中国药典(二部)S12005年版1北京:化学工业出版社,2005:8001国家药典委员会1国家药品标准S1WS-170(X-153)-2000(2)1(收稿日期:2006-10-08修回日期:2007-02-06)中国药房2007年第18卷第25期ChinaPharmacy2007Vol.18No.251981© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. Breeze液相色谱系统,包括1525型高效液相色谱泵、2487双波长紫外-可见分光检测器(美国Wa

9、ters公司)。注射用头孢唑肟钠(天津新丰制药有限公司,批号:040901、040902、040903、041001、011002、041003、041101、041102、041103);头孢唑肟对照品(中国药品生物制品检定所,表1Tab1018970017144018970017144018970017144018970018930018970018930018970018930018970110716018970110716回收率试验结果Resultsofrecoverytest1162031011211615710016116141100141179781001911785599151

10、00160171178719914119752161110019含量:9811%);乙腈为色谱纯,磷酸二氢钾、磷酸氢二钠为分析纯,水为重蒸馏水。2方法与结果211色谱条件色谱柱:YMCPackODS-AC18(150mm×416mm,5m);流动相:磷酸盐缓冲液(取柠檬酸1142g,无水磷酸氢二钠1173g,加水溶解并稀释至1000mL,调节pH值至316)-1腈(91);流速:1mLmin;柱温:40;:;进样量:20L。色谱详见图1。()测出的信号,计算-10105gmL,故检测限为1n21812定量限:按照信噪比为101,比较已知浓度样品测出的信号与空白样品测出的信号,计算能被

11、可靠检出的最低浓度-1是0120gmL,故定量限为4ng。219样品含量测定精密量取供试品溶液,按“211”项下色谱条件进样测定,记录色谱;另取“21211”项下对照品溶液适量,同法测定。按外标法以峰面积计算出供试品中头孢唑肟的含量,并与微生物检定法进行比较。结果详见表2。表22种方法样品含量测定结果比较(n=5)Tab2Comparisonofcontentsofsamplesdeterminedbytwomethods(n=5)040901040902040903041001011002041003041101041102溶液的配制21211对照品溶液:精密称取对照品4010mg,置于20

12、0mL容量瓶中,以pH710磷酸盐缓冲液(PBS)溶解并稀释至刻度,摇匀,作为对照品贮备液;再精密量取该溶液10mL,置于100mL容量瓶中,加PBS稀释至刻度,摇匀,即得。21212供试品溶液:精密称取样品适量,按“21211”项下方法配制成供试品贮备液及供试品溶液。213线性关系考察精密量取对照品贮备液8、9、10、11、12mL,分别置于100mL容量瓶中,用PBS稀释至刻度,得浓度为16、18、20、-122、24mL的对照品溶液,分别按“211”项下色谱条件进g样测定。以浓度(C)对峰面积(A)进行回归分析,得回归方程44A=4118×10C+1151×10(r=

13、019996)。结果表明,头孢唑-1肟检测浓度的线性范围为1624mL。g214精密度试验取“21211”项下对照品溶液20L,重复进样测定6次。结果,测得头孢唑肟峰面积RSD=0145%。215重现性试验取同一批号样品,按“219”项下方法测定头孢唑肟钠含量,平行测定6次。结果,计算测得含量的RSD=110%。216稳定性试验取供试品溶液适量,常温下放置,分别于0、1、2、3、4、5、6、8、10、12h时进样测定。结果,计算峰面积的RSD=0166%,表明供试品溶液在12h内稳定。217回收率试验精密量取供试品贮备液5mL,置于100mL容量瓶中,共9份。分别精密加入对照品贮备液4、5、6

14、mL,各3份,用PBS稀释至刻度,摇匀,按“211”项下色谱条件进样测定,计算回收率。结果见表1。218检测限和定量限考察21811检测限:按照信噪比为31,比较已知浓度样品测出1982ChinaPharmacy2007Vol.18No.25212881028810687189871808716187189871608719388161881528911991178891178912789170881813讨论在方法学验证试验中,笔者曾考察了流动相不同比例(pH316的PBS-乙腈的比例分别为6040、7030、8020、8515、9010)、316、710)对色谱分离不同pH值(pH为310、和检测的影响。结果表明,流动相比例为9010及其pH316时,得到的主成分峰与PBS峰能良好分离,理论塔板数最高,峰型最优。)、笔者考察柱温变化(30、35、40不同流速(015、110、-1115mLmin)对色谱分离的影响结果表明,柱温在40、流-1速为110mLmin的条件下得到的色谱峰保留时间适中,峰型最好。综上所述,本方法操作简便、灵敏度高、结果准确,可用于注射用头孢唑肟钠的含量测定。参考文献1234国家药典委员会1中华人民共和国卫生部药品标准新药转正标准(第4册)S12004:531胡昌勤1分离分析方法对抗生素产品质量的影响J1中国抗生素杂志,2005,30(1