五味子浸出液防龋的实验研究和临床疗效观察

1、    五味子浸出液防龋的实验研究和临床疗效观察        摘要目的：观察五味子浸出液的防龋效果。方法：体外试验观察五味子浸出液对变形链球菌生长、产酸、粘附的抑制情况；临床实验观察五味子液漱口对菌斑形成的影响。结果：当五味子浸出液的浓度为10%(w/v)时，变形链球菌的生长较对照组减少65.41%；细菌粘附率下降11.63%；pH值则升高1.51。50%(w/v)五味子液漱口，4h，24h菌斑指数分别较对照组低0.47、0.83。结论：五味子浸出液有一定的防龋效果。关键词

2、五味子浸出液；变形链球菌菌斑中分类号R780.1文献标识码A文章编号1000-4661(2000)04-0291-02The Experimental Study and Clinically Therapentic Effect Detection of SCE on Anti-CariogenicityXIONG Yan-bin, ZHANG Rui-fang, HUANG Xing-xing(Department of Stomatology, Xianning Medical College. Xianning 437100)Abstract Objective:To observe

3、the effect of SCE on anti-cariogenicity.Methods The laboratory method was used to test the inhibition of growth、 adherence and acid production of Streptoccus Mutans (S.Mutans) by using SCE.Reasults： In contrast with the control group when concentration of SCE is 10% (w/v). the growth rate of S.Mutan

4、s reduces 65.41%;adherence rate reduces 11.63%;pH rises 1.51 and PLI lower 0.47,0.83(50%w/v).Conclusion： SCE has some effect of anti-cariogenicity.Key wordsschisandra chinesis bill extractum(SCE)；S. mutans plaque变形链球菌(简称变链菌)与龋病的关系已得到口腔界的公认。我们在筛选防龋中草药时发现五味子变链菌有一定的抑制作用。为了探讨其防龋效果，我们通过体外试验观察五味子煎剂对变链菌(In

5、gbrittc)生长，产酸、粘附的影响，临床试验观察五味子漱口控制菌斑形成的效果，为其用于防龋提供依据。材料与方法1. 五味子煎剂的制备取五味子100g，洗净，加水1000ml，文火煎至100ml，过滤，离心3次，消毒备试。2. 五味子液抑制变链菌生长产酸试验取消毒试管20支，分4组，每组编1-5号，每管中加入牛心脑浸出液培养基(BHI pH 7.2)4ml 106CFU/ml(麦氏浊度计比色法)变链菌液0.4ml，然后每组1号管中加入五味子原液0.4ml，2、3、4号管中各加入按经典方法稀释的五味子液0.4ml，5号管中不加药液以备对照，厌氧培养18h后离心，上清液用SA-720酸度计测pH

6、值以观察药物对变链菌产酸的影响；管底沉淀物加3ml生理盐水混匀后用uv-265紫外分光光度计测OD值以观察药物抑制变链菌生长的效果，同法重复试验2次，分别计算每组同号试管pH值、OD值的均值及标准差。3. 五味子液抑制变链菌粘附试验试管、培养基、药液、菌液准备同每管中插入已灭菌的0.8mm牙用不锈钢丝一根，厌氧培养48h后取出铜丝，将附着于钢丝上的细菌刮入盛有3ml生理盐水的试管中，培养液离心后去上清液，管底沉淀物加3ml生理盐水分别测OD值，按照公式(附着菌OD值)/(附着菌OD值+未附着OD值)×100%求出附着百分率。4. 五味子液抑制菌斑形成的临床试验(1) 受试对象及药物：

7、选择牙列完整、排列整齐，受试前3个月内及实验期间未使用抗生素的在校学生10人，分4次分别使用蒸馏水(阴性对照 1号)，25%五味子液(2号)，50%五味子液(试验液3号)，0.2%洗必太液(4号阳性对照)。所有液体临试验前由专人用调色剂和矫味剂进行处理，使其外观和口感基本一致，资料统计后揭密。(2) 试验方法：受试者每次试验前洁牙，使受试牙面菌斑指数(PLI)降为零。洁牙后即给予50ml漱口液，分3次漱口，每次含漱时间不少于1min，停止刷牙24h。分别于漱口后4h，24h用碱性品红染色，采用改良的Qingley-Hein方法2记录16、21、24，36、41、44菌斑指数，恢复刷牙。各牙菌斑

8、指数相加除牙数求出受试者平均菌斑指数。以后每间隔2周分别使用2、3、4号液同法进行试验。结果表1五味子液抑制变链菌生长方差统计药物浓度%(w/v)OD(±s)P值与对照组比较组内梯度比较100.717±0.0740.0110:5 0.0550.841±0.1030.0110:2.5 0.012.51.208±0.0680.0110:1.25 0.011.251.805±0.1490.055:2.5 0.055:1.25 0.01 对照组2.073±0.9442.5:1.25 0.05五味子液抑制变链菌生长结果见表1。五味子液抑制变链菌

9、产酸结果见表2。五味子液抑制变链菌粘附结果见表3。五味子液抑制菌斑形成结果见表4。 表2五味子液抑制变链菌产酸的方差统计药物浓度%(w/v)OD(±s)P值与对照组比较组内梯度比较105.77±0.140.0110:50.0555.32±0.270.0110:2.50.012.55.14±0.220.0110:1.250.011.254.54±0.380.055:2.5 0.055:1.250.01 对照组4.26±0.192.5:1.250.05表3五味子液抑制变链菌粘附的方差统计药物浓度%(w/v)OD(±s)P值与对照

10、组比较组内梯度比较100.052±0.0110.0110:5 0.0550.068±0.0250.0110:2.5 0.052.50.146±0.0930.0510:1.25 0.011.250.294±0.1360.055:2.5 0.055:1.25 0.01 对照组0.379±0.1622.5:1.25 0.01表4五味子液抑制变链菌斑形成的方差统计组别PLI(±s)P值4h24h4h24h1.50%五味子液0.89±0.621.44±0.871:40.051:40.012.25%五味子液1.17±

11、0.851.68±0.961:30.051:30.053.0.2%洗必太液0.68±0.451.12±0.701:20.051:20.054.蒸馏水1.36±0.942.27±0.832:30.012:30.053:40.013:40.01 讨论变链菌是目前公认的致龋菌。它寄居口腔，粘附在牙齿表面形成菌斑而引起龋齿。因此，控制菌斑是预防龋病的重要途径之一。我国中草药药源丰富，如能筛选出抑制变链菌生长，控制菌斑形成的药物对于龋病预防有重要意义。在体外试验条件下推测血链球菌附着牙面所需的细菌浓度为104细胞，变链菌粘附能力较血链球菌低，粘附牙面所需

12、浓度应更高2。从表1可以看出，五味子液对变链菌的生长，繁殖有较强的抑制作用，且随着药物浓度提高，抑菌效果亦增强。当药物浓度为10%(w/v)时，抑菌率达65.41%，而细菌粘附力仅为7.9%。用50%五味子液漱口，4h，24h菌斑指数分别较阴性对照组降低0.47，0.83而与洗必太组无显著性差异，表明五味子液对变链菌的生长和菌斑形成均有一定的抑制作用(见表3、4)。变链菌较强的产酸能力也是其致龋的重要因素。唾液中因存在多种缓冲体系，故能维持口腔中相对恒定的pH值，但菌斑中变链菌浓度高，因此牙面局部pH下降而引起牙齿中无机盐脱钙。本实验表明：五味子对变链菌的产酸有一定的抑制作用，且随着药物浓度提高效果增强。通过检验，五味子液抑制细菌生长，产酸二者呈正相关(r=0.71，见表2)。因此，推测五味子液抑制变链菌产酸可能是直接抑制细菌生长，使之菌液浓度降低，产酸减少所致。除此之外，是否还有其它原因抑制变链菌产酸，尚需进一步研究。作者简介熊炎斌(1951-)，男，湖