输血相容性检测实验室质量管理-质量控制

1、输血相容性检测实验室质量管理输血相容性检测实验室质量管理- -质量控制质量控制卫生部北京医院输血科卫生部北京医院输血科北 京 市 临 床 输 血 质 量 控 制 和 改 进 中 心北 京 市 临 床 输 血 质 量 控 制 和 改 进 中 心卫生部临床检验中心血型室卫生部临床检验中心血型室宫济武宫济武内内 容容？ 遵从经过确认的检测遵从经过确认的检测程序，是否就能够获程序，是否就能够获得准确的结果呢？得准确的结果呢？准确性准确性和精密性和精密性A. 准准而精而精B. 准准不精不精C.不不准准而精而精D.不不准准不精不精实施质量控制的目的监控试剂盒和非商品化试剂监控试剂盒和非商品化试剂检测结果的

2、精密性检测结果的精密性 监控试剂的批间变异监控试剂的批间变异证明检测结果可靠证明检测结果可靠 可追溯性可追溯性 及时发现实验室常见误差，采取纠正和补救措施及时发现实验室常见误差，采取纠正和补救措施采用标准化的程序和优质试剂采用标准化的程序和优质试剂, , 实施良好实验室实践实施良好实验室实践促进实施质量保证和质量管理促进实施质量保证和质量管理向顾客提供实验室检测结果一致性的证据向顾客提供实验室检测结果一致性的证据向审核方提供实验室运作的信息向审核方提供实验室运作的信息未实施质量控制的风险假阳性降低可信度苦恼、投诉血液浪费统计不真实法律纠纷假阴性引起感染虚假的安全性感染传播统计不真实法律纠纷假性

3、结果成本更高假性结果成本更高重复检测、医学追踪重复检测、医学追踪医务人员和实验室时间，医务人员和实验室时间，浪费工作时间，失去对实验室的浪费工作时间，失去对实验室的信任信任实验室检测出现失误的原因试验质量差 假性结果试验应用差 错误结果培训差 错误结果安全漏洞 感染/事故反应性比例高 发血困难 室内质量控制策略室内质量控制策略 质控品种类每种检测频次放置的时间用于质控数据解释确定分析批是在控还是失控的规则。质量控制 将质量控制作为一个过程， 加以控制！检测方法中的质控环节血清和红细胞比例血清和红细胞比例抗体种类抗体种类细胞悬液浓度细胞悬液浓度检测介质如蛋白含量、离子强度、增强介质的种类检测介质

4、如蛋白含量、离子强度、增强介质的种类温度和孵育时间温度和孵育时间适当离心条件适当离心条件正确的条件下使用试剂正确的条件下使用试剂准确的判读并解释凝集反应准确的判读并解释凝集反应定性测定项目的室内质控定性测定项目的室内质控定性分析、半定量分析阴、阳性的判断有一个“判断值” ，所以质控的目的是考察检测结果是否准确和稳定。在采用何种方法时, 要了解其“判断值”的确定是否与需求相符, 同时应了解抗原抗体反应特异度，及抗干扰情况。定性测定项目的室内质控定性测定项目的室内质控 肉眼直接判定的阴、阳性结果的测定肉眼直接判定的阴、阳性结果的测定时，时， 除阴、阳性对照外除阴、阳性对照外, 最好用一个水最好用一

5、个水平在平在“判断值判断值”附近的质控品较好。附近的质控品较好。 当试剂盒质量有所变化时当试剂盒质量有所变化时, 阴性、阳性阴性、阳性对照（尤其强阳性对照）往往发现不了对照（尤其强阳性对照）往往发现不了的情况下的情况下, 用水平接近用水平接近“判断值判断值”的质的质控品就可发现控品就可发现定性测定项目的室内质控定性测定项目的室内质控用某一讯号值来判断结果时用某一讯号值来判断结果时, 这时需要这时需要选择好适当的质控特征值。如微板法选择好适当的质控特征值。如微板法法检测血型法检测血型, 讯号值可有讯号值可有OD值、值、S/N值、值、S/CO值等。其中值等。其中OD值波动太大值波动太大, 而报告阴

6、、阳性结果时，用的是而报告阴、阳性结果时，用的是S/N值或值或S/CO值值, 所以选用所以选用S/N值或值或S/CO值作质控特征值比值作质控特征值比OD值好值好定性测定项目的室内质控定性测定项目的室内质控在在ELISE检测时检测时S/N值或值或S/CO值呈正态分值呈正态分布布, 也可采用也可采用Levey -Jenning控制图进行控制图进行质控，但在血型检测中不太适用质控，但在血型检测中不太适用.应每天检应每天检测质控板来进行讯号值的质控测质控板来进行讯号值的质控.定性试验质控指定浓度的质控品,进行检测,要求90 %以上结果完全符合,不符合的不能超过一个“级差”血型鉴定：不遗漏任何微弱凝集抗

7、体筛查：检测出有临床意义的抗体交叉配血：不遗漏任何微弱凝集血型检测的室内质控n遵循定性检测的室内质控原则n特殊性:n 血型抗原的多态性n不同血型系统n 同一血型的亚型n 同一血型抗原的不同反应性n 纯合子/杂合子 传统做法室内质控的技术要求质控目标:ABO血型血型:试剂血清及试剂细胞的反应性试剂血清及试剂细胞的反应性.包括包括阴阳性反应的准确性阴阳性反应的准确性,测试对象及测试介质的测试对象及测试介质的影响影响.项目包括项目包括:正定型正定型:抗抗-A、抗抗-B、抗抗-A，B反定型细胞反定型细胞:A1A2BO检测方法:盐水介质室内质控的技术要求质控目标:RhD血型血型:试剂血清及试剂细胞的反应

8、性试剂血清及试剂细胞的反应性;包括包括阴阳性反应的准确性阴阳性反应的准确性;测试对象及测试介质的测试对象及测试介质的影响影响;测定方法的测定方法的特异性特异性.项目包括项目包括:正定型正定型:抗抗-D、D阴性细胞阴性细胞检测方法:盐水介质 IAT室内质控的技术要求质控目标:抗筛细胞抗筛细胞:试剂细胞的反应性试剂细胞的反应性;包括阴阳性反应包括阴阳性反应的准确性的准确性;测试对象及测试介质的影响测试对象及测试介质的影响;测定方测定方法的法的特异性特异性.项目包括项目包括:抗体筛查抗体筛查:Cell I,-II,-III与抗与抗-A,抗抗-B的的反应性反应性.检测方法:IAT室内质控的技术要求质控

9、目标:AHG:试剂的反应性试剂的反应性;测定方法的干扰性测定方法的干扰性.项目包括项目包括:AHGD阴性细胞阴性细胞检测方法:盐水介质室内质控原则ABO血型测定血型测定 质控品设计以检出为原则，反应强质控品设计以检出为原则，反应强度设置在至少度设置在至少3+，检测频次为每天、每个工作人员，检测频次为每天、每个工作人员开始检测时；开始检测时；RhD血型血型:试剂血清及试剂细胞的反应性试剂血清及试剂细胞的反应性;包括阴阳包括阴阳性反应的准确性性反应的准确性;测试对象及测试介质的影响测试对象及测试介质的影响;测定测定方法的特异性。方法的特异性。 抗体筛查抗体筛查 以高低值设计以高低值设计,低值血清设

10、置反应度为低值血清设置反应度为,定义本实验室质控反应的结果断定原则和检测有效定义本实验室质控反应的结果断定原则和检测有效原则。检测频次为每批次。原则。检测频次为每批次。交叉配血方法交叉配血方法 为特定抗体检测的有效性测定为特定抗体检测的有效性测定.检测检测频次为每天频次为每天,每个工作人员开始检测时每个工作人员开始检测时. 内部质控品（QCs）的来源实验室自制其他来源:其他实验室 QC计划的提供者商品内部质控品的重要特性(通用)与检测标本相似（同质）与检测标本相似（同质）其行为表现与真正的标本相同其行为表现与真正的标本相同测定值涵盖医学决定点测定值涵盖医学决定点处于能发现变异的水平处于能发现变

11、异的水平可大量提供（使用可大量提供（使用1 1年）年）稳定稳定血清类可以冰冻、冻干或以化学方式保存血清类可以冰冻、冻干或以化学方式保存 如果为冻干品，要求非常准确复原如果为冻干品，要求非常准确复原以小量分装贮存以小量分装贮存 按照厂家推荐贮存按照厂家推荐贮存瓶间变异很小瓶间变异很小通常为生物材料，具有生物危险性通常为生物材料，具有生物危险性含单一或多种标记物含单一或多种标记物质控品组成组成:可由一质控血清和一质控细胞完成以上检测需求.质控血清:至少含有抗-A,抗-A1,抗-B,可与抗筛细胞反应的一种IgG抗体.质控细胞:至少含有A,B.D三种抗原表达,并反应性有明确控制.内部质控物的自制过程制

12、定制备方案库存强阳性标本的系列稀释检测并选择适宜的稀释度大批量制备检测批变异检测稳定性分装、贴签、贮存自制质控品血清:技术参数:含抗-A,抗-B,抗-D(IgG)(或E,C)等血球:技术参数:含A,B和D抗原.特殊试剂:A2细胞;抗-A,B;试剂抗-A;抗-B;抗-D细胞:A1;B;SCI;SCII;SCIII自配:盐水,IgG致敏O型细胞(CCC)商品质控品生产厂商生产厂商试剂商品名试剂商品名包含试剂包含试剂OrthoOrthoCQI7CQI7 一一支抗体筛检阴性支抗体筛检阴性三只血清包含三只血清包含 一支含弱抗一支含弱抗D抗体抗体 一支含弱抗一支含弱抗K或抗或抗Jka A1 rr A1 r

13、r血球血球 dce/dce四种血球包含四种血球包含 A2 R1R1血球血球 DCe/DCe B R2R2 B R2R2血球血球 DcE/DcE O R1R2 O R1R2血球血球 DCe/DcECQI9CQI9包含以上包含以上7支标本，增加以下两只标本：支标本，增加以下两只标本：A1BA1B血球血球A2BA2B血球血球Ortho Confidence Ortho Confidence KitKitA1B RhD A1B RhD 阴性阴性rr血球血球 dce/dceO RhD O RhD 阳性阳性R1r血球血球 DCe/ dce商品质控品生产厂商生产厂商试剂商品名试剂商品名技术指标技术指标San

14、quSanquininPeliCase PeliCase 1&21&2这组系统主要包含五个血这组系统主要包含五个血清及五个血球部份清及五个血球部份血型、抗体筛检、抗血型、抗体筛检、抗体鉴定体鉴定Pelicheck Pelicheck panelpanelcell 1 cell 1 （A2B型型 RhD neg)；cell 2 (O cell 2 (O 型型 R1r) DCe/ dceserum 1 serum 1 serum 2 serum 2 cell 3 (O R1R2 DCe/DcE) cell 3 (O R1R2 DCe/DcE) 含有含有A和和B抗原抗原含有含有D、C

15、、c和和e抗原抗原含弱含弱anti-D；不清楚不清楚含有含有D、C、c、E和和e抗原抗原PeliContrPeliContrololTube 1Tube 1是是A2B/RhD pos没没有抗体；有抗体；Tube 2Tube 2是是O RhD neg 含有含有A和和B抗原以及抗原以及D抗原抗原没有任何抗体没有任何抗体商品质控品生产厂商生产厂商试剂商品名试剂商品名技术指标技术指标澳洲澳洲CSL第一支第一支是是O型型Rh阴性，阴性， 用来查核用来查核anti-D 凝集强度比对标准化。凝集强度比对标准化。第二支第二支标本为标本为B型型Rh阳性阳性第三支第三支标本为标本为A型型Rh阳性阳性 第四支第四支

16、标本为标本为AwBw Rh阴性且抗体阴性标本阴性且抗体阴性标本商品质控品生产厂商生产厂商试剂商品名试剂商品名技术指标技术指标澳洲澳洲CSL第一支第一支是是O型型Rh阴性，阴性， 用来查核用来查核anti-D 凝集强度比对标准化。凝集强度比对标准化。第二支第二支标本为标本为B型型Rh阳性阳性第三支第三支标本为标本为A型型Rh阳性阳性 第四支第四支标本为标本为AwBw Rh阴性且抗体阴性标本阴性且抗体阴性标本室内质控品ABO bl.group reagentsRh bl.guoup reagentsKellbl.guoup reagents抗原/抗体表达ABA,BA1DCcEeKCell 13+0

17、3+3+2+2+002+0Cell 23+03+02+02+2+00Cell 303+3+02+2+2+2+2+0Cell 400000002+2+0室内质控品抗原(体)谱ABOr.red cellAntibody screening with cells抗原/抗体表达KFYDSerum 10/10/12+00Serum 200000/1Serum 32+2+0+0机构发放质控品组合ABO bl.group reagentsRh(D) bl.guoup reagentsABOr.red cellAntibody screening with cellsABA,BD1D2contr1D+2D+3

18、D-Cell 13+3+3+000Serum 1001+1+0/1Cell 20002+2+0Serum 22+2+0/10/10/1Cell 3000+K+室内质控如何做?修订质量手册，增加室内质控要求制定本实验室室内质控程序文件制定本实验室室内质控SOP.依据所用试剂所选方法所用设备所用质控修改ABO、Rh、抗筛的SOP及增修相关记录表单按照室内质控SOP进行操作.作好记录试剂室内质控记录试剂:最好以表格形式记录全部试剂记录内容批号(是否更换新的批号)效期生产厂商质控结果通过不通过 失控原因及分析日期及检测者室内质控记录表评估项目评估项目试剂批号效期厂商Anti-AAnti-B.试剂质控试

19、剂质控123.批号变化批号:12345口 改变 口 未改变口 改变 口 未改变.通过质控质控失控失控原因日期签名内内 容容室内质控样表简介:在实验室质量管理中,意义重大而受到密切关注,是实验室质量保证的重要组成部分EQA是多家实验室分析同一标本并由外部独立机构收集和反馈实验室上报结果来评价实验室操作的过程 EQA也被称作能力验证,是通过实验室间的比对判定实验室的校准/检测能力的活动室间质评的目的和作用识别实验室间的差异,评价实验室的检测能力识别问题并采取相应的改进措施改进分析能力和实验方法确定重点投入和培训需求实验室质量的客观证据支持实验室认可增加实验室用户的信心实验室质量保证的外部监督工具识

20、别问题并采取相应的改进措施此是此是EQA最重要的作用之一最重要的作用之一EQA结果的比较是每个参加实验室检测项目最终末质量的结果的比较是每个参加实验室检测项目最终末质量的综合比较综合比较,这可以帮助实验室确定自已在参加实验室中的这可以帮助实验室确定自已在参加实验室中的检测水平检测水平,导致室间质量评价失败主要原因导致室间质量评价失败主要原因检测仪器未经校准或有效维护检测仪器未经校准或有效维护室内质控失控室内质控失控试剂质量不稳定试剂质量不稳定实验人员的能力不能满足实验要求实验人员的能力不能满足实验要求上报结果抄定错误上报结果抄定错误EQA样本处理不当样本处理不当EQA样本本质存在质量问题样本本

21、质存在质量问题改进分析能力和实验方法如果实验室拟改变实验方法和选购新的仪器,EQA的信息可以帮助实验室作出选择,通过组合分析EQA的信息资料,可确认更准确、更可靠、更稳定或者说更适合本实验室特殊要求的实验方法和仪器确定重点投入和培训需求EQA可以帮助实验室确定需要加强培训的检测项目，如抗体筛检，若多次检测结果不正确，说明该实验室在此检测上问题较多，需要实验室在此项目上要更多关注，加强此方面的培训实验室质量的客观证据EQA结果可以作为实验室质量稳定与否的客观证据，特别是新的医疗事故处理条例在2002年9月1日正式实施的情况下，实验室更加需要参加室间质量评价计划证明自己已利用其作为质量保证的手段之一，并以获得满意的质评结果，来证明实验室检测系统的准确性和可靠性。即使EQA成绩不理想，若实验室分析了实验过程，查找问题，采取改进措施并加以记录，也可以作为检验质量保证举证的有利证据。支持实验室认可在实验室认可领域中，室间质量评价越来越受到国际实验室认可组织及各国实验室认可组织的重视，成为实验室认可活动中不可缺的一项重要内容。在实验室认可的主要依据ISO/IEC17025中，多处提到了“能力验证”，即室间质量评价之所以受到认可组织的重视，主要因为室间质评本身可以反映实验室是否胜任从事某项检测的能力，它也可以补充实验室