2013现代生物技术概论复习题

1、现代生物技术概论复习题一、 名词解释细胞工程、基因工程、酶工程、蛋白质工程、发酵工程、蛋白质组学、组织培养、同裂酶、同尾酶、人工种子、细胞分化、愈伤组织、分批发酵、干细胞、酶分子修饰、酶反应器、细胞融合、组织培养、单倍体、单克隆抗体、体细胞克隆、受体细胞、载体、PCR、限制性内切酶、目的基因、转化子、花粉管通道法、报告基因、重组子、转基因技术、离子交换、外植体、继代培养、悬浮培养、固定化培养、DNA粘性末端、重组质粒、核移植1、生物技术：也称生物工程，是人们以现代生命科学为基础，结合先进的工程技术手段和其他基础科学的科学原理，按照预先的设计，改造生物体或加工生物原料，为人类生产出所需产品或达到

2、某种目的的一门新兴的、综合性的学科。2、基因组DNA文库：将某一种基因DNA用适当的限制酶切断后，与载体DNA重组，再全部转化宿主细胞，得到含全部基因组DNA的种群，称为基因组DNA文库。3、 选择标记基因：是指该基因的表达产物对选择剂产生抗性，致使转化细胞不受选择剂影响，能正常生长、发育、分化，从而把转化体选择出来的一类基因。4、 基因和基因组 DNA分子中具有特定生物学功能的片段称为基因（gene）。一个生物体的全部DNA序列称为基因组（genome）5、载体：把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术，送进受体细胞中去进行繁殖或表达的工具称为载体。6、cDNA文库：即由mRNA经过反转

3、录成cDNA,然后来构建文库，构建的文库不包含内含子。7、转化:外源DNA导入宿主细胞的过程称之为转化。8、重叠基因：一个基因序列中，含有另一基因的部分或全部序列。9、基因组文库：把某种生物基因组的全部遗传信息通过载体贮存在一个受体菌克隆子群体中，这个群体即为这种生物的基因组文库。10、细胞工程：以生物细胞、组织或器官为研究对象，运用工程学原理，按照预定目标，改变生物性状,生产生物产品，为人类生产或生活服务的科学。11、.外植体：指用于离体培养的活的植物组织、器官等材料。12、愈伤组织：在离体培养过程中形成的具有分生能力的一团不规则细胞，多在外植体切面上产生。13、体细胞杂交：（原生质体融合）

4、指在人工控制条件下不经过有性过程，两种体细胞原生质体相互融合产生杂种的方法。14、悬浮培养：是将植物游离细胞或细小的细胞团，在液体培养基中进行培养的方法。15、原生质体：指除去细胞壁的细胞或是说一个被质膜所包围的裸露细胞。16、传代：将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养。17、原代培养：也称初代培养期。从体内取出组织接种在培养瓶中培养到第一次传代前阶段，一般持续1-4周。18、细胞系：经过再培养后而形成的具有增殖能力、特性专一、类型均匀的培养细胞。22、诱变育种是指用物理、化学因素诱导植物的遗传特性发生变异，再从变异群体中选择符合人们某种要求的单株，进而培育成新的品种或种

5、质的育种方法。23、基因的直接进化：在分子水平上，对目标基因直接处理，然后通过高通量的筛选方法，提高目标蛋白的性能。基因的直接进化，可使已有基因获得新的特性，可获得自然界中不存在的基因，可解决许多新的理论和应用问题。24、酶工程：研究酶的生产和应用的技术过程，包括酶的制备、酶的固定化、酶分子修饰与改性和酶反应器等。26、酶分子修饰：通过各种方法是酶分子结构发生改变，从而改变酶的催化特性的技术。27、固定化酶：固定在一定载体上并在一定空间范围发生催化反应的酶。28、酶分子定向进化：模拟自然进化过程（随机突变和自然选择），在体外进行酶基因的人工随机突变，建立突变基因文库，在人工控制条件的特殊环境下

6、，定向选择得到具有优良催化特性的酶的突变体的技术过程。1. 同尾酶：识别的序列不同，但能切出相同的粘性末端2. 基因文库：从特定生物个体中分离的全部基因，这些基因以克隆的形式存在（人工构建）。根据构建方法的不同，基因文库分为：基因组文库cDNA文库1. DNA重组技术：采用分子生物学手段，在体外将DNA分子插入病毒、质粒或其它载体，构成重组的遗传物质，导入宿主细胞并且持续稳定的表达，从而获得新特性或新品种。3. 人工种子：即人为制造的种子，它是一种含有植物胚状体或芽、营养成分、激素以及其它成分的人工胶囊。4. 干细胞：动物胚胎及某些器官中具有自我复制和多向分化潜能的原始细胞，是重建、修复病损或

7、者衰老组织、器官功能的理想种子细胞。5. 反义RNA技术：与靶核酸(如mRNA或有义DNA)链互补的RNA分子，可抑制靶核酸的功能。6. 基因表达载体：将目标基因导入宿主细胞，并能够表达目标基因的载体。二、选择题1. 基因工程的实质是（A ）A. 基因重组   B. 基因突变 C. 产生新的蛋白质 D. 产生新的基因2. 植物组织培养是指（ C ）A. 离体的植物器官或细胞培育成愈伤组织 B. 愈伤组织培育成植株C. 离体的植物器官、组织或细胞培养成完整植物体D. 愈伤组织形成高度液泡化组织3. 植物体细胞杂交要先去除细胞壁的原因是（ C ）A. 植物体细胞的结构组成中不包

8、括细胞壁B. 细胞壁使原生质体失去活力C. 细胞壁阻碍了原生质体的融合D. 细胞壁不是原生质的组成部分4. 植物体细胞杂交的结果是（ A ）A. 产生杂种植株B. 产生杂种细胞C. 原生质体融合 D. 形成愈伤组织5. 科学家把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合，培育出的驱蚊草含有香茅醛，能散发出一种特殊的达到驱蚊且对人体无害的效果。下列关于驱蚊草培育的叙述中，错误的是（ C ）A. 驱蚊草的培育属于细胞工程育种，其优点是能克服远源杂交不亲和的障碍B. 驱蚊草培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或离心、振动、电刺激等方法C. 驱蚊草培育过程是植物体细胞杂交，不同于植物组织培

9、养，无愈伤组织和试管苗形成D. 驱蚊草不能通过天竺葵和香茅草杂交而获得是因为不同物种间存在生殖隔离6. 将胡萝卜韧皮部细胞培养成幼苗时，下列条件中不需要的是（ D ）A. 具有完整细胞核的细胞 B. 一定的营养物质和植物激素C. 离体状态 D. 导入指定基因7. 植物体细胞杂交的目的中错误的是（ B ）A. 把两个植物体的优良性状集中在杂种植株上B. 获得杂种植株C. 克服远源杂交不亲和的障碍D. 实现原生质体的融合8. 植物组织培养的用途中不正确的是（D ）A. 快速繁殖 B. 生产新品种 C. 生产生物碱 D. 生产白细胞介素29. A种植物的细胞和B种植物细胞的结构如下图所示（仅显示细胞

10、核），将A、B两种植物细胞去掉细胞壁后，诱导二者的原生质体融合，形成单核的杂种细胞，若经过组织培养后得到了杂种植株，则该杂种植株是（ C ）A. 二倍体；基因型是DdYyRr B. 三倍体；基因型是DdYyRrC. 四倍体；基因型是DdYyRr D. 四倍体；基因型是DdddYYyyRRrr10. 以下关于原生质的叙述，正确的是（ C ）A. 原生质泛指细胞内的基质 B. 原生质就是细胞质C. 一个动物细胞就是一团原生质 D. 细胞膜、细胞核和细胞壁是原生质11. 不能人工诱导原生质体融合的方法是（ D ）A. 振动 B. 电刺激 C. PEG试剂 D. 重压12. 植物细胞表现出全能性的必要

11、条件是（ C ）A. 给予适宜的营养和外界条件B. 导入其他植物细胞的基因C. 脱离母体后，给予适宜的营养和外界条件D. 将成熟筛管的细胞核移植到去核的卵细胞内13. 细胞具有全能性的原因是（ C ）A. 生物体细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能B. 生物体的每一个细胞都具有全能性C. 生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因D. 生物体的每一个细胞都是由受精卵发育来的14. 植物组织培养过程中的脱分化是指（ C ）A. 植物体的分生组织通过细胞分裂产生新细胞B. 未成熟的种子经过处理培育出幼苗的过程C. 植物的器官、组织或细胞，通过离体培养产生愈伤组织的过程D. 取植物的枝芽培育成一株新

12、植物的过程14. 下列植物细胞全能性最高的是（ A ）A. 形成层细胞 B. 韧皮部细胞C. 木质部细胞D. 叶肉细胞15. 植物组织培养过程的顺序是（ A ） 离体的植物器官、组织或细胞 根、芽 愈伤组织 脱分化 再分化 植物体A. B. C. D. 16. 下列有关细胞工程的叙述不正确的是（ C ）A. 在细胞整体水平上定向改变遗传物质B. 在细胞器水平上定向改变遗传物质C. 在细胞器水平上定向改变细胞核的遗传物质D. 在细胞整体水平上获得细胞产品17. 下列细胞全能性最高的是（ C ）A. 植物的卵细胞B. 植物的精子细胞C. 被子植物的受精卵D. 被子植物的的叶肉细胞18. 植物体细胞

13、杂交的目的是（ C ）A. 用酶解法去掉细胞壁分离出有活力的原生质体B. 以人工诱导法使两个不同植物的原生质体融合C. 用植物组织培养法培养融合的原生质体得到杂种植株D. 通过以上三者来完成19. 下列提法正确的是（ D ）A. 原生质专指细胞质 B. 人体内的水都属于原生质C. 细胞核不是原生质 D. 一个动物细胞就是一团原生质20.（多选）有关原生质体的下列叙述中，正确的是（ AC ）A. 组成原生质体的主要生命物质是蛋白质和核酸B. 原生质体包括细胞膜、液泡膜及两者之间的原生质C. 被脱掉细胞壁的植物裸露细胞是原生质体D. 原生质体只能用于植物细胞工程21.（多选）下图为植物组织培养过程

14、示意图，则下列叙述正确的是（ ABD ）A. 植物组织培养依据的生物学原理是细胞的全能性B. 过程是指植物的营养生长和生殖生长阶段C. 将经脱分化培养成时，再植上人造种皮即可获得人工种子D. 的再分化过程中，诱导生根的激素为细胞分裂素和生长素22、基因工程操作的三大基本元件是 （A ）I 供体 II 受体 III 载体 IV 抗体 V 配体 I + II + III I + III + IV II + III + IV II + IV + V III + IV + V23、基因工程的单元操作顺序是 （ B ） 增，转，检，切，接 切，接，转，增，检 接，转，增，检，切 检，切，接，增，转 切，

15、接，增，转，检24、mRNA 分离纯化技术的关键是 （E ） 细胞的温和破碎 分离系统中不得含有痕量的 SDS 高离子强度缓冲液的使用 密度梯度超离心 严防核酸酶的降解25、cDNA 第一链合成所需的引物是 （ D ） Poly A Poly C Poly G Poly T 发夹结构26、cDNA 法获得目的基因的优点是 ( B ) 成功率高 不含内含子 操作简便 表达产物可以分泌 能纠正密码子的偏爱性27、下列基因调控元件中属于反式调控元件的是 （A ） 阻遏蛋白 启动子 操作子 终止子 增强子28、外源基因在大肠杆菌中以融合蛋白的形式表达的优点是 【B 】 I 融合基因能稳定扩增 II 融

16、合蛋白能抗蛋白酶的降解 III 表达产物易于亲和层析分离 III I + II I + III II + III I + II + III29、基因工程菌中重组质粒的丢失机制是 （B ） 重组质粒渗透至细胞外 重组质粒被细胞内核酸酶降解 重组质粒在细胞分裂时不均匀分配 重组质粒杀死受体细胞 重组质粒刺激受体细胞提高其通透性30、细胞具有全能性的原因是 （C ）A生物体细胞具有发育成完整个体的潜能B生物体的每一个细胞都具有全能性C生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因D生物体的每一个细胞都是由受精卵发育来的31、与传统育种相比，植物体细胞杂交在育种作物新品种方面的重大突破表现在 （ B ）A

17、证明杂种细胞具有全能性B克服远缘杂交不亲和的障碍C缩短育种周期，减少盲目性D快速培育无病毒植株，保留杂种优势32、下列关于植物体细胞杂交过程的叙述中，不正确的是 （C ）A用酶解法去掉细胞壁分离出有活力的原生质体B诱导两种植物的原生质体融合进而形成杂种细胞C单个的杂种细胞在组织培养过程中不要经过脱分化D杂种细胞最终培养为杂种植株33、下列哪种生物技术能有效的打破物种的界限，定向地改造生物的遗传性状，培育新的农作物优良品种 （ D ）A单倍体育种技术 B诱变育种技术C杂交育种技术 D细胞工程技术34、动物细胞培养的理论基础是 （ A ）A细胞分裂 B细胞分化C细胞全能性 D细胞癌变35、单克隆抗

18、体的制备过程中引入骨髓瘤细胞的目的是 （A ）A能使杂交细胞大量增殖B产生特异性强的个体C是细胞融合容易进行D是产生的抗体纯度更高36、下列关于动物细胞培养的叙述中，不正确的是 （ C ）A动物细胞培养前要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散开来B通常将动物组织细胞消化后的初次培养称为原代培养C细胞的癌变通常发生在原代培养向传代培养的过渡过程中D传代培养的细胞在传至1050代左右时，部分细胞的核型可能发生变化37、在下列自然现象或科学研究成果中，能为“动物细胞具有全能性”观点提供直接证据的是 （ B ）A壁虎断尾后重新长出尾部B蜜蜂的未受精卵细胞发育成雄蜂C用体外培养的皮肤治疗烧伤病人D小鼠腺细胞

19、的自我复制38、细胞株的特点是 （C ）A遗传物质没有改变，可以无限传代B遗传物质发生改变，不可无限传代C遗传物质没有改变，不可无限传代D遗传物质发生改变，有癌变特点，可以无限传代39、生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成功“复生”野驴的方法是 （ C ）A将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体B将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体C取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵母细胞中，经孕育培养成新个体D将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体40、酶工程的技术过程是 （ C ）A、利用酶的

20、催化作用将底物转化为产物B、通过发酵生产和分离纯化获得所需酶C、酶的生产与应用D、酶在工业上大规模应用 42、酶分子的物理修饰是通过物理方法改变酶分子结构而改变酶的催化特性（ C ）A、组成单位B、侧链基团C、空间构象D、空间构型43、酶分子氨基酸修饰的分子修饰 （ C ）A、只能用于核酸类酶B、只能用于蛋白类酶C、可以用于蛋白类酶和核酸类酶D、不能用于蛋白类酶和核酸类酶44、酶的膜反应器是 （ A ）A、将酶催化反应与膜分离组合在一起B、利用酶膜进行反应C、利用半透膜进行底物与产物分离D、利用半透膜进行酶与产物分离三、判断题1、 基因是不可分割的最小的重组单位和突变单位。（×）2、

21、 cDNA文库不包含内含子。（）3、 Western杂交是DNARNA之间的杂交。（×）4、如果需要得到真核生物基因的完整序列，必须用基因组文库方能达到。（）5、基因是不可分割的最小的重组单位和突变单位。（×）6、克隆的本质特征是生物个体在遗传组成上的完全一致性。（）7、假基因不能合成功能蛋白质，是相应的正常基因突变引起的。（）8、Northern杂交是DNA-RNA之间的杂交。（）9、核酸Tm的高低与DNA分子中G+C的含量有关，碱基数相同的情况下，其含量越高，则Tm越高。（）10、农杆菌介导法和基因枪法是植物转化的主要方法（）11、（）有一些来源不同的限制性内切酶识别的

22、是同样的核苷酸序列，这类酶称为同裂酶。12、检测外源基因的导入时，PCR的准确性要高于Southern杂交的准确性。（×）13、转基因食品目前存在的最大问题是我们无法检测某种食品到底是不是转基因食品。（×）14、转基因生物直接食用的，称为“转基因食品”，而作为加工原料生产的食品，则不能被称为“转基因食品”。 （×） 15、质粒DNA进行电泳时，其三种构型中，开环DNA跑的最快，共价闭环形DNA跑得最慢。（×）16、在生物技术的五大工程中，生化工程是核心技术，它能带动其他技术的发展。（×）17、cDNA是以DNA为起始材料，经过复制得到的互补DN

23、A。（×）18、DNA的复制是全保留不连续复制。（×）19、基因是一个功能单位，但不是一个不可分割的最小的重组单位和突变单位。（）20、Western杂交可以检测外源DNA的导入与否。（×）21、生物技术是由多学科综合而成的一门新学科。（）22、1977年，美国首先采用大肠杆菌生产了人类第一个基因工程药物人生长激素释放抑制剂激素。（）23、生物技术是一门新兴学科，它包括当代生物技术和现代生物技术两部分.（）24、生物技术主要包括五项技术（工程）。（）25、现代生物技术是所有自然科学领域中涵盖范围最广的学科之一。（）26、本世纪初，遗传学的建立及其应用，产生了遗传育

24、种学，并于60年代取得了辉煌的成就，被誉为“第一次绿色革命”。（ ）27、无论用哪种转化方法均可用PBR322作载体（×）28、进入细菌的外来DNA之所以被降解，是因为细菌只修饰自身DNA，不修饰外来DNA（×）29、只有粘粒端才可以被连接起来（×）30、用自身作引物合成的cDNA链，往往cDNA并不完整（×）31、所谓半保留复制就是以DNA亲本链作为合成新子链DNA的模板，这样产生的双链DNA分子由一条旧链和一条新链组成。（）32、任何细胞都可用作受体细胞。（×）33、克隆子就是重组子。（×）34、原核生物细胞是最理想的受体细胞。（

25、）35、目的基因来源于各种生物，其中真核生物染色体基因组是获得目的基因的主要来源。（）36、E.coli DNA连接酶只能催化双链DNA片断互补黏性末端之间的连接。（）37、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。 （ ）38、酶的分类与命名的基础是酶的专一性。 （ ）39、酶活力指在一定条件下酶所催化的反应速度，反应速度越大，意味着酶活力越高。 （）40、液体深层发酵是目前酶发酵生产的主要方式。 （）41、培养基中的碳源，其唯一作用是能够向细胞提供碳素化合物的营养物质。 （）42、膜分离过程中，膜的作用是选择性地让小于其孔径的物质颗粒成分或分子通过，而把大于其孔径的颗粒截留。 （）43、在酶与底物

26、、酶与竞争性抑制剂、酶与辅酶之间都是互配的分子对，在酶的亲和层析分离中，可把分子对中的任何一方作为固定相。 （）44、角叉菜胶也是一种凝胶，在酶工程中常用于凝胶层析分离纯化酶。 （）45、淀粉酶在一定条件下可使淀粉液化，但不称为糊精化酶。 （）46、酶法产生饴糖使用淀粉酶和葡萄糖异构酶协同作用。 （）48、重组质粒载体可以通过细胞转化方法将重组DNA转入受体细胞 ()49、通过DNA重拍技术进行酶基因的体外随机突变，可以获得大量的正突变基因。（ ）50、基因家族重排技术需要经过不加引物的多次PCR循环，使DNA的碱基序列重新排布而引起基因突变。 ()52、包埋法可以用于酶、细胞和原生质体的固定

27、化。 （） 53、固定化原生质体由于细胞内的结构完整，可以保持细胞原有的生命活动能力。（ ）54、采用共价结合法制备得到的固定化细胞具有很好的稳定性。 （） 四、填空题1. 基因工程技术是生物技术的核心技术。2. PCR包括三个步骤_变性，退火，延伸。3. 基因工程的实施包括四个必要条件：工具酶、基因、载体和受体细胞。4. 限制性内切酶酶切DNA片断后通常有两类末端：平末端、黏性末端。5. 基因组文库中包括有内含子和外显子，而cDNA 文库中则不含内含子6. 生物技术主要是指基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、蛋白质工程。7. 现代生物技术是以20世纪70年代DNA重组技术的建立为标志。8.

28、 细胞工程包括植物细胞的体外培养技术、细胞融合技术、细胞器移植技术、克隆技术、干细胞技术。9. 酶工程包括酶的固定化技术、细胞的固定化技术、酶的修饰改造技术、酶反应器的设计等技术。10. 基因工程操作流程主要包括目的基因分离、与克隆载体重组、转入受体细胞、 筛选和鉴定克隆子。11. 基因工程操作流程主要包括目的基因分离、与克隆载体重组、转入受体细胞、筛选和鉴定克隆子。12. 重组DNA导入植物细胞常采用农杆菌介导的Ti质粒载体转化法、电穿孔法、微弹轰击法、花粉管通道法。导入动物细胞常用的方法有病毒颗粒介导的病毒载体转导法、磷酸钙转染法、显微注射法等。13. 酶的生产方法有提取法，发酵法和化学合

29、成法。14. 酶分子修饰的主要目的是改进酶的性能，即提高酶的活力、减少抗原性，增加稳定性。15. 根据分子中起催化作用的主要组分的不同，酶可以分为 蛋白酶 和 核酶 两大类。16. 动物细胞培养方法主要有悬浮培养，贴壁培养、固定化细胞培养。17. 定点突变是在DNA序列的 某一特定位点上，进行碱基的改变，从而获得 突变基因 的操作技术。18. 细胞工程包括植物细胞的体外培养技术、细胞融合技术、细胞器移植技术、克隆技术、干细胞技术。19. 酶工程包括酶的固定化技术、细胞的固定化技术、酶的修饰改造技术、酶反应器的设计等技术。20. 基因工程从研究内容上主要包括（在供体细胞中用限制性内切酶切割基因）

30、、（把获得的目的基因与制备好的运载体用DNA连接）、（把重组体进入宿主细胞）和（筛选出能表达目的基因的受体细胞）等4方面。21. cosmid vector的特点主要包括（具有l噬菌体的特性）、（具有质粒载体的特性）、（方便的选择）、（高容量的克隆能力）。22. 细胞融合技术的主要过程主要包括（制备原生质体）、（诱导细胞融合）、（筛选杂合细胞）三个步骤。23. 植物组织培养过程中生长素对细胞分裂素的比值（低）高/低有利于促进胚芽及胚根的诱导分化。24. 细胞融合技术中杂合体的鉴别与筛选技术主要包括（显微镜鉴别）、（互补法）、（细胞与分子生物学的方法）、（再生体植株表型）等手段。25. 按分化潜

31、能的大小，干细胞基本上可以分为（全能干细胞）、（多能性干细胞）、（专一性干细胞）三种类型。26. 液体深层发酵是近年来发展起来的先进发酵技术，与其它发酵方法相比，它的优点主要包括（液体悬浮状态有利微生物生长）、（在液体中菌体及营养物、产物易于扩散，使发酵可在均质条件下进行，便于控制易进行自动化控制）、（液体输送方便，易于机械化操作）、（占地小，易进行自动化控制）、（产品易于提取、精制）等5个方面。27. 温度对发酵过程的影响主要体现在（影响酶促反应速率）、（改变菌体代谢物的合成方向）、（影响代谢调控机制）、（影响发酵液理化性质）等4个方面。28. 优良产酶菌株的筛选条件主要包括（繁殖快，产酶高

32、）、（能在较经济的底物上生长良好）、（产酶性能稳定、菌株不易退化，不易受污染）、（产的酶易分离纯化，不是致病菌）4个方面。29. 酶分子修饰主要有（金属离子置换）、（大分子结合修饰）、（侧链基团修饰）、（主链的有限水解修饰）、（氨基酸置换修饰）、（物理修饰）等6种方法。30. 固定化酶的主要缺点是（酶易失活）。31. 植物细胞融合技术的主要过程主要包括（制备原生质体）、（诱导细胞融合）、（筛选杂合细胞）三个步骤。32. 作为基因操作的载体，应具备的基本条件主要有 （具有对受体细胞的可转移性，并在宿主细胞 内能独立复制） 、（有选择性标记，便于重组DNA分子的检测） 、（有一段多克隆位点）、（分

33、子量小，拷贝数多）、（容易从宿主细胞中分离纯化）。33. 分批培养条件下的微生物生长曲线可以分为（延滞期）、（加速生长期）、（指数生长期）、（减速期）、（稳定期）和（衰亡期）等六个时期。34. 工业发酵按微生物对氧的不同需求可分为按培养基的物理性状可分为（固体发酵）、（液体发酵）；按发酵菌的种类可分为（好氧发酵）及（厌氧发酵）两种发酵形式。35. 植物组织培养主要包括预备阶段、(诱导去分化)、（继代增殖）、（生根发芽）、（移栽成活）等环节。36. 细胞融合技术中杂合体的鉴别与筛选技术主要包括（显微镜观察）、（互补法）、（细胞与分子生物学方法）、（再生植株表型观察）等手段。37. 植物脱病毒的途

34、径主要有（物理学方法）、（化学方法）、（生物学方法）、（综合脱毒法）等四种。38. 干细胞的研究主要包括（获得干细胞系）、（建立诱导分化模型）、（植入受体器官）三个阶段，应用干细胞治疗疾病与传统治疗方法相比具有（低毒性）、（不需要了解发病机制）、（可避免免疫排斥）三方面的优点。39. 微生物产酶过程中，提高酶产量可以通过（添加诱导物）、（控制阻遏物浓度）、（表面活性剂）、（添加产酶促进剂）等措施实现。40. 利用载体结合法进行酶的固定化的途径主要有（物理吸附）、（离子吸附）、（43共价结合）、（螯合法）。五、简答题1、基因工程操作过程的主要步骤有哪些？分离或合成基因；通过体外重组将基因插入载体

35、；将重组DNA导入细胞；扩增克隆的基因；筛选重组体克隆；对克隆的基因进行鉴定或测序；控制外源基因的表达；得到基因产物或转基因动物、转基因植物2、一种理想的用作克隆载体的质粒必须满足的条件是什么？（1）具有转录复制起始点。（2）具有抗菌素抗性基因。（3）具有若干限制酶切单一识别位点。（4）具有较小的分子量和较高的拷贝数。3、重组子筛选所用的核酸分析法的内容是什么？1）核酸杂交法菌落印迹原位杂交；斑点印迹杂交；Southern印迹杂交2）聚合酶链式反应法3）DNA测序法4、基因工程研究的理论依据是什么？（1）不同基因具有相同的物质基础。（2）基因是可切割的（3）基因是可以转移的（4）多肽与基因之间

36、存在对应关系（5）遗传密码是通用的（6）基因可以通过复制把遗传信息传递给下一代5、分离目的基因的途径有哪些？（1）酶切法（2）PCR法（3）化学合成法（4）基因组或cDNA文库法6、谈谈你对转基因食品的看法。转基因食品的优点：（1）可延长蔬菜的货架期及感官特性。（2）提高食品的品质。（3）提高食品的营养。（4）提高肉、奶和畜类产品的数量和质量。（5）增加农作物抗逆能力，增加农业产量。（6）生产可食性疫苗或药物（7）生物功能性食品转基因食品的安全性（1）目前有一些证据指出转基因食品具有潜在的危险。 （2）但更多科学家的试验表明转基因食品是安全的 任何一种转基因食品在上市之前都进行了大量的科学试验

37、，国家和政府有相关的法律法规进行约束，而科学家们也都抱有很严谨的治学态度。一种食品会不会造成中毒主要是看它在人体内有没有受体和能不能被代谢掉，转化的基因是经过筛选的、作用明确的，所以转基因成分不会在人体内积累，也就不会有害。7、目的基因克隆的基本方法有哪些？（1）直接从染色体DNA中分离：仅适用于原核生物、叶绿体和线粒体基因的分离，较少采用。 （2）人工合成：根据已知多肽链的氨基酸顺序，利用遗传密码表推定其核苷酸顺序再进行人工合成。适应于编码小分子多肽的基因。 （3）从mRNA合成cDNA：采用一定的方法钓取特定基因的mRNA，再通过逆转录酶催化合成其互补DNA（cDNA），除去RNA链后，再

38、用DNA聚合酶合成其互补DNA链，从而得到双链DNA。这一方法通常可得到可表达的完整基因。 （4）利用PCR合成：如已知目的基因两端的序列，则可采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术，在体外合成目的基因。 （5）从基因文库中筛选：首先建立基因组或cDNA文库，利用探针从文库中筛选目的克隆。8、cDNA文库和基因组文库的主要差别有哪些？（1）基因组文库克隆的是任何基因，包括未知功能的DNA序列；cDNA文库克隆的是具有蛋白质产物的结构基因，包括调节基因。（2）基因组文库克隆的是全部遗传信息，不受时空影响；cDNA文库克隆的是不完全的编码DNA序列，因它

39、受发育和调控因子的影响。（3）基因组文库中的编码基因是真实基因，含有内含子和外显子，而cDNA文库克隆的是不含内含子的功能基因。9、简述一项可以授予专利的生物技术发明必须满足的条件。（1）具有新颖性（2）具有创造性（3）具有应用价值（4）在申请专利说明书对发明做详尽的描述，使在同一领域的其他人能够了解执行。10、重组DNA 导入受体细胞方法（1）化合物诱导法 （2）电穿孔法 （3）农杆菌介导基因转化法 （叶盘法）（4）微弹轰击法（5）超声波处理法 （6）脂质体介导法 （7）体内注射转化法 （8）精子介导法11、简述现代生物技术在人类生产生活中的作用（1）改善农业生产、解决食品短缺提高农作物产量

40、及其品质（培育抗逆的作物优良品系、植物种苗的工厂化生产 、提高粮食品质、生物固氮，减少化肥使用量 、生物农药，生产绿色食品 ）发展畜牧业生产（动物的大量快速无性繁殖 、培育动物的优良品系 ）（2）食品生产、食品加工、食品检测（3）提高生命质量、延长人类寿命（开发制造奇特而又贵重的新型药品 、疾病的预防和诊断、基因治疗 ）（4）解决能源危机、治理环境污染（解决能源危机 、环境保护 ）（5）制造工业原料、生产贵重金属 （制造工业原料 、生产贵重金属 ）12、科学家将分离得到的成熟的胡萝卜根的韧皮部细胞进行培养，由单个细胞发育成了完整的新植株。过程图解如下，请回答与之有关的问题：（1）科学家所用的这

41、种生物技术叫做 植物组织培养 ，这个实验表明 高度分化的植物细拔仍然具有发育成完整植物的能力 。（2）通过B过程产生的愈伤组织的细胞与根的韧皮部细胞在染色体的数目上是否相同？ 相同 ；染色体上所含的遗传信息是否相同？ 相同 ；细胞的形态结构是否相同？ 不同 。13、工业化菌种的要求？(1)原料廉价、生长迅速、繁殖能力强、目的产物产量高。(2)发酵中产生的泡沫少，易于控制培养条件，酶活性高，发酵周期短。(3)抗杂菌和噬菌体的能力强。(4)不产生或少产生与目标产物相近的幅产物。(5) 菌种遗传性稳定，不易变异和退化(6)不产生任何有害的生物活性物质和毒素，保证安全生产。14、什么是产物促

42、进剂？产物促进剂举例？是指那些非细胞生长所必须的营养物，又非前体，但加入后却能提高产量的添加剂。如：链霉素生产加巴比妥，赖氨酸生产加红霉素等。如加入微量的“九二O”可以促进某些放线菌的生长，缩短发酵周期，提高抗生素的产量，因此起到生长因素的作用。还有在四环素发酵中加入硫氰化苄，菌体呼吸强，糖代谢快，而抗生素合成受阻，所以降低菌体呼吸，产量就会提高。15、为什么属于滞后合成型的酶要在细胞生长一段时间甚至进入平衡期以后才开始合成？答：属于滞后合成型的酶，之所以要在细胞生长一段时间甚至进入平衡期后才开始合成，主要有两个原因：一是由于酶的生物合成受到培养基中阻遏作用，只有随着细胞的生长，阻遏物几乎被细

43、胞用完而解除阻遏以后，酶才开始大量合成；二是由于该类型酶对所对应的mRNA稳定性好，可以在细胞生长进入平衡期后的相当长的一段时间内，继续进行酶的生物合成。16、简述定点突变技术的主要技术过程及其在酶分子修饰中的应用答：定点突变是在DNA序列中的某一特定位点上进行碱基的改变从而获得突变基因的操作技术。定位突变技术用于酶分子修饰的主要过程如下：、新的酶分子结构的设计根据已知的酶RNA或酶蛋白的化学结构和空间结构及其特性，特别是根据酶在催化活性、稳定性、抗原性和底物专一性等方面存在的问题，合理设计新的酶RNA的核苷酸排列次序或酶蛋白的氨基酸排列次序，确定欲置换的核苷酸或氨基酸及其位置。、突变基因碱基

44、序列的确定对于核酸类酶，根据欲获得的酶RNA的核苷酸排列次序，依照互补原则，确定其对应的突变基因上的碱基序列，确定需要置换的碱基及其位置。对于蛋白类酶，首先根据欲获得的酶蛋白的氨基酸排列次序，对照遗传密码，确定其对应的mRAN上的核苷酸序列，再依据碱基互补原则，确定突变基因上的碱基序列，并确定需要置换的碱基及其位置。、突变基因的获得根据欲获得的突变基因的碱基序列及其需要置换的碱基位置，首先用DNA合成仪合成含有被置换了碱基的寡核苷酶，再用此寡核苷酶为引物通过聚合酶链反应（PCR）等技术获得所需的大量突变基因。、新酶的获得将上述定位突变获得的突变基因进行体外重组，插入到适宜的基因载体中，然后通过

45、转化、转导、介导、基因枪、显微注射等技术，转入到适宜的宿主细胞，再在适宜的条件下进行表达，就可获得经过修饰的新酶。定点突变技术在酶分子修饰中试一种行之有效的常用方法，定点突变技术为氨基酸置换修饰和核苷酸置换修饰提供了先进、可靠的手段。17、何谓固定化酶？固定化酶的特性与游离酶的比较有哪些改变？答：固定化酶是指固定在一定载体上并在一定的空间范围内进行催化反应的酶。固定化酶既保持了酶的催化功能，又克服了游离酶的不足之处，具有提高酶的催化效率，增强稳定性，可反复或连续使用以及易于和反应产物分开等显著优点。固定化酶与游离酶比较，其催化特性主要有下列变化：固定化酶的稳定性一般比游离酶的稳定性好，主要表现

46、在：对热稳定性提高，可以耐受较高的温度；保存稳定性好，可以在一定条件下保存较长时间；对蛋白酶的抵抗性增强，不易被蛋白酶水解；对变性剂耐受性提高，在尿素、有机溶剂和盐酸胍等蛋白质变性剂 的作用下，仍可保留较高的酶活力等。固定化酶的最适作用温度一般与游离酶差不多，活化能也变化不大，但也有些固定化酶的最适温度与游离酶比较会有较明显的变化。酶经过固定化后，其作用的最适pH往往会发生一些变化。固定化酶的底物特异性与游离酶比较可能有些不同，其变化与底物相对分子质量的大小有一定关系。对于那些作用于低分子底物的酶，固定化前后的底物特异性没有明显改变。而对于那些可作用于大分子底物，又可作用于小分子底物的酶而言，

47、固定化酶的底物特异性往往会发生变化。18、选择酶反应器的主要依据有哪些？答：酶反应器的选择是在了解酶反应器的各种类型和特点的基础上，主要依据酶的应个形式、酶的反应动力学性质、底物和产物的理化性质等几个方面进行。 （1）依据酶的应用形式选择反应器：酶的应用形式主要有游离酶和固定化酶，酶的应用形式不同，其所使用的反应器亦有所不同。在应用游离酶进行催化反应时，酶与底物均溶解在反应溶液中，通过互相作用，进行催化反应，可以选用搅拌罐式反应器、鼓泡式反应器、喷射式反应器、膜反应器等。固定化酶具有稳定性较好，可以反复或连续使用的特点，应用固定化酶进行催化反应，可以选择填充床式反应器、流化床式反应器、鼓泡式反

48、应器、膜反应器、搅拌器式反应器等。 （2）依据酶反应动力学性质选择反应器：在考虑酶反应动力学性质对反应器选择的影响方面，主要因素有酶与底物的混合程度、底物浓度对酶反应速度的影响、反应产物对酶的反馈抑制作用以及酶催化作用的温度条件等。 （3）依据底物或产物的理化性质选择反应器：酶的催化反应是在酶的催化作用下，将底物转化为产物的过程。在催化过程中，底物和产物的理化性质直接影响酶催化反应的速率，底物或产物的相对分子质量、溶解性、黏度等性质也对反应器的选择有重要影响。19、简述现代生物技术在人类生产生活中的作用（1）改善农业生产、解决食品短缺提高农作物产量及其品质（培育抗逆的作物优良品系、植物种苗的工

49、厂化生产 、提高粮食品质、生物固氮，减少化肥使用量 、生物农药，生产绿色食品 ）发展畜牧业生产（动物的大量快速无性繁殖 、培育动物的优良品系 ）（2）食品生产、食品加工、食品检测（3）提高生命质量、延长人类寿命（开发制造奇特而又贵重的新型药品 、疾病的预防和诊断、基因治疗 ）（4）解决能源危机、治理环境污染（解决能源危机 、环境保护 ）（5）制造工业原料、生产贵重金属 （制造工业原料 、生产贵重金属 ）20. PCR的基本步骤及特点分别是什么？标准的PCR过程分为三步：1.DNA变性（90-96）：双链DNA模板在热作用下， 氢键断裂，形成单链DNA 2.退火（25-65）：系统温度降低，引物

50、与DNA模板结合，形成局部双链。3.延伸（70-75）：在Taq DNA聚合酶（在72左右最佳的活性）的作用下，以dNTP为原料，从引物的5端3端延伸，合成与模板互补的DNA链。PCR的特点：（1）特异性强 （2）敏感性高（3）快速 （4）简便 （5）可以扩增mRNA 21. 微生物发酵生产中下游加工的主要工艺流程是什么？发酵液>预处理（加热、调pH、絮凝）>细胞分离（过滤、离心、错流过滤）>细胞破碎（匀化、研磨）>细胞碎片分离>初步纯化（沉淀、超滤、离子交换、萃取、超滤）>精制（沉淀、超滤、层板分离、结晶）22. 微生物产酶中的工程菌的构建中酶基因的克隆策略是什么？（1）能产生目的酶的生物>总mRNA的纯化>mRNA>RT-PCR>与合适的载体重组、重组子的筛选与鉴定>转入宿主菌&