6种常用抗菌中药对3株常见病原性细菌的抑菌作用检测(一)

1、6 种常用抗菌中药对3 株常见病原性细菌的抑菌作用检测(一)作者：薛建江乔海霞刘进军季建军张玉妥邱景富【摘要】目的 :建立抗菌中药对临床常见病原性细菌抑菌作用的检测方法。方法 :选择 6 种常用抗菌中药（黄连、苦参、连翘、大黄、生地、知母 )，分别采用水提法制备至质量浓度 1mg/L。应用液体稀释法测定上述中药对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌和铜绿假单胞菌的最低抑菌浓度 (MIC)。结果 :建立了中药抑菌作用的检测方法。黄连、大黄与连翘抑制细菌的作用较强， MIC 值均 0.05mg/L，其中黄连对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强（ MIC 值为 0.00625mg/L）。结论 :应用本方法可以进行中

2、药抑菌作用的检测。 抗菌中药对所试验菌种表现不同的抑菌作用。【关键词】中草药；微生物敏感性试验；抗菌药；细菌【ABSTRACT】Objective:Toestablishamethodtodetecttheantibacterialactivityoftraditionalchinesemedicineagainstpathegenicbacteria.Methods:Sixvarietiesoftraditionalchinesemedicine(Coptisetc)wereselectedandextractedwithpurewatertomakeconcentratedwith1mg/

3、L.Threedifferentcommonpathogenicbacteriawereusedtodeterminetheminimalinhibitoryconcentration(MIC)invitrowithliquiddilutionmethodtotheselectedmedicine.Results:Themethodswereestablishedtodetecttheantibacterialactivityoftraditionalchinesemedicine.Threeherbshadinhibitioneffectsonthestrainsoftest,amongwh

4、ichCoptisChinesishadthestrongesteffectandMICwas0.00625g/mLtoStaphylococcusaureus.Conclusion:Themethodscanserveasareferencefortheantibacterialactivityoftraditionalchinesemedicine.Thedegreeofinhibitioneffectfordifferenttraditionalchinesemedicineondifferentbacteriaweredifferent.【KEYWORDS】ChineseHerb,Mi

5、crobialSensitivityTests中药几千年来为中国人民的健康做出了重大贡献，在现代预防和控制细菌性感染疾病中也发挥了积极作用。应用中药进行抗感染治疗具有副作用小，药物来源广泛，价格低廉等优势 1，2。在清热解毒抗菌类中药中开发抗菌药物具有良好的应用前景。长期以来，对于抗菌中药作用机理的较少认识限制了其在临床中的应用。目前，尚无统一规范的中药抗菌作用评价方法。为此，本研究拟应用抗生素最小抑菌浓度检测方法，检测 6 种常用抗菌中药（大黄、苦参、连翘、黄连、生地、知母）对三种常见病原性细菌（金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌）的抑菌作用，建立一种可以规范的中药抗菌作用检测方法。1

6、 材料与方法1.1 菌株的选择选择三种不同病原性细菌的标准株：包括金黄色葡萄球菌ATCC29213，铜绿假单胞菌ATCC27853，大肠埃希菌ATCC29523作为受试菌株，以上菌株全部购自中国药品生物制品检定所。1.2 中药的选择选择常用的清热解毒类中药（大黄、苦参、连翘、黄连、生地、知母)作为本次研究所用药物。全部药物购自河北北方学院中医门诊部。1.3 中药的提取分别将上述中药置于37温箱烘干至易于研磨为止，准确称取50g 中药于250mL 蒸馏水中混匀，浸泡1h，用微火加热煮沸30min，收集煎液，用无菌滤纸过滤，继续加水250mL，同法煎制，30min后收集。将两次煎液收集合并，应用加

7、热的方法将药液浓缩至最终质量浓度为1g/mL3。1.4 细菌的培养与稀释将选定的实验菌株，接种普通琼脂培养基35孵育 24h，进行菌落形态观察并进行生化反应再次鉴定后备用。菌液浓度的配制方法为，挑取菌落用 23mL 无菌生理盐水校正至0.5 麦氏比浊单位， 使其含菌量为 1.5 ×108CFU/L。1.5MIC 的测定按美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐的液体稀释法测定实验菌株的 MIC 值，通过琼脂平板抑菌法观察上述不同抗菌中药的MIC 结果。具体应用2 倍稀释法对药物进行稀释，稀释液为Mueller Hinton液体培养基， 每种中草药的剂量分别为0.100、0.050、0.025、0.0125、0.00625mg/L，在每个试管中加入1.5 × 108CFU/L的细菌 10L，35培养 24h，分别转种普通平板培养基， 24h 后无细菌生长的试管则为 MIC。所有试验均在不同日期重复 3 遍。2 结果中药大黄、黄连和连翘对三种受试菌株都具有较强的体外抗菌活性，MIC 值 0.050mg/L，其中黄连对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强， MIC 值为 0.025mg/L。而知母、生地和苦参的抑菌作用相对较弱， MIC 值0.100mg/L，不