胃康灵胶囊的质量控制研究

1、胃康灵胶囊的质量控制研究    【关键词】  甘草酸；,芍药苷；,高效液相色谱法；,胃康灵胶囊摘要：目的建立胃康灵胶囊中甘草芍药苷的含量测定方法。方法色谱柱为ShimPack VPODS C18(150 mm×4.6 mm,5 m)；流动相为乙腈0.1%磷酸溶液，梯度洗脱；检测波长为235 nm；柱温40；流速1 ml/min。结果甘草酸和芍药苷分别在0.15 1.50 g（r=0.999 9 n=5）范围内呈线性。甘草酸和芍药苷平均加样回收率分别为99.7%（RSD=2.67%）和99.4%（RSD=2.43%）。结论该法简便、快速

2、、可靠、可用于控制制剂质量。 关键词：甘草酸；  芍药苷；  高效液相色谱法；  胃康灵胶囊Study on the Quality Control of Weikangling CapsulesAbstract：ObjectiveTo develop a method for determining the content of glycyrrhizic acid and paeoniflorin in Weikangling Capsules by RPHPLC.MethodsThe chromatographic method was carried on

3、a ShimPack VPODS C18column(150 mm×4.6 mm,5 m).Acetonitrilewater (containing 0.1% Phosphoric acid) was used as the mobile phase with gradient elution .The detection wavelength was at 235 nm.The flow rate was 1.0 ml/min . Column temperature was 40.ResultsA good linearity was found at the concentr

4、ation range of 0.151.50 g for glycyrrhizc acid and 0.111.08 g for paeoniflorn.The average recovery were 99.7%,99.4% and the relative standard deviation was 2.67%,2.43%,respectively .ConclusionThe method is simple, rapid, reliable and can be used for the drug control.Key words：Glycyrrhizc acid ; 

5、; Paeoniflorin;  HPLC;  Weikangling Capsules    胃康灵胶囊主要由白芍、甘草、白及、延胡索、三七等8味中药组成的复方制剂，具有柔肝和胃，散淤止血，缓急止痛，去腐生新的功效。临床上用于肝胃不和、淤血阻络所致的胃脘疼痛、连及两胁、嗳气、泛酸；急、慢性胃炎，胃、十二指肠溃疡等治疗。在2005年版中国药典中，胃康灵胶囊仅以芍药苷的含量作为制剂质量控制标准，未对其它成分的含量进行控制1，具有一定的局限性，不能全面反应制剂质量。甘草是胃康灵胶囊中的主药之一，其中主要的化学成分甘草酸具有抗溃疡、抗炎和盐皮质激素样

6、作用2，因此应该对胃康灵胶囊中甘草酸的含量加以控制。本文首次建立了一个色谱条件下同时测定胃康灵胶囊中甘草酸和芍药苷含量的方法，为该药品标准的进一步研究，提供一个简便、快捷、灵敏度好，准确的参考方法。1  仪器与试药十万分之一电子分析天平（AUW220，SHIMADZU）；高效液相色谱仪（LCAvp泵，SPD10Avp紫外检测器，CTO10ASvp柱温箱，SHIMADZU）；KQ5200型超声波清洗器（上海必能信超声有限公司）；甘草酸单铵盐对盐对照品（中国药品生物制品检定所，批号：7319001）；芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：110731200407）；胃康灵胶囊（市售

7、）；乙腈（色谱纯）；水为纯净水；其它试剂均为分析纯。2  方法与结果2.1  色谱条件色谱柱：ShimPack VPODS C18（150 mm×4.6 mm,5 m）；流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液，梯度洗脱（见表1）；检测波长：235 nm；灵敏度：0.01 AUFS；流速：1.0 ml/min；柱温：40；进样量10 l。表1  流动相的梯度洗脱(略)2.2  对照品溶液的制备精密称取甘草酸单铵盐对照品7.42 mg（相当于甘草酸7.27 mg），芍药苷5.42 mg，置100 ml的量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，作为对照品溶液。2.3&#

8、160; 供试品溶液的制备取本品10粒，倾出其内容物，研细，取约0.3 g，精密称定，置具塞锥形瓶内，精密加入稀乙醇25 ml，密塞，称定重量，超声处理（功率300 W）30 min，放冷，再称定重量，用稀乙醇补足减失的重量，摇匀，0.45 m微孔滤膜滤过，取续滤液，作为供试品溶液。2.4  阴性对照溶液的制备按处方组成，分别取除甘草或白芍之外的其他药材，按供试品溶液制备项下的方法，制成阴性溶液，按上述色谱条件进行检测。结果在对照品出峰位置未见其它杂质干扰峰（见图1），说明处方中其他成分对甘草酸、芍药苷的测定无干扰。2.5  线性范围的考察精密吸取对照品溶液依次进样2.0

9、，8.0， 12.0， 16.0， 20.0 l，按上述色谱条件测定，以对照品峰面积值为纵坐标，对照品进样量为横坐标，绘制标准曲线。甘草酸回归方程和相关系数为：Y=27 630X+13 269， r=0.999 9（n=5），甘草酸和芍药苷分别在0.151.50 g，0.111.08 g范围内，其绝对进样量X（g）与峰面积Y之间呈良好的线性关系。2.6  精密度实验精密吸收甘草酸、芍药苷对照品溶液重复进样6次，测定苷草酸、芍药苷峰面积，RSD分别为0.76%， 0.23%，表明仪器精密度良好。1.芍药苷       

10、; 2.甘草酸A.对照品（controls,230 nm）  B.对照品（controls,250 nm）C.对照品（controls,235 nm）  D.样品（sample,235 nm）E.缺甘草的阴性对照（excipents,235 nm）F.缺芍药的阴性对照（excipents,235 nm） 图1  对照品与样品色谱图(略)2.7  稳定性实验取同一供试品溶液，分别于0，2，4，8，12 h进样测定，甘草酸、芍药苷峰面积RSD分别为1.27%，0.61%，表明供试品溶液在12 h内稳定。2.8  重现性实验取同一批号（060204）

11、样品6份，按供试品溶液制备方法制备，并按上述色谱条件测定，测得甘草酸含量为1.7 mg/粒，RSD为1.43%，芍药苷含量为2.1 mg/粒，RSD为1.54%。2.9  加样回收率实验取已知含量样品（甘草酸含量1.7 mg/粒、芍药苷含量2.1 mg/粒）粉末约0.15 g，定量加入甘草酸和芍药苷对照品适量，依“2.3”项下的方法操作，制备所需溶液测定，结果见表2。表2  回收率实验结果(略)2.10  样品含量测定分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液，在上述色谱条件下进样，记录各色谱峰的峰面积，每个样品重复2次，峰面积取平均值，按外标法计算含量。含量测定结果见表

12、3。表3  样品中甘草酸、芍药苷含量测定结果(略)*为每粒中含量3  讨论3.1  样品提取溶剂的考察在参考有关文献的基础上，对胃康灵胶囊的提取溶剂进行了考察。取同一批号样品分别精密加入25 ml的正丁醇3、50%甲醇4、稀乙醇5，6、纯甲醇、无水乙醇7，比较5种不同溶剂的提取效果。结果稀乙醇可较好去除干扰杂质，且提取完全，易回收。故选择稀乙醇作为样品提取溶剂。3.2  检测波长的选择文献报道检测波长芍药苷为230 nm，甘草酸为250 nm。本试验曾分别在230，250 nm波长处测定两种对照品的含量，芍药苷在250 nm处的相对吸收值小于0.5，对灵

13、敏度影响较大，甘草酸在230 nm处的相对吸收值为0.7，对灵敏度有一定影响，但不妨碍含量测定。经研究发现在235 nm处，甘草酸吸收值有所增加（相对吸收值为0.8），芍药苷吸收值减少不明显（相对吸收值为0.9），而且在该波长处测定，可减少杂质影响，因此确定235 nm为其检测波长。3.3  流动相的选择我们对流动相进行了反复摸索，结果表明，流动相用甲醇/水系统对甘草酸的分离效果较差，不能达到基线分离。采用乙腈/水系统可以初步分离，但分离度和峰形达不到要求。最终在流动相系统中添加0.1%磷酸溶液，能够将待测物与杂质完全分离，并取得较好的峰形和较高的理论塔板数，效果满意。为了保证各指标

14、成分与其他成分有良好分离且又能够在尽可能短的时间内完成分析，我们采用了梯度洗脱，并优化了洗脱条件，从而既缩短分析时间，又保证了良好的分离。有关中成药中甘草酸和芍药苷含量测定的方法，文献较多，但都是在两个波长下分别测定两者含量的，操作较繁琐，而在同一流动相系统下同一检测波长处同时测定中成药中甘草酸和芍药苷含量的研究，目前还尚未见报道。本文首次建立了在一个色谱条件下同时测定胃康灵胶囊中的两个活性成分的方法，使制剂的质量控制更加系统全面，并且操作简捷，省事，便于广泛推广。参考文献：1  国家药典委员会.中国药典，部S.北京：化学工业出版社，2005：518.2  肖培根.新编中药志M.北京：化学工业出版社，2002：259.3  杨江千，陈  理，孙靖霞.RP-HPLC测定强肝胶囊中芍药苷及甘草酸的含量J.中成药，2001，23（2）：90.4  周  欣，杨文业. 高效液相色谱法测定丹栀逍遥丸中栀子苷、芍药苷、丹皮酚和甘草酸含量J.药物分析杂志，2005