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文档简介
1、选修1专题2课题1微生物的实验室培养(预)【预习目标】a. 了解有关培养基的基础知识。b. 了解消毒和灭菌方法。【知识点梳理】基础知识(一)培养基1 .根据物理性质划分的培养基种类、用途。标准培养基类型配制特点主要应用加入琼脂较多物理性质半固体培养基不加入琼脂工业生产、连续培养2.培养基的基本成分和主要来源营界物质含义主要来源能提供碳兀素的物质氮源无机物:N2、NH3氨盐、硝酸盐;有机物:尿素、牛肉膏、蛋白月东等细胞生命活动必不PJ少的物质培养基、大气、代谢产物提供除碳、氮兀素以外的各种重要兀素,包括某些大量元素(二)无菌技术2 .主要方面(1)对实验操作空间、操作者的衣着和手进行(2)将培养
2、器皿、接种用具和培养基等器具进行;(3)为避免周围微生物污染,实验操作应在附近旁进行;(4)避免已灭菌处理的材料用具与周围物品相接触。3 .消毒与灭菌的比较项目理化因素强度消灭微生物数量是否消火芽抱和抱子灭菌3.常用的消毒与灭菌的方法(1)消毒方法:日常生活经常用到的是对一些不耐高温的液体,则使用;对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒石炭酸或煤酚皂等溶液以增强消毒效果,然后使用实验操作者的双手使用进行消毒;饮水水源用进行消毒。(2)灭菌方法:接种环、接种针、试管口等使用玻璃器皿、金属用具等使用所用器械是干热灭菌箱培养基、无菌水等使用所用器械是高压蒸汽灭菌锅表面灭菌和空气灭菌等使用所用器械是紫外
3、灯。实验操作(1)制备牛肉膏蛋白月东固体培养基操作步骤计算一一溶化一一倒平板的方法及注意事项甲乙丙丁a.请用文字和箭头写出正确的倒平板操作流程:b.甲、乙、丙中的灭菌方法是。c. 丁中的操作需要等待才能进行。(2)纯化大肠杆菌的方法纯化培养原理:想方设法在培养基上得到由一个细菌繁殖而来的肉眼可见的菌落,即可获得较纯的菌种。纯化大肠杆菌的关键步骤是。常用的微生物接种方法有两种a.平板划线法:是通过接种环在琼脂固体培养基表面的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。b.稀释涂布平板法:是将菌液进行一系列的,然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。(3)菌种的保存方法对
4、于频繁使用的菌种,可以采用的方法。对于需要长期保存的菌种,可以采用的方法。【课前热身】1 .有关稀释涂布平板法,叙述错误的是()A.首先将菌液进行一系列的梯度稀释B.然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面C.在适宜的条件下培育D.结果都是可在培养基表面形成单个的菌落2 .将大肠杆菌从菌种试管接种到另一支试管的操作,下列说法有误的一项是()A.整个接种过程都要在酒精灯的火焰附近进行B.接种环放在酒精灯火焰上灼烧之后即可伸入菌种试管挑取少许菌种C.菌种试管口和待接种的试管口接种前后都要通过酒精灯火焰2至3次D.带菌的接种环应在培养基面上轻轻划线3 .在分离、纯化大肠杆菌实验中,划线接
5、种(甲)、培养结果(乙)如下图,且甲乙的对应位置不变。有关叙述,错误的是()A.配制培养基时需进行高压蒸汽灭菌B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落C.图示接种过程中接种环至少灼烧了5次D.甲中a区域为划线的起始位置4 .如图为微生物平板划线示意图,划线的顺序为1、2、3、4、5,下列操作方法正确的是()A.操作前要将接种环放在火焰旁灭菌B.划线操作须在火焰上进行C.在5区域中才可以得到所需菌落D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌5 .关于消毒和灭菌的不正确理解是()A.灭菌是指杀灭环境中的一切微生物的细胞、包括芽抱和抱子B.消毒和灭菌实质上是相同的C.常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌D.常用消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线法、化学药物法6.细菌培养过程中分别采用了高压
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