NMDA受体2B亚单位在C57BI6小鼠生后脑听觉功能发育中的作用

1、.NMDA受体2B亚单位在C57BI6小鼠生后脑听觉功能发育中的作用【摘要】：本实验室以往的研究表明，在生后发育“关键期”内对大鼠施行单耳堵塞，成年后测定显示，堵塞耳对侧中枢神经元听反应敏感性降低，并伴随相关脑区NMDA受体密度的下降，NMDA受体亚单位mRNA表达减弱。推测NMDA受体与脑听觉功能发育及其可塑性相关。本实验采用脑区埋管给药技术，在C57B1/6小鼠生后发育“关键期”内，在其左侧大脑听皮层定位、慢性施加NMDA受体NR2B亚单位非竞争性特异拮抗剂MK-801。待成年后，应用行为学方法、常规电生理学方法和形态学方法，考察在发育“关键期”内，听皮层定位、慢性施加MK-801对小鼠脑

2、听觉功能发育的影响。1、NR2B对听空间方位分辨行为的影响实验在正常组、单纯手术组和实验组C57B1/6小鼠上进行，应用本实验室自行研制的听空间方位分辨测定装置，研究了在动物发育“关键期”内听皮层定位、慢性施加MK-801对其听空间方位辨别能力的影响。结果提示，实验组动物建立朝向条件反射所需的训练时间长，成功率低；当取食时间限制为7.5秒内时，即不能建立朝向条件反射，而正常组和手术组动物在此时间限制下能够建立良好的朝向条件反射。在保证相近的全场取食成功率前提下，实验组动物的朝向条件反射反应时较正常组和手术组延长65，且听空间方位角分辨误差较正常组和手术组增大210。正常组和手术组存在取食的优势

3、方位角，在优势方位角范围内，反应时和方位误差明显小于全场的反应时和方位误差；而实验组动物没有取食优势方位，其在各个方位的反应时和方位误差接近。实验结果证实，实验组动物听空间方位分辨能力较正常组和手术组动物明显降低。2、NRZB对听皮层神经元听觉敏感性发育的影响实验分别在7只正常组动物、5只手术组动物和6只实验组动物上进行，采用常规电生理学方法，分别记录了3个组各81个初级听皮层听神经元听反应，考察了在发育“关键期”内，听皮层定位、慢性施加MK801对其听觉敏感性的影响。结果显示，实验组动物初级听皮层听神经元分布范围较局限，埋管位置内和埋管位置附近听神经元数量较正常组和手木组明显减少，神经元听反

4、应中心弥散地分布在记录皮层对测听空间，且有一部分神经元的听反应中心落在测量方位以外的听空间里，而正常组和手术组初级听皮层神经元听反应中心集中落在对侧听空间的水平方位20“60“，垂直方位上方20”下方20“的范国内。实验组初级听皮层神经元最佳频率分布在410kHZ，较正常组和手术组最佳频率分布（520kHZ）明显降低。实验组短潜伏期神经元数量较正常组和手术组减少，阈值也较正常组和手术组明显升高，平均提高10dBSPL。实验组频率调谐曲线较正常组和手术组增宽，Q值降低，锐度明显减小。实验组听神经元的听空间反应域较正常组和手术组明显增大，其中阈上sdB声刺激强度时，实验组的听空间反应域平均较正常组

5、和手术组扩大300以上。结果提示，实验组动物听觉敏感性较正常组和手术组动物明显降低。2、NRZB对听皮层形态发育的影晌实验在正常组、手术组和实验组各3只动物上进行，采用快速HE冰冻切片Sheehc。染色法，考察了在发育“矢键期”内，听皮层定位、慢性施加MK801对小鼠听皮层神经组织发育的影响。结果显示，实验组动物听皮层受药侧厚度较正常组和手术组动物明显变薄，听皮层细胞密度明显减少，存在极显著差异（P0001），非受药侧皮层较正常组和手术组略有增厚，细胞密度略有增加，存在显著性差异（P005），11推测可能是动物发育中的一种代偿作用。以上实验结果提示，NMDA受休在小鼠生后脑神经元听空间敏感性发

6、育中起重要作用。【关键词】：C57B1/6听觉听皮层空间方位敏感性可塑性【学位授予单位】：华东师范大学【学位级别】：博士【学位授予年份】：2002【分类号】：Q43【目录】：中文摘要7-10英文摘要10-14第一章实验动物、埋管手术与慢性施药14-271实验动物14-152实验动物分组153埋管手术15-164慢性施药16-175观察与成活率记录17-196讨论19-217参考文献21-238版图与说明23-27第二章NR2B对听空间方位分辨行为的影响27-54摘要27前言27-541材料与方法28-302结果30-35（1）朝向条件反射的建立30-31（2）取食率31-32（3）反应时32-

7、33（4）方位误差33-34（5）一定方位误差范围内的取食成功率34-353讨论35-37（1）朝向条件反射的建立35-36（2）取食率、反应时和方位误差的相关性36-37（3）一定方位误差范围内的取食成功率374结论375参考文献37-396版图与说明39-54第三章NR2B对听皮层神经元听觉敏感性发育的影响54-84摘要54-55方法55-841材料和方法55-572结果57-60（1）初级听皮层神经元分布57（2）记录到听神经元的皮层深度57（3）听反应中心57-58（4）最佳频率和最低阈值58（5）潜伏期58（6）频率调谐曲线与Q_（ndB）值58-59（7）听空间反应域59-603讨论60-63（1）初级听皮层神经元分布60（2）听反应中心60-61（3）最佳频率、阈值、潜伏期、频率调谐曲线与Q_（ndB）值61-62（4）听空间反应域62-634结论635参考文献63-696版图与说明69-84第四章NR2B对听皮层形态发育的影响84-96摘要84前言84-961取材852快速HE冰冻切片Sheehcm染色法85-863封片观察86-874结果87-88（1）听皮层厚度87（2）听皮层细胞密