基因工程的基本内容

1、限制酶限制酶切点切点切点切点（随载体的复制而复制）（随载体的复制而复制）练习练习 2和7能连接形成ACGT TGCA； 4和8能连接形成GAATTC CTTAAG； 3和6能连接形成GCGC CGCG； 1和5能连接形成CTGCAG GACGTC。教材教材P7思考与探究思考与探究12.2.提示：迄今为止，基因工程中使用的限制酶绝大提示：迄今为止，基因工程中使用的限制酶绝大部分都是从细菌或霉菌中提取出来的，它们各自可部分都是从细菌或霉菌中提取出来的，它们各自可以识别和切断以识别和切断DNADNA上特定的碱基序列。细菌中限制酶上特定的碱基序列。细菌中限制酶之所以不切断自身之所以不切断自身DNADN

2、A，是因为微生物在长期的进化，是因为微生物在长期的进化过程中形成了一套完善的防御机制，对于外源入侵过程中形成了一套完善的防御机制，对于外源入侵的的DNADNA可以降解掉。生物在长期演化过程中，含有某可以降解掉。生物在长期演化过程中，含有某种限制酶的细胞，其种限制酶的细胞，其DNADNA分子中或者不具备这种限制分子中或者不具备这种限制酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移酶的识别切割序列，或者通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。这样，尽管细菌中含有某种限制酶也不会使自身的这样，尽管细菌中含有某种限制酶也不会使自身的D

3、NADNA被切断，并且可以防止外源被切断，并且可以防止外源DNADNA的入侵的入侵 3.3.提示：基因工程中作为载体使用的提示：基因工程中作为载体使用的DNADNA分子很多都是质粒，即独分子很多都是质粒，即独立于细菌拟核处染色体立于细菌拟核处染色体DNADNA之外的一种可以自我复制、双链闭环的之外的一种可以自我复制、双链闭环的裸露的裸露的DNADNA分子。是否任何质粒都可以作为基因工程载体使用呢？分子。是否任何质粒都可以作为基因工程载体使用呢？其实不然，作为基因工程使用的载体必需满足以下条件。其实不然，作为基因工程使用的载体必需满足以下条件。（1 1） 载体载体DNADNA必需有一个或多个限制

4、酶的切割位点，以便目的基必需有一个或多个限制酶的切割位点，以便目的基因可以插入到载体上去。这些供目的基因插入的限制酶的切点所处因可以插入到载体上去。这些供目的基因插入的限制酶的切点所处的位置，还必须是在质粒本身需要的基因片段之外，这样才不至于的位置，还必须是在质粒本身需要的基因片段之外，这样才不至于因目的基因的插入而失活。因目的基因的插入而失活。（2 2） 载体载体DNADNA必需具备自我复制的能力，或整合到受体染色体必需具备自我复制的能力，或整合到受体染色体DNADNA上随染色体上随染色体DNADNA的复制而同步复制。的复制而同步复制。（3 3） 载体载体DNADNA必需带有标记基因，以便重组后进行重组子的筛选。必需带有标记基因，以便重组后进行重组子的筛选。（4 4） 载体载体DNADNA必需是安全的，不会对受体细胞有害，或不能进入必需是安全的，不会对受体细胞有害，或不能进入到除受体细胞外的其他生物细胞中去。到除受体细胞外的其他生物细胞中去。（5 5） 载体载体DNADNA分子大小应适合，以便提取和在体外进行操作，太分子大小应适合，以便提取和在体外进行操作，太大就不便操作。大就不便操作。实际上自然存在的质粒实际上自然存在的