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文档简介

1、实验五实验五 土壤中微生物的分离土壤中微生物的分离实验目的实验目的 掌握从样品中分离不同种类的微生物，掌握从样品中分离不同种类的微生物，并进行活菌计数并进行活菌计数 巩固无菌操作的方法巩固无菌操作的方法单位时间里微生物数量或生物量（单位时间里微生物数量或生物量（Biomass）的增加）的增加。微生物生长：微生物生长：微生物生长的测定：微生物生长的测定：个体计数个体计数群体重量测定群体重量测定群体生理指标测定群体生理指标测定评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响；评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响；评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死或杀死)作

2、用的效果；作用的效果；客观地反映微生物生长的规律；客观地反映微生物生长的规律；第一节第一节 微生物生长的测定微生物生长的测定以数量变化对微生物生长情况进行测定以数量变化对微生物生长情况进行测定通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况或样品中所含微生物个体的数量（细菌、孢子、酵母菌）或样品中所含微生物个体的数量（细菌、孢子、酵母菌）培养平板计数法培养平板计数法采用培养平板计数法要求操作熟练采用培养平板计数法要求操作熟练、准确，否则难以得到正确的结果：、准确，否则难以得到正确的结果：样品充分混匀；样品充分混匀；每支移液管及涂布棒只能接触一个每

3、支移液管及涂布棒只能接触一个稀释度的菌液；稀释度的菌液；同一稀释度三个以上重复同一稀释度三个以上重复,取平均值；取平均值；每个平板上的菌落数目合适，便于每个平板上的菌落数目合适，便于准确计数；准确计数；一个菌落可能是多个细胞一起形成，所以在科研中一般用一个菌落可能是多个细胞一起形成，所以在科研中一般用菌落形成单位（菌落形成单位（colony forming units， CFU）来表示，而）来表示，而不是直接表示为细胞数。不是直接表示为细胞数。实验步骤实验步骤 将将10g土样装入含土样装入含100ml无菌水的锥形瓶中振无菌水的锥形瓶中振荡荡10min 取取1ml移入含移入含9ml无菌水的试管中，吹吸均匀，无菌水的试管中，吹吸均匀，为稀释为稀释10倍的样品倍的样品 依次进行梯度稀释依次进行梯度稀释 倒培养基倒培养基 取合适稀释度的样品取合适稀释度的样品1ml涂布涂布实验安排实验安排 10-510-610-7稀释度为细菌培养稀释度为细菌培养 牛肉膏蛋白牛肉膏蛋白胨培养基胨培养基 10-310-410-5 稀释度为放线菌培养，注意培养稀释度为放线菌培养，注意培养基在倒入平板前先加入数滴重铬酸钾溶液基在倒入平板前先加入数滴重铬酸钾溶

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