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1、1精选课件2精选课件一、实验目的一、实验目的 1、学习利用平板分离法从土壤分离微生物的基、学习利用平板分离法从土壤分离微生物的基 本操作。本操作。2、掌握微生物平板计数的方法。、掌握微生物平板计数的方法。3精选课件二、实验原理二、实验原理 稀释到适量浓度稀释到适量浓度 倾注或涂布平板倾注或涂布平板 培养培养 菌落计数菌落计数 4精选课件样品充分混匀；样品充分混匀；同一稀释度三个以上重复，同一稀释度三个以上重复，取平均值；取平均值；每个平板上的菌落数目合适，每个平板上的菌落数目合适，便于准确计数。便于准确计数。5精选课件一般用菌落形成单位（一般用菌落形成单位（colony forming uni

2、ts， CFU）来表示）来表示原样品中的细胞数。原样品中的细胞数。6精选课件7精选课件1、倒平板、倒平板2、土壤菌悬液的制备、土壤菌悬液的制备 四、实验方法四、实验方法 10g土样土样 + 90ml无菌水无菌水 振荡振荡20min3、梯度稀释、梯度稀释 取取1ml土壤菌悬液土壤菌悬液移入含移入含9ml无菌水的试管中，吹吸均匀，无菌水的试管中，吹吸均匀，为稀释为稀释10倍的样品，依次进行梯度稀释倍的样品，依次进行梯度稀释10-110-68精选课件4、涂布：取、涂布：取0.1ml适当浓度的稀释液涂布于相应平板，每个适当浓度的稀释液涂布于相应平板，每个 稀释度做稀释度做3个平行，个平行，静置静置10

3、分钟。分钟。9精选课件5、培养、培养 将细菌、真菌、放线菌培养基倒置于将细菌、真菌、放线菌培养基倒置于30培养箱中培养箱中培养培养3-5d。6、计数、计数7、挑菌（纯化）挑菌（纯化） 将培养后长出的单菌落数量、形态、培养特征进行将培养后长出的单菌落数量、形态、培养特征进行观察，分别挑取单菌落于相应平板上划线、分离，观察，分别挑取单菌落于相应平板上划线、分离， 培养，培养，检查菌落是否一致、单纯（也可以用显微镜涂片染色镜检查菌落是否一致、单纯（也可以用显微镜涂片染色镜检是否是单一的微生物），如有杂菌需进一步纯化、分检是否是单一的微生物），如有杂菌需进一步纯化、分离。离。每毫升菌落形成单位同一稀释度的三次重复平均

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