金匮肾气丸 衰老 TE TERT ELISA 实时荧光定量RT-PCR

1、 金匮肾气丸论文：金匮肾气丸对衰老模型小鼠端粒酶的影响【中文摘要】本课题在总结传统中医对衰老的认识与探讨的基础上,结合抗衰老的现代研究机制,对祖国医学中具有温补肾阳功效的金匮肾气丸进行抗衰老机制的实验研究,为中医药抗衰老提供实验研究依据。方法：(1)造模和治疗：分别给模型对照组、试验组小鼠颈部皮下注射D-半乳糖溶液(100mg/kg),同时给正常对照组小鼠颈部皮下注入相应体积的生理盐水,每日一次,连续42天。同时,试验组从造模第8天开始,每天给予金匮肾气丸水煎液灌胃(1.17g/kg),一天一次,连续35天给药。(2)D-半乳糖衰老模型小鼠的评价：观测小鼠的一般体征、体重和血清的总抗氧化能力(

2、T-AOC)。(3)组织中端粒酶(TE)含量的测定：使用ELISA试剂盒测定小鼠脑组织、肝组织以及脾组织样本中TE的含量。(4)TRET基因和-actin基因片段的克隆：提取小鼠脑组织、肝组织以及脾组织总RNA,反转录后以cDNA为模板扩增TRET基因和-actin基因,回收扩增的各基因片段与PEZ-T质粒载体连接、转化,鉴定阳性克隆后测序。(5)TERT基因相对表达水平的检测：以各克隆的基因片段的重组质粒为标准品,通过实时荧光定量P.【英文摘要】On the basis of the theories about senility of tranditional Chinese medici

3、ne and modern medicine, the anti-aging effects and mechanism of Jinkui Shenqiwan on aging model mice were investigated.Methods:(1) Aging model mice preparation and treatment:Mice in model control group and test group were subcutaneously injected with D-galactose at the dosage of 100mg/kg per day for

4、 42 days. The mice in test group were intragastricly administered with Jinkui Shenqiwan at the dosage of 1.17g/kg per day for 35 d.【关键词】金匮肾气丸 衰老 TE TERT ELISA 实时荧光定量RT-PCR【英文关键词】Jinkui Shenqiwan aging TE TERT ELISA Real-time fluorescence quantitative RT-PCR【索购全文】联系Q1：138113721 Q2：139938848【目录】金匮肾气丸对

5、衰老模型小鼠端粒酶的影响摘要7-9Abstract9-10第1章 文献综述11-211.1 传统中医学对衰老的认识与探讨11-131.1.1 传统中医学对衰老的认识11-121.1.2 传统中医学对衰老机理的解释121.1.3 传统中医养生学的发展12-131.2 现代医学对衰老的认识13-161.2.1 自由基学说13-141.2.2 线粒体DNA损伤学说141.2.3 端粒学说14-151.2.4 衰老的基因学说151.2.5 大分子交联学说151.2.6 免疫学说15-161.2.7 神经内分泌学说161.3 中药抗衰老的现代研究进展16-181.3.1 抗衰老中药对寿命的影响16-17

6、1.3.2 抗衰老中药的免疫调节作用171.3.3 抗衰老中药对体内自由基的影响171.3.4 抗衰老中药对内分泌的影响17-181.3.5 抗衰老中药对衰老相关基因的影响181.3.6 抗衰老中药对端粒酶的影响181.4 金匮肾气丸的组方原理及抗衰老的研究进展18-211.4.1 金匮肾气丸的组方原理191.4.2 金匮肾气丸抗衰老的研究进展19-21第2章 引言21-232.1 研究目的和意义212.2 技术路线21-23第3章 材料与方法23-353.1 材料23-253.1.1 实验动物233.1.2 中药233.1.3 培养基233.1.4 主要试剂23-243.1.5 常用缓冲液与

7、储存液的配制24-253.1.6 主要仪器设备253.1.7 质粒载体与菌种253.2 方法25-353.2.1 实验动物分组25-263.2.2 造模263.2.3 金匿肾气丸水煎液的制备263.2.4 给药263.2.5 样本采集263.2.6 模型的评价26-273.2.7 组织中端粒酶(TE)含量的测定27-283.2.8 组织样本RNA的提取28-293.2.9 引物设计与合成293.2.10 反转录合成cDNA29-303.2.11 TERT和-actin基因片段的克隆30-333.2.12 TERT基因相对表达量测定33-35第4章 结果与分析35-474.1 临床指标的观测354.2 血清总抗氧化能力(T-AOC)的测定35-364.3 组织中端粒酶(TE)含量的测定36-374.4 组织样本RNA的提取37-384.5 目的基因片段的RT-PCR扩增38-394.6 T-A克隆及测序394.6.1 阳性克隆的PCR筛选394.6.2 测序394.7 金匮肾气丸对TERT基因表达的影响39-47第5章 讨论47-515.