正交设计研究杭白菊总提取物及总黄酮提取工艺

1、第29卷第8期2004年8月August,2004ChinaJournalofChineseMateriaMedica中国中药杂志Vol.29,Issue8正交设计研究杭白菊总提取物及总黄酮提取工艺殷红1,2,胡永洲13,杨鑫骥2,田秀兰2,王真3(1.浙江大学药学院,浙江杭州310031;2.嘉兴学院医学院,浙江嘉兴314000;3.嘉兴市第二人民医院,浙江嘉兴314000)摘要目的:确定杭白菊总提物、。:,量为考察指标,:,:提取次数溶剂浓度超声时间:A2B3C3D3。与常规的提取方法相比,具有提取时间短、简单、。;正交试验法R284.文献标识码A文章编号100125302(2004)08

2、20737203杭白菊是一常用中药,具有散风清热、平肝明目的功效,用于风热感冒,头痛眩晕,目赤肿痛,眼目昏花1,其药用的有效成分主要是黄酮类和挥发油类。为探索杭白菊总提物及黄酮提取工艺,本实验以浸膏得率和浸膏中总黄酮含量为考察指标,采用正交试验等方法对其提取工艺进行了研究。1仪器与材料超声提取,合并提取液,过滤,旋转蒸发回收乙醇,水浴蒸干,80干燥3h,干燥器中冷0.5h迅速称重,浸膏得率(%)=浸膏重/样品重100%3,结果见表2。表1因素和水平ABCD水平乙醇浓度/%超声时间/min203040溶剂量/倍101520提取次数/次345岛津UV-2401PC紫外分光光度计,SWB5200型超

3、声清洗机(上海必能信超声有限公司),电子天平,芦丁对照品(中国药品生物制品检定所,批号008029705),其他试剂均为分析纯。杭白菊采购于浙江桐乡,经嘉兴学院医学院生药教研室黄高级讲师鉴定为杭白菊ChrysanthemummorifoliumRa2mat.。2方法与结果2.1正交实验设计及结果2.1.1正交实验设计选择乙醇浓度、超声时间、1239075602.1.3总黄酮的测定标准曲线制备精密称取120干燥至恒重的无水芦丁25mg,置100mL的容量瓶中,加60%的乙醇至刻度。精密吸取2,3,4,5,6,7mL,分别放置25mL的容量瓶中,加5%亚硝酸钠1.0mL,摇匀,静置6min,加1.

4、0%的硝酸铝1.0mL,摇匀,静置6min,加4%的氢氧化钠10.0mL,溶剂量、提取次数4个因素,进行L9(34)正交试验(表1)。以干浸膏得率和总黄酮含量为考察指标进行考察(表2)。2.1.2浸膏得率测定分别称取杭白菊二花10.000g9份2。剪碎,按正交试验表1选择的条件收稿日期2004202220通讯作者3胡永洲,Tel:(0571)87217412,E2mail:huyz用60%的乙醇释至刻度,摇匀,静置10min后于510nm处测吸收度,得回归方程为:A=0.012721C+0.006811,r=0.9996。线性范围:0.0050.12mgmL-1。浸膏中总黄酮的测定精密称取干燥

5、恒重的浸膏0.2000g,加60%乙醇加热溶解,定容于50mL的容量瓶中,过滤,取续滤液2.00mL,按标准曲线制备项下处理。结果见表2。737第29卷第8期2004年8月August,2004ChinaJournalofChineseMateriaMedica表2正交实验结果中国中药杂志Vol.29,Issue8试验号123456789浸膏得率/%30.75135.27541.57847.58643.02841.11647.8754.67844.27总黄酮含量/%9.6109.99610.83810.8889.70810.2488.5049.7829.438公式评分7.4947.6919.1

6、769.7868.7848.8538.6889.9568.778回收率分别为103.2%,99.1%,97.5%,101.4%,104.1%,RSD2.73%(n=5)。3讨论3.1通过正交试验最佳因素水平为A2B3C3D3。正交结果分析:60%乙醇和75%乙醇已相当接近,60%乙醇提取浸膏得率虽高,但黄酮含量较低,而且过滤困难,说明浸膏中无效成分(如糖、淀粉)较多,2.1.4公式评分在正交试验结果的总体评价中,以总黄酮含量为主(占70%),浸膏得率为辅(30%)。而75%、杂质少、操作方便;,超声时间对总黄:75%乙20,提取5次。3.:分别称取杭白菊二花10.000g5份,剪碎。75%乙醇

7、100mL超声20min提取5次,按“标准曲线制备”项下处理。结果见表4。表4超声优选条件提取结果浸膏得率总黄酮含量134.9013.26239.0612.68338.0213.10436.0013.14537.1013.08公式法4,2直观分分,最提取工艺是A2B3C3D3。2.1.5正交设计实验结果分析按方差分析理论%RSD4.411.67得方差分析结果见表3。表3方差分析结果方差来源离均差平方和自由度ABC(误差)D均方1.041360.05890.015421.58548FP2.082730.117830.030843533.8206102.820.05ult

8、rasonictimesolventquantity.Conclusion:Theoptimumultrasonicare2B3C3.extraction,ultractionmethodistimesav2ing,simpletooperate,stableKeyw;ultrasonicextraction;orthogonaltest责任编辑袁桂京银翘挥发油/2环糊精包合常数的测定研究马坤芳1,任勇23,王宣3,冒麟3(1.中国药科大学新药研究中心,江苏南京210009;2.南京师范大学新药研究中心,江苏南京210097;3.湖北民康药业公司,湖北宜昌443002)摘要目的:测定中药多组分

9、/2环糊精的包合常数。方法:在多波长下探测银翘挥发油包合作用的紫外光谱特征,以经验公式处理紫外吸收2浓度关系,测定其包合常数;以相溶解度曲线验证包合比;以饱和水溶液法制备包合物,差热法进行包合物鉴定。结果:紫外测定条件下,银翘挥发油/2环糊精包合反应能够在多波长处显示良好的线形特征,包合比为11。结论:采用多波长法可测定中药多组分表观包合常数,该方法可作为中药包合物的定量研究方法之一。关键词环糊精;紫外光谱法;包合常数;相溶解度曲线;差热扫描图谱中图分类号R283.6;R284.1文献标识码A文章编号100125302(2004)0820739204随着环糊精(CD)包合技术在药学领域中的应用,包合常数(Ka)的测定显得尤为重要1。但是,目前CD在中药方面的研究大多关注于包合物制备等方面,关于Ka值测定的研究仅有中药单体Ka测24定的报道2。由于中药成分复杂,难以确定各组分及其浓度,中药多组分的Ka值测定目前未见文献报道。为探讨中药多组分包合的定量研究方法,作者对银翘挥发油/2CD的Ka值测定进行了探索。银翘挥发油为薄荷、荆芥和连翘3种药材挥发油的混合物,是银翘伤风胶囊、