石荠r总黄酮抗炎作用及其机制研究

1、石荠?r总黄酮抗炎作用及其机制研究                     作者：聂? 余陈欢 王芳芳 熊耀康 白冰冰【摘要】  目的观察石荠?r总黄酮抗炎作用并对其机制进行初步研究。方法采用二甲苯致小鼠耳肿胀，冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性增加，角叉菜胶致小鼠足跖肿胀及大鼠气囊炎等炎症模型，观察石荠?r总黄酮对不同炎症模型的抗炎作用，并测定蛋白质、前列腺素 （ ），一氧化氮（），丙二醛

2、（）含量及超氧化物歧化酶（）活性。结果石荠?r总黄酮能显著降低小鼠毛细血管通透性，抑制小鼠二甲苯致耳肿胀，减轻小鼠足跖肿胀，降低炎症组织 含量， 抑制角叉菜胶致大鼠气囊炎模型中渗出液总蛋白质含量，降低血浆， 含量，增强血浆 活性。结论石荠?r总黄酮具有明显的抗炎作用，其抗炎作用可能与其降低血管通透性、抑制 ， 等炎症介质生成及增强清除氧自由基、抗脂质过氧化能力有关。 【关键词】  石荠?r 总黄酮 抗炎 作用机制Abstract：Objective the Mosla hangzhowensis .Methods edema ， edema ， s A Mosla hangzhowe

3、nsis were obseved in ， ， （ ）， （）， （） superoxide dismuitase（） were determinedResults Mosla hangzhowensis inhibit ， ， ， increase Conclusion s mm Mosla hangzhowensis ， mediators oxygen free radical seavengirg capacity Key words：Mosla hangzhowensis ；  ；  ；      石荠?rMosla ha

4、ngzhowensis  为唇形科草本植物，为江浙民间常用中草药，具有清热解毒，理气化湿之功效，主治夏日感冒、腹痛泄泻、湿疹、疖肿、外伤出血、跌打损伤、疮毒和慢性支气管炎等1。现代药理研究表明，石荠?r含有， 桉叶油素、侧柏酮、石竹烯、香荆芥酚、百里香酚、黄酮类化合物及脂肪酸等成分2，3。本课题组前期研究发现，石荠?r中总黄酮类成分具有明显的抗菌、抗流感病毒作用，能明显改善流感病毒感染小鼠肺组织炎症4，5。本实验进一步对其抗炎作用及其机制进行系统研究，以期为石荠?r的临床应用和新药开发提供实验依据。  器材   动物 小鼠，体重 ；健康 大鼠，清洁级，体

5、重 。均由中国科学院上海实验动物中心上海斯莱克实验动物有限公司提供，动物合格证号：（浙） 。  药品与试剂石荠?r总黄酮（），由资源鉴定教研室提供。地塞米松片（批号：），浙江仙居制药厂。阿司匹林肠溶片（批号：），南京白敬宇制药有限责任公司。氢化可的松（批号：），山东新华制药股份有限公司。角叉菜胶（批号： ）， 公司。伊文思蓝（批号：，进口分装），国药集团化学试剂有限公司。 检测试剂盒（批号：）， 检测试剂盒（批号：）， 测定试剂盒（批号：），总蛋白液体试剂盒（批号：），均购自南京建成生物工程研究所。其他试剂均为分析纯。  仪器 双光束紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限

6、责任公司。 电子天平，北京赛多利斯公司。微量移液器， 。  方法与结果  对冰醋酸致小鼠毛细血管通透性的影响6取小鼠 只，雌雄各半，随机分成 组，分组及给药剂量见表（模型组给予同体积生理盐水）。每日灌胃给药， 次，连续 ，末次给药后 ，尾静脉注射伊文思蓝生理盐水溶液 ，并同时腹腔注射醋酸溶液 ， 后处死，用 生理盐水冲洗腹腔，洗液离心 （ ），取上清液在分光光度计 处，测定值。表1  TFS对小鼠毛细血管通透性的影响（略）与模型组相比，*P<0.05，*P<0.01；n=10    由表 结果可知， 能显著抑制冰醋酸致小鼠

7、毛细血管通透性，其中 ， 剂量组与模型组相比较有显著意义。  对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响6取小鼠 只，雌雄各半，随机分为 组，分组及给药剂量见表（模型组给予同体积生理盐水）。每日灌胃给药， 次，连续 ，末次给药 后，于小鼠右耳两面涂二甲苯 致炎，左耳不涂为正常耳； 后处死小鼠，沿耳廓基线剪下双耳，用直径 打孔器在同一部位取下耳片，称重，以左右耳片重量差值表示炎性肿胀程度。由表 结果可知， 能显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀，其中， 剂量组与模型组相比较有显著意义。    由表 结果可知， 能显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀，其中， 剂量组与模型组相比较有显著意义。表

8、2  TFS对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响（略）与模型组相比，*P<0.05，*P<0.01；n=10  对角叉菜胶引起足跖肿胀及炎症组织中 的影响7取小鼠 只，雌雄各半，随机分为 组，分组及给药剂量见表（模型组给予同体积生理盐水）。每日灌胃给药， 次，连续 ，末次给药后 ，于每只小鼠左后肢足跖注射角叉菜胶 ， 后颈椎脱臼处死小鼠，于踝关节处剪下左右后肢，称重，以左右后肢重量之差作为炎症肿胀程度。将剪下上述致炎足，剥皮，剪碎放入 生理盐水中浸泡 ，离心，取上清液 ，加 甲醇溶液 ，在下异构化 ，用甲醇稀释至 ，于 处测定OD 值，以每克炎症组织相当的OD 值表示 的

9、含量。百事通表3   TFS对小鼠足跖肿胀及炎症组织PGE2含量的影响（略）与模型组相比，*P<0.05，*P<0.01；n=10    由表 结果可知， 能显著抑制角叉菜胶致小鼠足趾肿胀及降低炎症组织 含量，其中 ， 剂量组与模型组相比较具有显著意义。  对角叉菜胶致大鼠气囊炎的影响6取大鼠60只，按体重随机分为 组：空白组、模型组、阳性对照组及石荠?r总黄酮高、中、低剂量组。除空白组和模型组给予同等生理盐水外，每组动物均连续灌胃给药。于给药当天在大鼠背部肩胛区皮下注入空气，第 天及第 天再次注入空气各 ，维持气囊的膨胀

10、度，并在末次给药后在大鼠背部气囊内注入 角叉菜胶 诱发炎症，空白组注入相应体积生理盐水， 后再给药 次，于致炎 后麻醉，心脏取血， 保存待测， 含量及 活性。处死动物，气囊内注入冰生理盐水（含肝素 ）进行灌洗，收集灌洗液，测定总蛋白含量。结果见表 。表4  对大鼠气囊炎模型中渗出液总蛋白含量的影响（略）与模型组相比，*P<0.05，*P<0.01；n=8    由表 结果可知，角叉菜胶致炎后， 能显著降低炎症介质渗出，其中， 剂量组均能降低大鼠气囊渗出液中总蛋白含量，降低血浆中， 含量，增强 活性，与模型组相比具有显著性差异，提示 具有显著的

11、抗炎作用。表5   对大鼠气囊炎模型中血浆SOD活性，NO，MDA含量的影响（略）与模型组相比，*P<0.05，*P<0.01；n=8  讨论    炎症是在致炎因素作用下，由炎症细胞及其释放的炎症介质参与引起的一系列病理生理过程。在炎症反应中，致炎因素引起毛细血管扩张，通透性增加，中性粒细胞趋化、游走至炎症反应灶，释放炎症介质参与炎症反应8，9，并发生呼吸暴发，产生等活性氧自由基。这些氧自由基不仅能增加血管通透性， 而且攻击生物膜磷脂中的多聚不饱和脂肪酸，引起脂质过氧化，造成生物膜损伤，尤其脂质过氧化产物 毒性更强，能进

12、一步加重炎症反应，而体内自由基清除剂如 可通过清除自由基，抑制脂质过氧化反应。 作为一种炎症因子，存在于炎症组织中，可与缓激肽、白三烯等炎症介质起协同作用，引起血管扩张，加强组胺和缓激肽升高血管通透性的作用。通过抑制的合成，可以减轻炎症反应10，11。 是一种重要的信使物质，同时也是一种重要的炎症介质，在炎症反应的许多环节发挥复杂的调节作用，其促炎症反应包括促进血管扩张，增强血管通透性，激活前列腺素合成酶等，研究认为急慢性炎症的发生均与 有关系12。本实验结果显示，石荠?r总黄酮可明显抑制二甲苯致小鼠耳肿胀和角叉菜胶致小鼠足趾肿胀，降低炎症组织 含量，降低冰醋酸致小鼠毛细血管通透性，减少角叉菜胶致大鼠气囊炎模型中渗出液总蛋白质含量，降低血浆， 含量，增强血浆 活性。提示石荠?r总黄酮具有显著的抗炎作用，其抗炎作用可能与其降低血管通透性，抑制 ， 等炎症介质生成及增强清除氧自由基、抗脂质过氧化能力有关。【参考文献】  1 浙江省卫生局浙江民间常用草药第 集杭州：浙江人民出版社，：2 江苏新医学院中药大辞典上海：上海科学技术出版社，：3 吴翠萍，吴国欣，陈密玉，等石荠?r精油的 分析及其抑菌活性的研究植物资源与环境学报，（）： 4 曾晓艳，吴巧凤，程东庆石香薷、苏州荠?r不同提取物体外抑菌作用的比较研究中国中医药科技，（）： 5 吴晓宁，吴巧凤，陈