HBV基因定量分析技术的应用价值、存在问题及展望--HBV基因定量分析技术的应用价值(一)

1、HBV基因定量分析技术的应用价值、 存在问题及展望-HBV基因定量分析技术的应用价值 一近年来HBV基因定量分析的价值受到越来越多研究者的重视 1。过去 由于过分强调了 HBV感染后过强的细胞免疫应答介导肝细胞损伤，忽 视了对病毒复制水平与致病性之间因果关系的研究。目前普遍认为， 尽管HBV不直接破坏寄生细胞，但病毒的活泼复制是启动或激发肝脏 组织炎症反响的因素。这说明确定感染者体内HBV复制状态，即从HBV 基因定量的角度作病情分析是十分有意义的。事实上，真正引起人们 关注HBV基因定量分析价值的重要原因是最近发现了干扰素治疗与 HBV基因水平两者之间有非常密切的关系。 HBV基因定量分析还

2、在转 基因动物、基因治疗、蛋白疫苗和核酸疫苗、抗HBV药物体外试验和动物试验及耐药研究、流行病学研究、HBV血液制品污染监测等方面具有重要的应用价值。一、HBV基因定量分析在干扰素治疗中的应用尚无药物可以去除所有HBV感染者体内HBV颗粒。干扰素是目前唯一 有一定疗效的一类生物制剂 2,它在病毒等诱导下由几种相关细胞产生， 并发挥抗病毒作用。但是无论使用何种干扰素，也无论治疗剂量或疗 程如何，干扰素治疗后 HBV转阴率迄今仍保持在40%左右，无法进一 步提高，究竟有哪些制约因素起作用尚无定论。近年来发现干扰素的治疗效果，即干扰素治疗后的反响性(respo nse)很大程度上取决于 HBV 在体

3、内的复制水平 2,3。以下几点事实值得注 意:治疗前HBV低水平复制者的反响性明显优于高水平复制者。HBV转阴的几乎都是那些治疗前血清 HBVDNA 含量较低者，而治疗前 HBVDNA含量特别高者大多没有疗效；治疗中病毒复制水平迅速降低 者，有望治愈。相反，治疗期间 HBV基因水平下降较慢，或下降幅度 较小，或变化不明显者，大多是无效者；治疗结束后，采用PCR定量法检测，HBVDNA完全转阴者可能不再复发，而终止治疗后HBVDNA 仍保持较低水平者，反跳的可能性较大。可见，使用干扰素治疗 HBV 感染时，在各种近期和远期疗效指标中，除了病人的临床表现是否好 转，生化指标(ALT是否改善，肝组织

4、炎症反响是否减轻等以外，血清 HBVDNA定量分析是一个十分重要的观察工程。 从现有研究资料看，除 病理检查外，HBVDNA定量检测，也许是干扰素治疗效果判断依据中最 直接、最可靠和最有价值的指标。多数研究者认为，通过HBVDNA定量分析来指导干扰素治疗，有重大意义。首先，在治疗对象的选择方 面，即确定干扰素治疗适应症时，应对各侯选病例在某个时间段内定 期反复检测HBVDNA水平，那些长期保持HBV高复制水平者不宜接受 干扰并素治疗， 或应当联合治疗； 其次，干扰素治疗期间， 可根据 HBV 基因水平的动态变化适时调整治疗剂量，决定是否缩短或延长疗程， 及是否终止治疗。 这不仅对制订合理的治疗

5、方案， 也对减轻病人负担，防止不恰当用药有指导意义 4。笔者认为，目前国际上普遍采用的所 谓“六个月疗程 及某些中高剂量治疗方案均缺乏充分和足够的立论依 据，有必要结合基因定量分析结果， 重新评价和制订干扰素治疗方案； 最后，干扰素治疗结束后，对有反响者定期作定量分析，有助于发现 复发者，并根据血清HBVDNA含量波动情况决定是否实施再治疗。有 人报告，首次干扰素治疗有效者，再治疗的效果亦佳。如果第一次治 疗无反响或反响较差者，第二次干扰素治疗仍不能取得理想疗效 5二、HBV基因定量分析的其他临床价值HBV感染后，在临床表现方面的差异非常明显，可以表现为无病症携带 者、急性肝炎、慢性肝炎、爆发

6、型肝炎、肝硬化及肝癌等多种疾病状 态。病毒在肝细胞内的复制水平与各种临床疾病状态之间可能存在着 某些必然联系。由于HBV基因定量技术的开展和成熟，目前已有可能 从某些现象上说明HBV复制与致病性之间的 量效关系。一无病症携带者可能为活动性乙肝患者6。有局部HBV感染者，由 于免疫耐受或其它原因，体内 HBV呈复制不活泼的 潜伏状态，但并 不意味着不存在进行性肝损害。 Mels 等研究发现无病症携带者在其自 然开展史上， HBV 复制处于波动状态，时有加剧，病毒复制积累到一 定程度后ALT水平增加。一般规律是：血清HBVDNA水平上升？ALT活性增加？lgM抗HBc滴度提高。因此无病症携带者应采

7、取积极治疗措施， 否那么这类人群不仅作为重要的病毒库传播HBV,而且由于隐匿性肝细胞损伤的不断积累， 不经过慢性肝炎阶段， 直接向肝硬化和肝癌开展。二HBVDNA水平与HBV感染者病情和预后的关系密切。上述无病症携 带者是一个特殊群体。而对那些急性和慢性乙型肝炎患者而言，HBVDNA水平对预后判断有帮助。研究发现 HBVDNA直保持较高水 平的急性肝炎患者易慢性化，而 HBV复制水平较高的慢性肝炎患者不 仅对干扰素治疗的反响性差， 而且肝组织炎症反响更明显， 病情更重， 更易发生肝硬化和肝癌。目前在能否用血清 HBVDNA水平来判断肝组 织炎症损伤程度这类问题上尚有争议。动物实验说明，鸭肝被 DHBV