PBS缓冲液的配制方法

1、PBS 缓冲液配方不管是免疫组化，还是细胞培养中，常用到PBS 缓冲液，下面是常用配方，供大家参考。用于细胞培养的PBS需含有氯化钾称取 8g NaCl、0.2g KCl、1.44g NaJHPO4 和 0.24g KH2PO4,溶于 800ml蒸馏水中，用 HCl 调节溶液的pH 值至7.4， 最后加蒸馏水定容至1L，灭菌即可。0.01M PBS缓冲液称取 NaCl?8g， KCl?0.2g， Na2HPO4?12H2O?3.63g,?KH2PO4?0.24，g 溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温 保存备用。一般免疫组化用PBS,主要用来清洗，都只包含Na2

2、HPO4?12H20(磷酸氢二钠) 和NaH2PO4?2H20 (磷酸二氢钠)两种组分，母液的配制： ?0.2M?Na2HPO4:称取？71.6g?NaHPO4-12H2O,溶于？1000ml冰0.2M?NaH2P04:称取？31.2g?NaH2PO4-2H2O,溶于 1000ml?zk各种浓度PB(pH=7.4)的配制：先 配 ?0.2M?PB?(pH=7.4 ，100ml) ： 取 19ml?0.2mol/L的？NaH2PO4, ?81ml?0.2mol/L?的？Na2HPO4,?可。然后？只需将0.2M?PB?(pH=7.4)按相应比例适当稀释？即可，如：0.1M?PB (PH=7.4)

3、 ?:取？500ml?0.2M?PB,力口水稀释至？1000ml?即 可。0.01M?PB?(PH=7.4):取 50ml?0.2M?PB,加水稀释至？1000ml?即可。0.02M?PB? (PH=7.4):取 100ml?0.2?M?PB,力口水稀释至？1000ml?即 可。 ?若需要？NaCL?的话，加入？NaCL?至0.9% (g/100ml)即可。？另：其它各种另？PH值的？0.2M?PB (100ml)配方？：pH?0.2M?NaH2PO(4 ml) ?0.2M?Na2HPO4( ml)5.7?93.5?6.55.8?92?8?5.9?90?106.0?87.7?12.3 6.1?

4、85?156.2?81.5?18.5 6.3?77.5?22.56.4?73.5?26.56.5?68.5?31.5 6.6?62.5?37.56.7?56.5?43.5 6.8?51?496.9?45?55 7.0?38?62 7.1?33?677.2?28?72 7.3?23?77 7.4?19ml?81ml7.5?16?84 7.6?13?877.7?10.5?0.5 7.8?8.5?91.5 7.9?7?93 8.0?5.3?94.7?关于磷酸缓冲溶液的一些问答PBS可以为三种溶液的英文缩写，分别是1 .磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffered solution)、2 .磷

5、酸盐缓冲盐水(phosphate buffered saline)及3 .磷酸盐缓冲钠(phosphate buffered sodium),其配制方法不同，pH值不同，发挥的生物学作用亦不完全相同。如无特殊说明，生物学上常用的 PBS是中性磷酸盐缓冲溶液(phosphate buffered solution)。无钙镁离子磷酸缓冲盐水(PBS)(0O5Mol/L PH 7.2)NaCl 8.0gKCl 0.2gNa2HPO4 1.15g(如为 Na2HPO4 12H2O,则为 2.89g)KH2PO4 0.2g将上述试剂依次溶于1 000ml去离子水中，完全溶解后，115c高压 灭菌10mi

6、n15min,存在4c冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细 胞分散剂以及洗涤细胞培养物。 常用的都是第二种。问题1:磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffered sodium),为什么用第 三种或第一i种呢：这么多年以来我都以为PBS就是磷酸盐缓冲溶液，其他两种说 法的英语名称常见到，不过我一直都以为他们是差不多的东西。不同 的汉语翻译倒是第一次听说。我们公司用的PBS有很多种，抗体组用的中和 PBS配方就比较 简单，没有K+离子， 只起到缓冲PH的作用；Na2HPO4+ KH2PO4 按照不同比例混匀，可以得到不同 PH的缓冲液，用于不同目的， 这个在分子生物学中用得很多；用于活细胞或

7、者细菌处理的，为了保持渗透压，会加入其他的溶液，最常见的就是 NaCl和KCl调节 离子浓度。以上是个人的理解，欢迎批评。：问题2:既然抗体组的PBS是起到缓冲PH的作用，那加入80G的N ACL作用是什么？需要平衡渗透压吗？还有加入K离子的是不是因为细胞上NA-K泵的原因啊，血清里面又没有细胞，何来NA-K泵一 说啊？我觉得之所以这么配，其实就是对血清中缓冲环境的一种模拟罢 了，血清里面又没有细胞，何来 NA-K泵一说啊？问题3:不加NACL会怎么样啊？多省钱啊在中和磷酸盐缓冲液中，NaCl的主要作用应当是保持一定的离 子浓度，以维持抗体的活性。在离子浓度过高或过低的情况下，蛋白 质都会变性，抗体当然不例外。ps：哺乳类需用生理盐水浓度是0.9%。称取0.9克氯化钠，溶解在少 量蒸储水中，